深圳市科技计划项目(200326) 作品数:66 被引量:265 H指数:9 相关作者: 刘志刚 吴海强 吴序栎 邬玉兰 李荔 更多>> 相关机构: 深圳大学 海口市人民医院 深圳市微生物基因工程重点实验室 更多>> 发文基金: 深圳市科技计划项目 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
深圳市秋季气传致敏花粉的调查 被引量:5 2011年 应用Burkard采样器对深圳市气传花粉浓度进行监测,并对花粉浓度进行统计分析.探讨深圳市秋季气传花粉的种类、数量及季节消长规律,为本地区防治花粉症提供有效资料.本次调查共曝片244张,1.5 m和30 m 2个高度采集点各122张.曝片共识别花粉39种,12 850粒,其中1.5 m高度7881粒,占总数的61.3%;30 m高度4 969粒,占总数的38.7%,曝片所见以草本花粉为主,禾本科、菊科花粉最多.调查结果可以为本地区花粉症防治及绿化品种的选择提供可靠依据. 肖小军 刘玉琳 谢雄杰 胡东生 刘晓宇 易海涛 刘志刚关键词:气传花粉 飘散 鸡蛋过敏原分离、鉴定与纯化 被引量:8 2009年 目的对鸡蛋中主要过敏原进行分离、鉴定与纯化。方法分别提取鸡蛋的蛋清与蛋黄的蛋白,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离鸡蛋的蛋白质组份,采用免疫印迹(Western-blotting,WB)方法鉴定过敏原,通过离子交换层析对鸡蛋主要过敏原进行初步纯化。结果WB检测显示,蛋黄与鸡蛋过敏患者的阳性混合血清没有反应;蛋清中有4条蛋白带起反应,分子量分别为83,71,38,13 kD,尤以13 kD的蛋白质最为明显,离子交换层析可初步纯化出13 kD的过敏原蛋白。结论鸡蛋的主要过敏原为13 kD的蛋白质,为临床诊断和治疗鸡蛋过敏性疾病提供标准化的过敏原提供了基础依据。 吴序栎 杨志华 刘志刚 吉坤美关键词:离子交换层析 鱼虾贝类的主要过敏原分子免疫学特性研究进展 被引量:9 2008年 李启沅 李荔 刘志刚关键词:食物过敏 小清蛋白 双抗体夹心ELISA法测定食物中虾过敏原成分 被引量:11 2009年 通过建立双抗体夹心ELISA法测定食物中虾过敏原成分,为食物过敏的预防与诊断提供理论基础。提取虾中过敏原蛋白,免疫小鼠制备抗虾过敏原的多克隆抗体,并以多克隆抗体包被酶标板,生物素标记多抗,建立双多抗体夹心的ELISA法测定食物中虾过敏原成分。成功地研制出双抗体夹心ELISA法检测食品中虾过敏原蛋白成分,具有特异性,其最低检出限为40ng/mL,标准曲线在40~1000ng/mL范围内线性良好。初步建立了检测虾过敏原蛋白成分的ELISA法,并具有较好的特异性和灵敏度,为进一步研制虾过敏原成分的ELISA检测试剂盒打下了基础。 吴序栎 吉坤美 李佳娜 詹政科 刘志刚关键词:ELISA 多克隆抗体 食物过敏 化学发光免疫法检测美洲大蠊sIgE水平的研究 被引量:2 2006年 将6只美洲大蠊全虫用液氮研磨提取粗浸液,用阴离子交换剂(DEAE,SephadexA-50)纯化后测定蛋白浓度,并配制成不同浓度梯度,分别将粗浸液及纯化后的不同浓度变应原点于硝酸纤维膜(NC膜)上,依次加入不同蟑螂过敏患者血清、生物素-亲和素系统的IgE二抗和辣根过氧化物酶(HRP),以及鲁米诺化学发光底物进行化学发光反应。结果表明,化学发光免疫法可检测美洲大蠊粗浸液最低蛋白浓度为0.87μg/ml。在此浓度下,其检出结果与皮试阳性患者血清符合率为90%,与皮试阴性及健康人血清的符合率均为100%。 王勤 刘志刚 吉坤美关键词:美洲大蠊 特异性变应原 SIGE 化学发光 酶联免疫 小麦品种“中国春”主要过敏原CM16基因的克隆及序列分析 2009年 为了给小麦主要过敏原CM16蛋白的重组表达和免疫活性鉴定等研究奠定基础,通过生物信息学方法设计并合成简并性引物,利用RT-PCR技术对小麦主要过敏原CM16基因进行克隆,并进行序列分析。结果表明,克隆获得了小麦主要过敏原CM16基因。