国家自然科学基金(31201886)
- 作品数：9 被引量：41H指数：3
- 相关作者：赵瑞利王选马吉飞韩俊友冯新更多>>
- 相关机构：天津农学院吉林大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 新牛蛙抗肿瘤肽RGD-T-La(FS)嵌合体的设计及其抗肿瘤作用被引量：12
- 2018年
- 为了研究新牛蛙抗肿瘤肽RGD-嵌合体的抗肿瘤作用及其对肿瘤细胞的作用机制。本研究以新牛蛙抗菌肽Temporin-La（T-La）为基序，通过生物信息学分析，改变特定氨基酸残基设计合成新的抗肿瘤肽Tempor[n-La（S）（T-La（S））和Temporin-La（FS）（T—La（FS）），氨基端偶联RGD肽成RGDT—La、RG胁T-La（S）和RGD-T—La（FS）抗肿瘤肽，通过圆二色谱检测多肽二级结构，MTT法体外筛选抗肿瘤细胞活性多肽。使用流式细胞仪测定不同肿瘤细胞对不同多肽的吸收量，筛选对抗肿瘤肽敏感的肿瘤细胞。利用激光共聚焦显微镜实时观察抗肿瘤活性强的抗肿瘤肽对敏感肿瘤细胞的杀伤作用，并用扫描电镜观察抗肿瘤肽及其RGD嵌合体肽对肿瘤细胞的作用机制。在新牛蛙抗菌肽Temporin—La基序上设计T—La（S）和T—La（FS）2种抗肿瘤活性肽，圆二色谱仪测定其二级结构均呈a螺旋型，MTT结果显示黑色素瘤细胞（B16）对几种多肽的敏感性最强，10mg／L质量浓度时，RGD-T-La（FS）对B16的毒性作用最强，细胞存活率为24．65％。激光共聚焦显微镜实时观察到，RGD-La（FS）和RGl3-La（S）对肿瘤细胞都有较强的杀伤作用。扫描电镜结果显示，RGD嵌合体多肽对肿瘤细胞的杀伤作用具有位点靶向性。流式细胞仪检测HepG2对FITC-RGD-T—La（FS）的吸收量最大，检测到荧光强度为800950．70。经改造的多肽T—La（FS）可以增加其对肿瘤细胞的杀伤作用，且偶联RGD的嵌舍体RGD-T—La（FS）对肿瘤细胞的杀伤作用更具有靶向专一性，为抗肿瘤肽作为抗肿瘤药物的临床应用提供科学依据。
- 刘梦月刘珊珊付超赵瑞利胡烨马吉飞韩文瑜朱琳张秋利
- 关键词：抗肿瘤作用
- 猪链球菌重组靶向表位蛋白DCpep-GSE的构建及细胞毒性检测
- 2021年
- 试验旨在构建pET28a-DCpep-GSE原核表达载体,并制备猪链球菌(Streptococcus suis)重组表位蛋白。应用生物信息学方法预测猪链球菌保护性抗原三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、烯醇化酶(Enolase)、DNA核酸酶(SsnA)的跨膜区结构、信号肽、B细胞表位、辅助T细胞(Th细胞)表位及蛋白的二级结构;设计重组蛋白(DCpep-GSE蛋白)的氨基酸序列并分析其理论等电点、亲疏水性等理化性质;构建重组原核表达载体pET28a-DCpep-GSE,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,优化诱导表达条件,His镍柱纯化并检测目的蛋白的细胞毒性和溶血性。结果显示,SsnA蛋白第1-50及1036-1059位氨基酸为胞内或跨膜片段,第1-56位氨基酸为信号肽片段,GAPDH和Enolase无跨膜区及信号肽;B细胞和Th细胞表位处于二级结构中的无规则卷曲与β-转角区域,表位抗原性良好;DCpep-GSE蛋白共373个氨基酸,分子质量为45.3 ku,理论等电点(pI)为4.57,平均亲水性(GRAVY)为-0.677,属于酸性亲水性蛋白;质粒双酶切得到5369 bp的载体条带和1131 bp的目的条带,PCR扩增产物测序结果与设计序列一致,载体构建正确;以1 mmol/L IPTG于37℃诱导6 h蛋白表达量最高,超声破碎后得到可溶性蛋白;试验组蛋白浓度为500μg/mL时,RAW264.7、PK15和MARC145细胞的相对增殖率分别达到92.3%、99.5%和99.7%,细胞形态与对照组一致,生长旺盛;各样品组的溶血率均<5%。本研究设计了重组蛋白DCpep-GSE,成功地表达和纯化了DCpep-GSE蛋白,并验证了其安全性,为后续猪链球菌病亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 潘晨浩张欣赵瑞利姜轩金天明于恩远李留安曾君于晓雪宋淇淇胡烨
