广东省自然科学基金(S2012010009271)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 腹腔注射WSLP/NR2B siRNA复合物对大鼠神经病理性痛的影响
- 2014年
- 目的 评价腹腔注射水溶性脂聚体（WSLP）/含2B亚基的N-甲基-D-天冬氨酸受体（NR2B） siRNA复合物对大鼠神经病理性痛的影响.方法 健康雄性SD大鼠84只,6周龄,体重180～ 200 g,采用随机数字表法分为7组（n=12）：空白对照组（C组）、假手术组（S组）、神经病理性痛组（NP组）、WSLP/NR2B siRNA组（siWSLP组）、WSLP/阴性对照siRNA组（ncWSLP组）、PE[/NR2B siRNA组（PEI组）和WSLP组.C组不给予任何处理,S组仅暴露L5脊神经但不结扎,NP组、siWSLP组、ncWSLP组、PEI组及WSLP组采用结扎L5脊神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型,于模型制备后第10天分别单次腹腔注射WSLP/NR2B siRNA、WSLP/阴性对照siRNA、PEI/NR2B siRNA及WSLP复合物2ml.于术前1d、术后7d及腹腔给药后3、7、14及21 d时随机取6只大鼠测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足反应潜伏期（TWL）;于腹腔注射后3d余6只大鼠处死后取脊髓,采用PCR法检测脊髓NR2B mRNA表达水平,采用Western blot法检测脊髓NR2B蛋白的表达水平.结果 与C组比较,其余组术后7d及腹腔给药后3、7和21 d时MWT降低,TWL缩短,腹腔给药后3d时脊髓NR2B mRNA及其蛋白的表达上调（P＜0.01）;与NP组比较,siWSLP组腹腔给药后3和7d时MWT升高,TWL延长,腹腔给药后3d时脊髓NR2B mRNA及其蛋白的表达下调（P＜0.01）,PEI组、ncWSLP组、WSLP组及S组各指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 腹腔注射WSLP/NR2B siRNA复合物可有效减轻大鼠神经病理性痛.
- 杨雪吴昊澎彭捷熊家祥陆建华
- 关键词：基因疗法
- WSLP运载siRNA抑制炎性疼痛大鼠脊髓背角 NMDA 受体1基因表达的可行性被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨低分子量聚乙烯亚胺(PEI)和胆固醇组成的水溶性脂聚体(WSLP)运载siRNA抑制炎性疼痛大鼠脊髓背角(SCDH)N-甲基-D-天冬氨酸受体功能亚基(NR1)基因表达的可行性及其对炎性疼痛大鼠机械性痛阈值的影响。方法:将WSLP直接与靶向NR1的siRNA连接形成WSLP/siRNA复合物,乱序siRNA作为对照(WSLP/scRNA);然后分别检测鞘内注射WSLP/siRNA对炎性痛模型大鼠SCDH NR1转录水平及蛋白水平表达的影响,并且测定鞘内注射此复合物后炎性痛大鼠50%机械性痛阈值的变化。结果:WSLP/siRNA注射后3 d,炎性疼痛大鼠SCDH NR1转录水平表达下降41%(P<0.01),蛋白水平的表达相应下降58%(P<0.01),WSLP/scRNA及PEI/siRNA注射后NR1转录水平及蛋白水平的表达无明显变化。WSLP/siRNA鞘内注射后3、7、14及21 d炎性痛大鼠的50%机械性痛阈值显著增高(P<0.01),WSLP/scRNA及PEI/siRNA均无此作用。结论:WSLP可有效运载siRNA抑制慢性炎性痛大鼠NR1的过度表达,从而治疗炎性疼痛大鼠痛觉过敏。
- 马国亮杨雪董文芳彭捷陆建华党健
- 关键词：炎性疼痛小干涉RNA
- Tat-LK15介导siRNA干扰大鼠脊髓背角nNOS表达对神经病理性疼痛的治疗作用被引量：3
- 2017年
- 目的探讨细胞穿透肽Tat-LK15介导siRNA干扰大鼠脊髓背角神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达对神经病理性疼痛的治疗效应。方法采用Tat-LK15介导FAM-siRNA转染原代大鼠脊髓背角神经元细胞(RN-dsc),于倒置荧光显微镜观察其转染效果。健康雄性SD大鼠50只,随机分为5组(n=10):正常组、假手术组、神经病理性疼痛组(SNL组)、Tat-LK15-nNOS siRNA组(TS组)和Tat-LK15-NC siRNA组(TN组)。采用脊神经结扎法(SNL)制作神经病理性疼痛模型,正常组不予任何处理,假手术组仅暴露脊神经;SNL组、TS组、TN组构建SNL模型同时鞘内置管,于第7天开始每天分别鞘内注射10μl生理盐水、10μl含5μg siRNA的Tat-LK15-nNOS siRNA和Tat-LK15-NCsiRNA,持续7d。建模前1d及建模后3、7、10、14d测定各组大鼠机械缩足反应阈值(PWMT)及热缩足反应潜伏期(PWTL)。第14天测定结束后取L4-6节段脊髓,采用q-PCR及Western blotting检测脊髓背角nNOS表达水平。结果倒置荧光显微镜观察显示,Tat-LK15可成功介导siRNA转染原代大鼠脊髓背角神经元。与假手术组比较,SNL组建模后第3天起PWMT降低、PWTL缩短,脊髓背角nNOS mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),正常组上述指标与假手术组比较差异无统计学意义;与SNL组比较,TS组第10、14天时PWMT增高、PWTL延长,脊髓背角nNOS mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),TN组上述指标与SNL组比较差异无统计学意义。结论 Tat-LK15可成功介导nNOS siRNA转染脊髓背角神经元,沉默nNOS基因的过度表达,对SNL大鼠神经病理性疼痛具有一定的治疗作用。
- 饶云彭捷陆建华吴昊澎杨秀环屠伟峰
- 关键词：神经元型一氧化氮合酶神经病理性疼痛
