江苏省医学重点学科基金(XK200709)
- 作品数：7 被引量：39H指数：3
- 相关作者：胡娅莉朱海燕杨滢朱瑞芳张颖更多>>
- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院扬中市人民医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省医学重点学科基金南京市医学科技发展项目南京市卫生局重点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 非多态性位点多重荧光定量PCR技术在产前诊断胎儿染色体非整倍体异常中的应用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨非多态性位点多重荧光定量PCR（QF-PCR）技术快速产前诊断胎儿染色体非整倍体异常的可行性。方法2006年3月至2007年11月间，收集南京大学医学院附属鼓楼医院早孕期自然流产绒毛组织、中孕期羊水及妊娠晚期的胎儿脐血共63例为研究组。同期60例健康成年人外周血标本（男、女性各30例）作为正常对照组。采用非多态性位点QF-PCR技术检测两组各样本的染色体非整倍体异常情况，以人釉原蛋白基因（AMXY）位点为内参照，根据公式计算剂量系数（DQ）值，DQ值在0．7～1．3之间为正常，〉1．3为染色体扩增，〈0．7则为染色体存在缺失。当2个以上位点电泳峰与AMXY比值异常时，为性染色体数目异常，即各位点与性染色体峰面积比值均〉2．0或〈0．7。将QF-PCR的检测结果与染色体核型分析结果进行比较。结果（1）正常对照组中女性性染色体检测结果为AMX，男性性染色体检测结果为AMX、AMY，与染色体核型分析结果一致。各常染色体DQ值的均值为0．7～1．3，标准差为0．05～0．12。（2）研究组63例中有19例为染色体非整倍体异常，其中13例与核型分析结果一致。与核型分析结果不一致的6例中，1例在18q22．3的CNDP2基因位点表现为三体改变，位于18q12．1的CDH2基因位点表现为正常二倍体，其DQ值为1．28，染色体核型分析为47，XY，＋18；5例非多态性位点QF-PCR结果提示有染色体拷贝数异常，而核型分析结果未见异常，其中1例为47，XY，＋13，核型分析结果为46，XX；1例为Y染色体缺失，而核型分析结果为46，XY；另外3例中1例为47，XX，＋16，2例为47，XX，＋13，而核型分析结果均为46，XX。（3）研究组63例中有44例染色体为正常二倍体，其中36例（82％）与核型分析结果一致。与核型分析结果不一致的8例中，1例为培养失败；2例非多态性QF-PCR结果为正常男性�
- 朱湘玉胡娅莉王亚平朱海燕李洁朱瑞芳张颖吴星杨滢
- 关键词：非整倍性产前诊断
- 假性软骨发育不全家系软骨寡聚物基质蛋白基因检测与产前诊断被引量：1
- 2009年
- 骨软骨发育不良，多表现为不同程度的生长发育迟缓，严重者可致死亡。根据临床表现和X线改变，2006年Superti—Furga和Unger进行了骨软骨发育不全疾病的统一分类。假性软骨发育不全（pseudoachondroplasia，PSACH）和多发性骨骺发育异常（multiple epiphyseal dysplasia，MED）两者均与软骨发育关系紧密，PSACH和大部分MED为常染色体显性遗传病，表现为不同程度的身材矮小，关节疼痛及僵硬，常合并早期出现的骨关节炎，PSACH临床表现更为严重，一般在2岁后表现出异常，即短肢型侏儒。
- 杨滢朱海燕李洁朱瑞芳张颖吴星段红蕾
- 关键词：假性软骨发育不全产前诊断基因检测常染色体显性遗传病骨软骨发育不良家系
- 散发型DMD／BMD家系突变分析及产前诊断研究被引量：5
- 2009年
- 目的分析散发型DMD／BMD家系中患者的致病突变，为部分家系的胎儿进行产前基因诊断，明确该类家庭中女性成员是否致病突变携带者，分析该类家系新发突变的比例。方法共收集30个散发DMD／BMD家系，应用传统mPCR方法分析DMD基因缺失热区中的18个外显子；应用MLPA方法，对家系中的30例患者及23个家系中的28位女性成员，进行DMD基因全部79个外显子的定量分析，并为其中19个家系进行20例产前诊断。结果mPCR检测到19例缺失突变；MLPA检测到21例缺失突变和3例重复突变，并明确缺失突变范围。在检测到突变的家系中，10例母亲为缺失突变携带者，2例为重复突变携带者，9例母亲不是携带者，新发突变比例为37．5％。7例患者的姐妹中5例为携带者（3例缺失，2例重复），2例不是携带者。经产前诊断，12例男性胎儿中5例为患者，8例女性胎儿中2例为携带者。结论MLPA方法可全面检测DMD基因缺失及重复突变、明确女性携带者，为产前诊断提供准确信息。
- 朱海燕李洁杨滢吴星朱湘玉朱瑞芳张颖段红蕾胡娅莉
- 关键词：DMD基因产前诊断