- 关键词：猪链球菌抗原表位亚单位疫苗细胞毒性
- 响应性聚集金纳米粒子体系用于细菌的体外热疗研究被引量：2
- 2019年
- 目的利用发生响应性聚集后的金纳米粒子体系的较强的光热特性,研究其对细菌的体外光热杀伤作用。方法通过Au-S键反应将合成好的多肽A和多肽B分别修饰到金纳米粒子(GNPs)表面,然后等比例混合组成GNPssystem。首先利用动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)研究其在弱酸性条件下的响应性聚集情况,利用多功能酶标仪研究其在在弱酸性条件下的紫外吸收变化;然后为了了解该纳米粒子在菌液中的光热转换情况,分别测定其在弱酸性条件下溶液内和与细菌作用后的温度变化曲线;进一步考察其体外抗菌效果。结果DLS检测到合成的GNPssystem在弱酸性条件下粒径由16nm增大到900nm左右,并在TEM下可见明显的聚集体,并且在650~900nm的紫外吸收信号明显增高。在模拟细菌的弱酸性环境下,GNPssystem在激光照射条件下均实现了溶液和细菌混合溶液的快速升温,且最高温度可达69.8℃,与对照组GNPs-PEG2000相比具有显著的统计学差异;体外抗菌实验结果显示,GNPssystem对金黄色葡萄球菌的杀伤力最强,50μg/mL浓度时就可杀死约50%的细菌;浓度为200μg/mL时基本上可以完全杀死,与对照组GNPs-PEG2000相比较具有显著的统计学差异。结论本研究为GNPs的设计提供了新的思路,为GNPs用于光热治疗提供了新的方法。
- 付超常静林姜轩张从柔张玉民褚丽萍赵瑞利
- 关键词：金纳米粒子细菌光热治疗
- 新牛蛙活性肽Catesbeianin-1a的抗菌抗肿瘤作用被引量：5
- 2013年
- 通过筛选牛蛙皮肤cDNA文库得到具有较强抗菌抗肿瘤活性肽Catesbeianin-1a,合成其成熟肽氨基酸序列,MIC法测定抑菌活性结果表明,Catesbeianin-1a对临床常见的致病菌具有较强的抑菌活性,其中对猪链球菌2型的MIC为2.5mg/L,且对兔红细胞几乎无溶血性。MTT法测定多肽抗肿瘤细胞活性,结果 Catesbeianin-1a对胃癌细胞和肝癌细胞的抑杀活性很强,对肝癌细胞SGC7901的IC50为0.845mg/L。制作透射电镜超薄切片,利用透射电镜观察活性肽对细菌和肿瘤细胞超微结构的影响,旨在初步探讨牛蛙皮肤活性肽Catesbeianin-1a抗菌、抗肿瘤的作用机制,并以Catesbeianin-1a为基础进行分子改造来提高其抗肿瘤的靶向性并降低其毒性。
- 赵瑞利韩俊友韩文瑜刘珊珊马吉飞雷连成冯新张安国王选
- 关键词：抗菌抗肿瘤透射电镜
- 1203例临床患猫的血象红细胞分析研究被引量：1
- 2018年
- 对1 203例临床患猫的红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW-S)和红细胞变异系数(RDW-C)进行了分析研究。结果表明:(1)1 203只临床就诊患猫中脱水患猫占18.95%,贫血患猫占9.64%;贫血患猫中,轻度贫血病例占61.74%,中度贫血病例占24.35%,重度贫血病例占11.30%,极重度贫血病例占2.61%。(2)859只临床HGB正常患猫的RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-S和RDW-C的范围分别是(2.27~13.84)×1012/L、11.60%~59.00%、26.90~94.60 f L、9.30~29.70 pg、240.00~576.00 g/L、23.00~54.54fL和12.50%~37.10%。(3)116例贫血患猫中,大红细胞性、正常红细胞性、单纯小红细胞性和小红细胞低色素性贫血病例分别占26.72%、56.90%、14.66%和1.72%;大红细胞、正常红细胞和小红细胞均一性贫血病例分别占9.48%、16.38%和3.45%,非均一性贫血病例则分别占17.24%、40.52%和12.93%。
- 张安国赵瑞利雷磊李玥胡嘉宁郝志明
- 关键词：HGBHCTMCVMCHMCHC
- 新型牛蛙抗菌肽Temporin-La对金黄色葡萄球菌感染模型小鼠的治疗效果被引量：2
- 2013年
