国家自然科学基金(30972008)
- 作品数:4 被引量:7H指数:1
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- 番茄GGPS2基因的克隆与表达载体的构建被引量:7
- 2010年
- =牛儿基=牛儿焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPS)在=牛儿基=牛儿焦磷酸合成、植物代谢和生长发育中具有重要作用.采用RT-PCR的方法,从番茄品种Solanum lycopersiconL.cv.AilsaCraig成熟果实中扩增出GGPS2基因,分别构成了该基因的原核与植物表达载体.
- 李翠萍夏蓓蓓翟军鹏苏承刚张兴国
- 关键词:番茄
- 番茄质体转化载体pTom-GFPaadA的构建
- 2010年
- 采用Pri mStar HS DNA聚合酶从番茄基因组DNA中扩增出了质体的trnI-trnA基因序列.序列分析结果表明,所克隆的基因与GenBank公布的序列完全相同,与烟草的trnI-trnA基因序列同源性高达94%.将该片段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn∷gfp-aadA∷TpsbA表达盒的番茄质体定点转化载体pTom-GFPaadA,酶切鉴定表明,所构建的载体符合预期设计.
- 夏蓓蓓翟军鹏陈吉裕张香琴张兴国
- 关键词:番茄质体
- 大肠杆菌共表达LeGGPS2、LePSY1和crtI基因合成番茄红素被引量:1
- 2012年
- 利用大肠杆菌研究番茄红素的合成,不仅可以获得副产物少的高产菌株,而且可以探讨基因或基因簇的功能。文中将番茄LeGGPS2和LePSY1的cDNA序列,及欧文氏菌crtI的编码序列分别添加上核糖体结合位点后,以单独或组合的方式受控于T7启动子和终止子,在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中进行表达和诱导番茄红素合成。结果显示,仅T7::crtI-LeGGPS2-LePSY1三价基因共表达时才能合成番茄红素,且将种子液以1∶50接种于含3%蔗糖的LB培养基(pH 6.8)中,于37℃摇8 h左右的对数生长后期加IPTG至80μmol/L,30℃诱导表达5 h的发酵条件下,获得2.124 mg/g DCW的番茄红素。该结果既验证了原核化的番茄LeGGPS2和LePSY1基因及与crtI基因协同作用的功能,又为在番茄质体中建立独立的番茄红素合成途径奠定了基础。
- 陈吉裕蒲志群肖雅文李翠萍杜小兵苏承刚张兴国
- 关键词:大肠杆菌番茄红素