江苏省重点实验室开放基金(KJS050002)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：徐州市肿瘤医院徐州医学院江苏大学附属徐州医院更多>>
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- 鞘内注射γ-氨基丁酸转运体-1特异性小干扰RNA对大鼠神经病理性痛的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨鞘内注射γ-氨基丁酸转运体-1（GAT-1）特异性小干扰RNA（siRNA）对大鼠神经病理性痛的影响。方法雄性SD大鼠，体重200～250g。第一部分实验20只大鼠随机分为5组（n=4）：GAT-1 siRNA-1组、GAT-1 siRNA-2组、GAT-1 siRNA-3组、阴性对照siRNA组和DEPC处理组。坐骨神经结扎2d后鞘内注射相应的siRNA 2 μg／d或等容量DEPC水，连续3d，于末次鞘内注射后第2天取大鼠脊髓腰膨大，采用Western blot法检测脊髓背角GAT-1蛋白的表达。第二部分实验30只大鼠随机分为3组（n=10）：GAT-1 siRNA-3＋lip02000组、GAT-1 siRNA-3错译siRNA＋lipo2000组和DEPC处理＋lipo2000组，于坐骨神经结扎前、坐骨神经结扎后3d、鞘内续给药结束后1、3、5、7、10d时测定机械痛阈和热痛阈。第三部分实验84只大鼠随机分为3组（n=28），同第二部分实验，于各时点每组随机取4只大鼠处死，取脊髓腰膨大，采用Western blot法测定脊髓背角GAT-1蛋白的表达。结果鞘内注射GAT-1 siRNA后神经病理性痛大鼠机械痛阈和热痛阈升高，脊髓背角GAT-1蛋白表达下调（P〈0．05）。结论鞘内注射GAT-1 siRNA可通过抑制脊髓背角GAT-1蛋白表达上调，减轻大鼠神经病理性痛。
- 朱珊珊孔德强曾因明
- 关键词：Γ氨基丁酸小分子干扰
- 脊髓背角γ氨基丁酸转运体-1在大鼠骨癌痛中的作用
- 2011年
- 目的评价脊髓背角γ-氨基丁酸转运体-1（GAT-1）在大鼠骨癌痛中的作用。方法清洁级健康雌性SD大鼠80只，体重150～180g，采用随机数字表法，将其随机分为5组（n=16）：假手术组（Ⅰ组）；骨癌痛组（Ⅱ组）采用胫骨上段骨髓腔接种Walker-256乳腺癌细胞的方法制备大鼠骨癌痛模型；假手术＋GAT-1选择性抑制剂NO-711组（Ⅲ组）和骨癌痛＋NO-711（Ⅳ组）于术后第14天鞘内注射NO-71120μg，1次／d，连续3d；骨癌痛＋生理盐水组（V组）于术后第14天鞘内注射10μl生理盐水，1次／d，连续3d。于术前1d、术后第3、5、7、10、14、16天时测定大鼠机械痛阈，术后第16天机械痛阚测定后处死大鼠，取腰段脊髓，采用Westernblot法检测脊髓GAT-1的表达，采用免疫荧光双标法观察Ⅰ组和Ⅱ组大鼠患侧脊髓GAT-1和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫反应阳性产物的共表达。结果与Ⅰ组和Ⅲ组比较，Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组术后第7—16天机械痛阈降低，Ⅱ组和V组术后GAT-1表达上调（P〈0．05）；与Ⅱ组和V组比较，Ⅳ组术后第16天鞘内给药后机械痛阈升高，脊髓背角GAT-1表达下调（P〈0．05）；与Ⅰ组比较，Ⅱ组患侧脊髓GFAP和GAT-1共表达增加（P〈0．05）。结论脊髓背角GAT-1的表达上调参与了大鼠骨癌痛的形成与维持，该作用可能与脊髓星形胶质细胞的活化有关。
- 朱珊珊谭珊珊曾因明
- 关键词：Γ-氨基丁酸转运体骨肿瘤疼痛脊髓
- 鞘内注射γ-氨基丁酸转运体抑制剂NO-711在骨癌痛大鼠脊髓水平抑制磷酸化细胞外信号调节激酶1／2的上调
- 2011年
