深圳市科技计划项目(200803142)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 相关作者：黄烈陆学东张银辉林广城韦洁宏更多>>
- 相关机构：广东医学院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌常见大环内酯类耐药基因快速检测和分析被引量：6
- 2010年
- 目的利用SYBRGreenI实时荧光定量多重聚合酶链反应(PCR)结合融解曲线分析,对金黄色葡萄球菌(SA)常见大环内酯类耐药基因进行快速检测和分型,结合D-试验及时为临床提供用药信息。方法利用含有ermA、ermB、ermC、msrA及16srDNA引物的SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR体系对89株表型大环内酯耐药SADNA进行扩增,结合融解温度曲线分析进行初筛,对具有4种大环内酯类耐药基因的扩增产物进行电泳以确定型别,并对37株红霉素耐药而克林霉素敏感的菌株进行D-试验,确认是否诱导耐药。结果 88株细菌具有耐药基因,5株msrA,31株ermA,11株ermB,36株ermC,3株ermA+ermC,1株ermB+ermC,1株ermA+ermB;D-试验阳性31株,红霉素诱导克林霉素耐药率83.78%(31/37)。结论本地区大环内酯耐药SA以ermC、ermA基因型为主,检出率分别为40.45%和34.83%;红霉素诱导克林霉素耐药在SA中日益严重;应选择D-试验作为大环内酯耐药的常规筛查试验以辅助临床用药。
- 黄烈夏成静张银辉聂署萍林广城韦洁宏陆学东
- 关键词：基因
- SYBR GreenⅠ实时荧光定量多重PCR快速筛查葡萄球菌中常见大环内酯类耐药基因被引量：4
- 2008年
- 目的评价SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR结合熔解曲线分析快速筛查葡萄球菌常见大环内酯类耐药基因的可行性,利用此筛查方法了解深圳地区葡萄球菌中大环内酯类耐药基因的分布情况。方法选取经测序鉴定携带有大环内酯类耐药基因ermA,ermB,ermC,msrA的葡萄球菌,用一个包括这四种耐药基因引物的SYBRGreenI多重实时荧光定量PCR检测,经荧光定量曲线和熔解温度曲线(Tm值)确证和反应条件优化后建立针对大环内酯类常见耐药基因的初筛体系;随机选取临床136株葡萄球菌,利用此初筛体系对136株葡萄球菌是否携带常见大环内酯类耐药基因进行检测,并对检测结果和表型、电泳、测序结果进行比较,从而对此方法进行评价。对携带有大环内酯类耐药基因的细菌进行基因型别的鉴定,以了解大环内酯类耐药基因的分布情况。结果此SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR初筛体系检测葡萄球菌常见大环内酯类耐药基因与表型检测比较达到94.8(129/136)的一致性,与琼脂糖凝胶电泳结果和测序结果比较达到100的一致性。136株葡萄球菌检出msrA,ermA,ermB,ermC四种耐药基因,耐药基因总检出率为75.7(103/136),并发现多株携带多种大环内酯类耐药基因的葡萄球菌。结论SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR可以快速准确地筛查葡萄球菌是否携带有常见的大环内酯类耐药基因;深圳地区葡萄球菌大环内酯类耐药率较高,主要耐药基因是ermC56.6(77/136),msrA24.2(33/136),ermA12.5(17/136)。
- 夏成静黄烈陆学东刘键杨来智张海燕
- 葡萄球菌对大环内酯类抗生素耐药及诱导耐药表型与基因型的相关性研究被引量：1
- 2009年
- 目的了解葡萄球菌对大环内酯类抗生素生物耐药表型与基因型的符合情况,分析耐药基因检出与生物耐药诱导的关系,并预测细菌耐药流行趋势,从基因水平指导临床合理用药。方法用KB纸片法检测本院2004～2005年分离的136株葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,以聚合酶链反应(PCR)法检测葡萄球菌MsrA、vgb、Sat4、ermA、ermB、ermC、mphA、MefA/E、ereA、ereB 10种耐药基因,并将其耐药表型与基因型进行比较。将对红霉素表型敏感而耐药基因阳性的菌株进行诱导,对比诱导前后药敏结果。结果136株葡萄球菌对红霉素耐药的占80.88%,对红霉素和克林霉素同时耐药占43.38%,结果表明葡萄球菌对大环内酯类有较高的耐药率。耐药基因检测结果表明,共检出MsrA、Sat4、ermA、ermB、ermC、mphA、ereB 7种耐药基因,耐药基因检出率为83.82%。其中核糖体甲基化酶基因ermC的阳性率最高,占检测基因的67.54%;其次为Sat4、MsrA、ereB、ermA、ermB、mphA,分别占50.00%、28.95%、22.81%、15.80%、9.65%、1.75%。MRSA、MRCNS、MSSA、MSCNS菌株耐药基因的检出率分别为100.00%、90.78%、73.08%、55.55%。11株对红霉素敏感而耐药基因阳性的菌株经红霉素诱导后有9株转为耐药,诱导阳性率为81.82%。结论葡萄球菌对大环内酯类抗生素有较高的耐药性,在部分敏感株中检测出耐药基因,经诱导可产生耐药,提示菌株有潜在耐药性,需特别引起临床的重视。临床微生物实验室应同时开展表型及基因型检测,指导临床更加合理使用抗生素。
- 黄烈林广城张银辉夏成静刘键张海燕陆学东
- 关键词：葡萄球菌属大环内酯类抗菌药
