四川省应用基础研究计划项目(2012JY0078)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：席德慧陈应娟林宏辉刘健张静更多>>
- 相关机构：四川大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金四川省应用基础研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 辣椒脉斑驳病毒对烟草活性氧代谢和光合特性的影响被引量：5
- 2014年
- 以普通烟为材料,研究了感染辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)后烟草叶片的生理活性以及光合特性的变化.结果表明ChiVMV侵染后宿主体内活性氧(超氧离子和H2O2)大量积累,而在CMV感染的植株中产生的活性氧较少.伴随活性氧的增加相关抗氧化物酶(SOD,CAT,POD)的活性也有升高.进一步测定叶绿素荧光参数发现,感病后烟草叶片的Fv/Fm、qP以及ETR等值明显降低,qN、NPQ值升高,并且ChiVMV对宿主光合参数的影响明显强于CMV.通过比较ChiVMV和CMV引起症状的差异性,发现ChiVMV的侵染使得植物产生大量的活性氧,造成了叶绿体结构的氧化性损伤,植物光合速率降低、叶绿体内淀粉粒积累减少,进而造成光合生物量的减少,植物生长受阻,导致感病植株的死亡.
- 张萍刘健朱峰陈应娟张静唐荷林宏辉席德慧
- 关键词：黄瓜花叶病毒活性氧抗氧化酶叶绿素荧光
- 芜菁皱缩病毒P38蛋白的原核表达及抗血清的制备被引量：2
- 2015年
- 从感染芜菁皱缩病毒(TCV)的拟南芥中提取总RNA,通过反转录PCR(RT-PCR)扩增得到TCV的外壳蛋白基因P38.在目的基因ORF框两边引入酶切位点BamHⅠ和SacⅠ,并连接到表达载体pET30-a上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,37℃经0.5mM/L IPTG诱导6h后获得了分子量约为48kD的融合蛋白.经Ni-NTA纯化目的蛋白,注射大白兔制备抗血清.Western blot结果表明制备好的抗血清能成功检测感染TCV的拟南芥.
- 张静朱峰陈应娟邓星光刘健林宏辉席德慧
- 关键词：外壳蛋白原核表达抗血清制备
- 辣椒脉斑驳病毒侵染性克隆构建的简易方法被引量：1
- 2015年
- 本文介绍了一种构建辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)侵染性克隆的简易方法.基于辣椒脉斑驳病毒的全长确定序列,根据基因内部的单一限制性酶切位点,设计引物,将ChiVMV分成KL1,KL2,KL3三个片段通过RT-PCR和TA克隆的方法将3个片段构建到PMD19-T载体上.通过双酶切将ChiVMV前面7000bp的片段构建到载体上,从而将全部的ChiVMV cDNA分段构建到两个重组质粒中,成功地避免了全长病毒序列在大肠杆菌中不稳定的现象.进行体外转录时,先通过PCR扩增出两个彼此有一定重叠的平末端片段,再利用两个重叠片段为模板用重叠PCR的方法扩增出全长带T7启动子的ChiVMV cDNA,并通过T7RNA聚合酶成功转录出ChiVMV的病毒RNA.
- 刘健赵霏霏陈应娟吴阳晨朱桐席德慧林宏辉
- 关键词：侵染性克隆体外转录重叠PCR
