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教育部留学回国人员科研启动基金(KJ200603)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
韩钰
王艳林
任玉珊
秦烨
曹春雨
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相关机构:
三峡大学
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发文基金:
教育部留学回国人员科研启动基金
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韩钰
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细胞与分子免...
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2010
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融合基因CRT/vGPCR的构建及其在真核细胞膜上的表达
被引量:3
2010年
目的:将人钙网蛋白(CRT)基因与病毒G蛋白偶联受体(vGPCR)基因进行基因重组融合,由此将CRT携带到肿瘤细胞膜表面。方法:从pSG5-vGPCR质粒中获得全长vG-PCR基因片段并与CRT全长编码序列的3′端连接形成融合基因,然后将融合基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。用此质粒转染人A549肺癌细胞后,用RT-PCR检测重组融合基因的表达,用免疫荧光细胞化学和流式细胞术分析鉴定融合蛋白的表达及其在细胞膜上的定位。结果:成功获得重组融合质粒pcDNA3.1(+)-CRT/vGPCR,经DNA序列测定证实融合基因两阅读框(ORF)对接无误。将上述质粒转染A549细胞后,融合基因可在A549细胞中表达并定位到细胞膜上。结论:通过与CRT基因融合重组,具有膜定位能力的vGPCR能将CRT蛋白高效包被到肿瘤细胞膜上。
秦烨
韩钰
曹春雨
任玉珊
王艳林
关键词:
融合基因
CRT
细胞膜
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