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霍乱毒素B亚单位在乳酸乳球菌食品级表达系统中的分泌性表达: 2009年; 目的在乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）食品级分泌性表达系统L．lactis MBP71／pSQZ和L．lactisMBP71／pSQ中克隆表达霍乱毒素B亚单位（CTB），实现CTB的分泌性表达。方法采用PCR扩增霍乱弧菌569B菌株染色体中CTB蛋白编码基因片段，克隆到食品级分泌表达载体pSQZ和pSQ中，转化入宿主菌L．1actisMBP71，构建CTB的分泌性表达系统L．lactisMBP71／pSQz—ctB和LlactisMBP71／pSO—ctB；采用Western．blot检测重组菌株中CTB的表达及表达量。结果PCR扩增得到CTB编码基因片段ctB，酶切、连接到载体pSQZ和pSQ并转化到宿主菌L．lactisMBP71中，构建了分泌性表达系统L．1actisMBP71／pSQZ，ctB和L．lactisMBP71／pSQ．ctB。Western．blot检测发现，L．lactisMBP71／rISQ．ctB和L．1actisMBP71／pSQZ．ctB系统均能分泌性表达CTB，L．lactisMBP71／pSQ—ctB上清的表达量约为2μg/ml；L．lactisMBP71／pSQ—ctB的表达效率远远高于L．lactisMBP71／pSQZ—ctB。结论成功实现了CTB在食品级表达系统中的分泌性表达。; 孙强正李振军李娟王艺婷金东郑霄张晓嫒熊衍文叶长芸徐建国; 关键词：乳酸乳球菌霍乱毒素B亚单位食品级载体分泌性表达

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中国疾病预防控制中心青年科研基金(2009A103)