- 目的探讨脊髓水平脊髓细胞外信号调节激酶1／2（extracellular regulated kinase1／2，ERK1／2）活化在大鼠骨癌痛发生中的作用。方法实验1：雌性SD大鼠48只，体重160g-200g，按随机数字表法分成2组（每组24只），A组（对照组）、B组（模型组）。采用胫骨上段骨髓腔接种Walker-256乳腺癌细胞方法制备大鼠骨癌痛模型。于术前1d、术后1、3、5、7、10、14、21d测定大鼠机械刺激缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold，MWT）和自由行走痛行为学评分（arabulatory-evoked painscores，APS），术后第7、14、21天取大鼠腰段脊髓，采用Western blot方法检测ERK1／2的表达。实验2：60只大鼠按随机数字表法分为5组（每组12只）：S组、N1组、N2组、N3组和N4组。假手术组＋生理盐水（S组）、骨癌痛＋生理盐水（N1组）、骨癌痛＋NO-71110ug（N2组）、骨癌痛＋NO-71120ug（N3组）、骨癌痛＋NO-71140ug（N4组）。于术后第14天鞘内分别给予生理盐水（S组、N1组）、γ-氨基丁酸转运体（γ-aminobutyric acid transporter-1，GAT-1）抑制剂NO-711 10 ug（N2组）、NO-711 20ug（N3组）、NO．711 40ug（N4组）。最后一次给药后0．5、1、2、4、8、12、24h观察大鼠MWT和APS，于给药后4h取腰段脊髓，采用Western blot方法检测脊髓磷酸化细胞外信号调节激酶（phopho-extracellular regulated kinasel／2，p-ERK1／2）的表达。结果实验1：与A组和手术前比，从术后第7天开始，B组MWT（8．02±0．30）显著降低（P〈0．01），APS（0．88±0．22）和p-ERK1／2表达显著升高（P〈0．01）。实验2：与给药前相比，N1组大鼠MWT和APS在鞘内给予生理盐水（NS）后无明显改变。与给药前和N1组相比，NO-711可显著提高骨癌痛大鼠MWT（P〈0．05），其作用时间可分别达8h（N2组，6．49±0．64）和12h（N3组12．40±1．37、N4组11．48±0．69），但不能改善骨癌痛大鼠APS。免疫蛋白印�
- 来珊珊谭珊珊曾因明
- 关键词：细胞外信号调节激酶
- 鞘内注射巴氯酚对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及其对脊髓GABA转运体-1的影响被引量：6
- 2011年
- 目的研究鞘内注射GABAB受体激动剂巴氯酚(ba-clofen,Bac)对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及其对脊髓GABA转运体-1的影响。方法建立坐骨神经结扎致神经病理性痛大鼠模型。在行为学实验部分,将32只大鼠随机分为NS组、Bac1组、Bac2组、Bac3组(n=8),分别鞘内注射生理盐水、0.1、0.3、1.0μg巴氯酚10μl,并分别于给药前、给药后0.5、1、2、4、8、12、24 h测定大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawl threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawl latency,TWL)以及运动功能。在第2部分,将大鼠分为NS组与Bac组,鞘内分别给予0.3μg巴氯酚或生理盐水,分别于给药前、给药后1、4、8 h取大鼠脊髓腰段,免疫组织化学检测脊髓节段GAT-1免疫阳性神经元(n=6);分别于给药前、给药后30 min、1、2、4、8、12和24 h取大鼠脊髓腰段,用Western blot方法测定脊髓节段GAT-1蛋白含量(n=4)。结果鞘内注射巴氯酚后0.5～2 h,Bac1组、Bac2组与Bac3组大鼠MWT和TWL均较NS组明显升高(P<0.01,P<0.05),鞘内给药后4 h,Bac2与Bac3组大鼠MWT和TWL仍较NS组明显升高(P<0.01,P<0.05),给药后8 h,Bac3组MWT与TWL仍高于NS组(P<0.05)。与NS组和给药前比较,鞘内注射0.3μg巴氯酚后0.5～4h,大鼠脊髓节段的GAT-1蛋白含量均明显降低(P<0.01,P<0.05),大鼠脊髓背角浅层GAT-1免疫阳性染色灰度值亦明显降低(P<0.01,P<0.05),至给药后8 h,GAT-1的表达逐渐增多,与NS组和给药前相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鞘内注射GABAB受体激动剂巴氯酚可减轻坐骨神经结扎致神经病理性痛大鼠的痛觉过敏,其镇痛作用可能与抑制脊髓水平GAT-1的表达有关。
- 朱珊珊谭珊珊曾因明
- 关键词：慢性压迫损伤脊髓Γ-氨基丁酸转运体巴氯酚
