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重庆市自然科学基金(2006BB5301)
作品数:
1
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2009
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肝癌细胞HepG2间的P-糖蛋白传递作用
被引量:2
2009年
目的探讨肝癌细胞株HepG2细胞间是否存在P-糖蛋白(P—gp)的传递及P—gp与多药耐药基因(mdr1)的关系。方法将pSUPER.neo+GFP质粒转染至HepG2细胞(命名为HepG2/GFP),并与阿霉素耐药HepG2细胞(命名为HepG2/ADM)混合培养。激光共聚焦显微镜观察肝癌细胞间P-gp的传递。免疫磁珠法分离混合培养细胞,收集原HepG2/GFP细胞(命名为HepG2/aqMDR),采用Western blot分析HepG2、HepG2/ADM、HepG2/GFP、HepG2/aqMDR细胞的P—gp表达水平,同时应用实时荧光定量PCR分析这些细胞mdr1 mRNA的表达水平。多样本均数比较用单因素方差分析,进一步两两比较用SNK—q检验。结果荧光显微镜下可见大量带绿色荧光的稳定克隆。激光共聚焦显微镜下见HepG2/aqMDR细胞以黄色荧光为主,而HepG2/GFP以绿色荧光为主,HepG2/ADM以红色荧光为主。Western blot检测结果显示HepG2/aqMDR细胞中P—gp表达水平低于HepG2/ADM,但明显高于HepG2/GFP(q=35.07,P〈0.05)与HepG2(q=36.87,P〈0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,HepG2/ADM细胞中mdr1 mRNA表达水平较高,而HepG2/aqMDR、HepG2、HepG2/GFP三组细胞中mdr1的mRNA表达水平差异没有统计学意义(F=2.30,P〉0.05)。结论P—gp可以从耐药肝癌细胞传递至敏感肝癌细胞,这一现象为进一步研究肝癌多药耐药机制提供了新的思路。
陈龙
左国庆
吴进峰
曾贵利
李涛
刘作金
唐开福
关键词:
P糖蛋白
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