国家自然科学基金(81160102) 作品数:5 被引量:9 H指数:2 相关作者: 黄勤 邓玉风 杨立会 黄娟娟 莫书荣 更多>> 相关机构: 广西医科大学 广西壮族自治区人民医院 广西医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Caveolin-1在1型糖尿病大鼠肾脏中的改变及其意义 被引量:3 2013年 目的研究caveolin-1在1型糖尿病大鼠肾脏中表达的变化,探索caveolin-1与1型糖尿病肾病发病的关系。方法将SD大鼠分成正常对照组与1型糖尿病组。用实时荧光定量聚合酶链式反应(q-PCR)检测大鼠肾脏中caveolin-1的RNA表达量,采用2-△△ct的方法进行分析。用免疫印迹法(western-blot)检测大鼠肾脏中caveolin-1蛋白表达量。结果与对照组相比,1型糖尿病组中大鼠肾脏的RNA表达量无变化,而蛋白表达量升高(P<0.05)。结论 Caveolin-1的增多可能参与了1型糖尿病肾病的发生发展。 杨立会 黄娟娟 谢露 莫书荣 黄勤关键词:CAVEOLIN-1 糖尿病肾病 Caveolin-1在2型糖尿病大鼠肾脏中的改变及其意义 被引量:1 2013年 目的:研究caveolin-1在2型糖尿病大鼠肾脏中的表达变化,探索caveolin-1与2型糖尿病肾病发病的关系。方法:将SD大鼠分成正常对照组与2型糖尿病组,用实时荧光定量PCR检测大鼠肾脏中caveolin-1的RNA表达量,采用2-△△ct的方法进行分析。用免疫印迹法(western-blot)检测大鼠肾脏中caveolin-1蛋白表达量。结果 :与正常对照组相比,2型糖尿病组中大鼠肾脏的RNA表达量无变化,而蛋白表达量升高(P<0.05)。结论:caveolin-1的增多可能参与了2型糖尿病肾病的发生发展。 杨立会 黄娟娟 谢露 莫书荣 黄勤关键词:糖尿病肾病 CAVEOLIN-1 荧光定位法快速准确筛选一种GFP重组质粒细胞株 被引量:3 2016年 筛选脂质体介导的稳定转染细胞株的方法需要较多重复工作才能完成,尤其是转染效率不高的细胞。本研究报道一种快速准确获取稳定转染细胞株的方法,供同类实验参考。我们构建的真核表达载体带有可用于筛选阳性克隆的绿色荧光基因和Neo基因,采用脂质体将其转染入C2C12细胞,并用G418筛选阳性克隆,荧光显微镜下挑选绿色荧光与目的基因表达的蛋白在细胞内定位一致的细胞株,Western Blot可检测到融合蛋白表达,免疫共聚焦显示目的蛋白表达量增加;荧光散在分布于整个细胞的细胞株,经Western Blot检测没有融合蛋白表达。因此,根据GFP绿色荧光分布的位置可以准确挑选带有目的基因重组质粒的稳定细胞株。 邓玉风 黄亿元 胡世凤 黄媛恒 路文盛 黄勤关键词:稳定转染 细胞株 荧光蛋白 A preliminary study of caveolin-3 in the myocardium of type 2 diabetic rats <正>Objective To investigate the pathogenesis of the type 2 diabetic cardiomyopathy through preliminarily obser... Juan-juan Huang Li-hui Yang Jing Ma Lu Xie Shu-rong Mo Qin Huang关键词:MYOCARDIUM 文献传递 Caveolin-3基因多态性的筛查及其在中国汉族糖尿病患者中的特点 被引量:2 2014年 目的:观察我国汉族正常人和2型糖尿病(T2DM)患者Caveolin-3(CAV3)基因的多态性差异,并介绍一种研究CAV3相关遗传病的实用方法。方法:CAV3基因只有2个很短的外显子,使用PCR-SSCP进行筛查,然后选择性测序。针对性地设计引物,经过PCR-SSCP分别测定50例正常人和50例T2DM样本的基因外显子基因多态性情况。结果:PCR-SSCP发现T2DM患者CAV3基因电泳变异累计发生率为48%,而正常人变异累计发生率为7%,存在显著差异(P<0.001)。抽查变异条带,测序证实发生了碱基变异。结论:中国人T2DM的CAV3基因存在增加的多态性特征,PCR-SSCP法可有效地进行初步筛查;提示CAV3基因多态性可能是中国人T2DM发生的遗传背景之一。 黄勤 黄亿元 邓玉风 冼晶 路文盛 韦红巧关键词:糖尿病 基因多态性 PCR-SSCP 脂质体介导的C2C12肌细胞瞬时转基因技术 被引量:1 2016年 C2C12细胞是常用于研究的肌细胞,广泛适用于肌肉再生、肌肉疾病、糖脂代谢以及药物研究实验。由于肌细胞结构较特殊,基因转染不容易成功。本文介绍脂质体介导的肌细胞瞬时转基因技术,国内外未见详细报道。我们实验室经优化细胞密度、质粒DNA纯度以及转染最佳时间等条件,并改变底物和稀释液的成份,将细胞分成几组:1底物Opti-MEM+稀释物DMEM组;2底物Opti-MEM+稀释物Opti-MEM组;3底物无血清DMEM+稀释物无血清DMEM组;4底物无血清DMEM+稀释物Opti-MEM组;5底物含10%FBS的DMEM+稀释物DMEM组进行转染。24 h后荧光倒置显微镜观察各组荧光表达情况,48 h Western Blot检测GFP蛋白表达。结果 C2C12细胞瞬时转染的细胞数量和荧光强度达到理想效果。其中第3组GFP蛋白表达水平明显高于第5组(p<0.05)。这是一种方便有效的脂质体介导C2C12细胞转基因技术。 黄亿元 邓玉风 尚丽娜 杨立会 马静 黄娟娟 黄勤关键词:C2C12 脂质体 转基因