山西省卫生厅科技攻关计划项目(200910)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 相关作者：贺杰峰李辉宇赵浩亮苗青旺田彦璋更多>>
- 相关机构：山西医科大学第一医院太原市中心医院山西省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：山西省卫生厅科技攻关计划项目更多>>
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- Nucleophosmin基因表达载体的构建及其在HepG2中的表达
- 2010年
- 目的克隆Nucleophosmin(NPM)的编码序列,构建含Nucleophosmin基因的真核细胞表达载体并在肝癌细胞系HepG2中表达,为进一步研究该基因在肝癌多药耐药中的作用奠定基础。方法根据已发表的Nucleophosmin基因的核苷酸序列设计合成一对引物,以人乳腺癌组织抽提的RNA为模板进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物用BamHI和XhoI双酶酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pEGFP-N1中,用限制性内切酶酶切重组质粒pEGFP/NPM和DNA序列测定进行鉴定。用脂质体法将pEGFP/NPM导入肝癌细胞系HepG2中,G418选择培养,经免疫组织化学法和RT-PCR鉴定其表达。结果 RT-PCR扩增出长894bp的特异性片段,经克隆至pEGFP-N1后酶切鉴定证实,并测序表明序列与GenBank报道完全一致。pEGFP/NPM在HepG2细胞中有稳定表达。结论成功克隆了NPM的编码序列,构建了其真核细胞表达载体pEGFP/NPM/1,有助于对NPM基因在肝癌多药耐药中的机制做进一步研究。
- 李辉宇罗飞赵浩亮贺杰峰肖红
- 关键词：肝肿瘤
- 黄芪甲苷逆转耐药肝癌细胞株HepG2/GCS多药耐药的研究被引量：10
- 2011年
- 目的探讨黄芪甲苷对耐药肝癌细胞株HepG2/GCS多药耐药的逆转作用及可能机制。方法以噻唑蓝(MTT)法测定黄芪甲苷的细胞毒作用和处理前后肝癌细胞对阿霉素的敏感性变化,通过Westernblot法检测细胞GCS蛋白的表达。结果黄芪甲苷在实验浓度范围内对HepG2、HepG2/GCS细胞均无明显毒性;浓度为40μg/ml的黄芪甲苷可逆转HepG2/GCS细胞对阿霉素的耐药性,逆转倍数为1.50,同时细胞内GCS蛋白的表达下降。结论黄芪甲苷具有逆转HepG2/GCS细胞多药耐药的作用,可能与下调细胞内GCS基因表达有关。
- 田彦璋苗青旺赵浩亮李辉宇贺杰峰
- 关键词：黄芪甙