- 目的探讨新型牛蛙抗菌肽Temporin-La对金黄色葡萄球菌感染模型小鼠的治疗效果。方法采用二倍稀释法检测抗菌肽Temporine-La对临床主要致病菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);透射电镜观察Temporine-La对金黄色葡萄球菌的作用效果;复制金黄色葡萄球菌表皮感染小鼠模型,分别用4 U/ml青霉素和10μg/ml Temporin-La进行治疗,另设生理盐水对照组和空白对照组,感染后第4天,对各组小鼠进行白细胞计数、细菌计数、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平检测及病理组织切片观察。结果Temporin-La对革兰阳性菌的抑菌活性高于革兰阴性菌,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强;透射电镜观察显示,经100μg/ml Temporin-La处理的金黄色葡萄球菌出现了质壁分离的现象,细胞壁缺失或发生裂解,金黄色葡萄球菌发生裂解而死亡;感染后第4天,青霉素组和Temporin-La组白细胞数及创面下肌肉组织细菌数均明显低于生理盐水对照组(P<0.05或P<0.01),Temporin-La组小鼠血清VEGF的表达水平明显高于青霉素组和空白对照组(P<0.05),青霉素组和Temporin-La组小鼠的创口修复情况明显优于生理盐水对照组。结论 Temporin-La具有抗小鼠金黄色葡萄球菌感染的效果,为其临床应用提供了实验依据,也为抗感染治疗提供了新的思路。
- 赵瑞利韩文瑜韩俊友金天明冯新雷连成孙长江王选
- 关键词：牛蛙抗菌肽金黄色葡萄球菌
- 牛蛙凝集素的小鼠体内组织分布及抗肿瘤研究
- 凝集素是能够凝集红细胞,与糖蛋白或糖链特异性结合的生物活性肽,其中小分子量凝集素由于低毒性和低免疫原性可作为理想的药物靶向和输送载体。目前,海洋生物及甲壳类动物凝集素报道较多,且大多数分子量大于10KDa,具有免疫原性及...
- 朱琳
- 关键词：抗肿瘤靶向载体
- 文献传递
- 粪肠球菌动物致病的研究进展被引量：19
- 2013年
- 粪肠球菌又称粪链球菌,能在不同环境中生长存活,对外界环境抵抗力较强,部分属于动物肠道中的正常菌群,还有部分在长期的进化中出现了毒力基因。近年来,粪肠球菌感染人和动物的报道日益增加,逐渐得到人们的广泛关注。论文综述了猪、牛、羊、禽和犬粪肠球菌的主要致病性、毒力基因及耐药性,为防制动物粪肠球菌感染提供参考。
- 刘燕霏杨建德赵瑞利
- 关键词：粪肠球菌致病毒力基因耐药性
- 抗菌肽作为饲料添加剂的研究进展
- 2013年
- 抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽,具有广谱抗革兰氏阳性、阴性菌活性,对真菌、某些有包膜的病毒、寄生虫以及某些肿瘤细胞也有抑制作用。由于其独特的抗菌机制,其有可能成为新的抗生素替代品,同时也可作为一种高效优质的绿色饲料添加剂。本文介绍了抗菌肽的分类、功能、作用机理及在畜禽生产中的应用发展前景。
- 胡烨马吉飞赵瑞利
- 关键词：抗菌肽
- 两种牛蛙活性肽结构及体外抗肿瘤细胞增殖作用的研究被引量：1
- 2015年
- 试验旨在研究新发现的两种牛蛙活性肽对人肺癌细胞NCFH446、人乳腺癌细胞MCF-7及小鼠白血病细胞K5623种肿瘤细胞体外增殖的影响，为新的多肽抗肿瘤药筛选提供依据。本试验利用圆二色谱（cD）法检测两种新牛蛙活性肽的二级结构，通过MTS细胞毒试验测定不同浓度的两种新牛蛙活性肽对人肺癌细胞NCI-H446、人乳腺癌细胞MCF-7及小鼠白血病细胞K5623种瘤细胞体外增殖的影响。圆二色谱法结果显示，Temporin-Lb的二级空间结构为聚脯氨酸Ⅱ型螺旋（PPⅡ）结构，Catesbeianin-1a的二级空间结构为无规则卷曲。MTS细胞毒试验结果显示，给予Catesbeianin-1a的3种瘤细胞培养24h后，瘤细胞形态无明显变化，正常增殖，而给予Tem—porin-Lb的3种瘤细胞培养24h后，瘤细胞发生皱缩、细胞变圆、脱落甚至死亡，增殖受到抑制，其中对Temporin-Lb在4-40μmol／L浓度范围内对小鼠白血病细胞K562的抑制效果最为明显。结果表明，新牛蛙活性肽Tempor—in-Lb具有一定的抑瘤作用，Catesbeianin-1a对瘤细胞的体外增殖没有明显影响。
- 王选马吉飞赵瑞利胡烨申杰林东东
- 关键词：体外抑瘤