基因开放阅读框为432个碱基(包括终止密码子),编码143个氨基酸。该序列编码的蛋白相对分子质量约为15 782,等电点为5.17。序列同源性分析发现其与国外报道的已知小麦CM16基因具有很高的同源性(同源性为99%),因此认为其系小麦过敏原基因,在GenBank数据库中的登录号为EU883599。 邬玉兰 刘志刚 余汉谋 伍文琪关键词:小麦 基因克隆 紫红笛鲷过敏原小清蛋白基因克隆及序列分析 被引量:5 2008年 目的克隆紫红笛鲷(Lutianus argentimaculatus)过敏原小清蛋白(parvalbumin)基因。方法采用生物信息学方法对多种鱼的小清蛋白基因进行序列性比对,根据序列保守区域设计并合成简并性引物,通过实时(RT)-PCR和3′cDNA末端快速扩增RACE技术克隆紫红笛鲷小清蛋白的全长基因,并进行序列分析。结果获得紫红笛鲷全长608 bp的新基因,开放阅读框为330个碱基,编码109个氨基酸,经分析该蛋白分子量约为11.5kD,等电点为4.35。序列分析结果显示所克隆的基因与其他鱼类过敏原小清蛋白基因有很高的同源性。结论成功克隆出紫红笛鲷过敏原小清蛋白基因(登录号为:EF591789)。 李荔 吴曾闵 刘志刚关键词:紫红笛鲷 过敏源 小清蛋白 基因克隆 带鱼过敏原的分离、鉴定与纯化 被引量:5 2008年 目的分离、鉴定和纯化带鱼特异性过敏原。方法采用Coca′s提取液提取带鱼蛋白;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blotting分析其中的过敏原;阴离子交换层析对过敏原进行分离纯化。结果带鱼粗浸液蛋白分子量在8~130kDa之间;Western-blotting检测到分子量为12、18、25、27、29、34、38、54和60kDa的过敏原蛋白;通过离子交换层析分离得到较纯的分子量为18、38kDa的过敏原蛋白,且具有免疫活性。结论发现了带鱼中多种过敏原,并对2种过敏原分离纯化,为带鱼过敏的诊断和治疗奠定了理论基础。 杨睿 吴海强 刘志刚关键词:带鱼 大豆主要过敏原Gly m Bd 30K基因的克隆及其原核表达载体的构建 被引量:5 2009年 利用RT-PCR克隆大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增大豆Gly m Bd 30K的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体。结果表明:克隆了大豆主要过敏原Gly m Bd 30K基因,且构建了其原核表达载体。该基因含有长度为1 140 bp的开放阅读框,编码379个氨基酸。该蛋白质的相对分子质量为42 758,等电点为5.08。序列同源性分析发现其与数据库中已知的Gly m Bd30K基因同源性很高,因此认为其是大豆的过敏原基因,在GenBank数据库中的登录号为EU883600。克隆的大豆主要过敏原Gly m Bd 30K基因及构建的原核表达载体,为大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的重组表达和免疫活性鉴定等奠定基础。 邬玉兰 刘志刚关键词:大豆 GLY M BD 克隆 原核表达载体 大闸蟹过敏原的分离、鉴定与纯化 被引量:7 2009年 目的:对大闸蟹的主要过敏原进行分析、鉴定与纯化。方法:过SDS-PAGE电泳分离大闸蟹的蛋白质组分,采用免疫印迹(Western-blotting)方法鉴定过敏原,通过离子交换层析对大闸蟹主要过敏原进行初步纯化。结果:大闸蟹粗提液SDS-PAGE显示,其蟹身、四肢和蟹黄的蛋白条带不同,大闸蟹全身含量高的蛋白有9条,Western-Blotting显示蟹全身蛋白出现了5条明显的阳性条带,分子量分别为25、23、21、19 ku和11 ku。离子交换层析可初步纯化出11 ku的过敏原蛋白。结论:对大闸蟹过敏原成功进行分离和鉴定,并初步纯化出腰果的主要过敏原。 吴序栎 邓利平 刘志刚关键词:大闸蟹 SDS-PAGE