- 多重荧光定量PCR方法检测X-连锁鱼鳞病家系女性携带者
- 2008年
- 目的分析一个汉族X-连锁鱼鳞病家系中类固醇硫酸酯酶（STS）基因的致病突变，明确家系中3名女性可能携带者身份，并比较不同方法在STS基因缺失突变检测中的应用。方法采用普通PCR方法，对家系中男性先证者进行STS基因10个外显子的扩增，明确是否存在缺失。采用多重荧光定量聚合酶链反应（QF-PCR）方法对X-连锁鱼鳞病家系部分女性成员进行STS基因定量分析。并应用荧光原位杂交（FISH）技术进行验证。结果普通PCR方法检测到先证者STS基因第1—10号外显子缺失；多重QF-PCR方法检测到先证者母亲为STS基因缺失突变携带者，先证者妹妹及表妹均不存在该缺失。FISH检测结果与QF-PCR结果相同。结论对于STS基因完全缺失型患者及女性携带者，多重QF—PCR和FISH两种方法均能有效检测，但多重QF—PCR方法对STS基因缺失的检测操作方便、自动化程度高、检测通量高。
- 朱海燕李海波邬玲仟朱湘玉李洁杨滢朱瑞芳吴星段红蕾张颖胡娅莉
- 关键词：聚合酶链反应
- X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良家系基因突变研究被引量：7
- 2008年
- 目的研究X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良（X-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda，SEDL）患者的发病机理，并探讨该病的快速基因诊断方法。方法应用逆转录聚合酶链反应，结合序列分析方法，对一个X-SEDL家系2例患者及育龄女性进行SEDL基因突变分析。结果cDNA序列分析显示患者为G209A突变，并对突变所在第4外显子进行PCR扩增并测序进一步证实。患者女儿为该突变的携带者。结论由于SEDL基因较小，直接对患者提取总RNA，逆转录后直接进行PCR扩增、测序，可直接发现基因阅读框内的多种类型的突变，相对于针对每一个外显子单独扩增检测更加直接、快速。
- 朱海燕李洁朱瑞芳吴星段红蕾杨滢张颖胡娅莉
- 关键词：X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良基因诊断
- “胎儿心脏筛查指南”在产前超声筛查胎儿先天性心脏病中的应用价值被引量：21
- 2009年
- 目的探讨2006年国际妇产科超声协会公布的“胎儿心脏筛查指南”在产前超声筛查胎儿先天性心脏病中的应用价值。方法2006年9月—之007年7月在南京大学医学院附属鼓楼医院母胎医学中心接受胎儿超声筛查的单胎孕妇5000例。平均年龄28岁（18～48岁），平均孕周27周（妊娠18～40周）。以“胎儿心脏筛查指南”为标准对胎儿四腔心和左、右心室流出道及三血管切面进行扫查，对疑有心脏异常者进一步行胎儿超声心动图检查，对确诊先天性心脏病胎儿建议羊水或脐血穿刺行染色体核型分析，终止妊娠者行胎儿尸体心脏解剖；继续妊娠者，于胎儿出生后2～6个月行超声心动图随访。结果（1）超声筛查各切面获取率：5000例单胎孕妇中，四腔心切面获取率为97．64％（4882／5000），其中左、右心室流出道及三血管切面的获取率分别为87．69％（4281／4882）、82．51％（4028／4882）和96．29％（4701／4882）。5000例孕妇中，孕中期筛查2750例，孕晚期筛查2250例，孕晚期各标准切面的获取率明显低于孕中期（P〈0．05）。（2）胎儿先天性心脏病发病率：4882例胎儿中最终诊断先天性心脏病73例，发病率为1．50％（73／4882），其中产前超声确诊50例（孕中期24例、孕晚期26例）。超声漏诊23例，误诊1例，合并其他器官畸形18例。（3）随访结局：产前诊断为先天性心脏病的胎儿中接受尸体心脏解剖19例，均与产前超声诊断结果一致；继续妊娠者胎儿出生后接受超声心动图检查12例，其中与产前诊断符合11例，另1例产前诊断三尖瓣关闭不全，产后超声检查正常。接受染色体检查23例，染色体核型异常7例。（4）产前超声筛查的敏感性与特异性：四腔心切面确诊先天性心脏病胎儿28例，同时加入左、右心室流出道及三血管切面共诊断先天性心脏病50例，诊断的敏感性为69�
- 徐燕胡娅莉茹彤顾燕杨燕戴晨燕
- 关键词：心脏缺损先天性产前超声心动描记术
- 富含半胱氨酸蛋白61多克隆抗体的制备及其在子痫前期胎盘检测中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的:制备兔抗人富含半胱氨酸蛋白(Cyr61)多克隆抗体,并用该抗体检测Cyr61蛋白在重度子痫前期(PE)和正常妊娠胎盘中的差异表达。方法:用RT-PCR法从Hela细胞中克隆Cyr61全长mRNA,并在大肠杆菌中表达获得重组蛋白,免疫新西兰白兔得到兔抗人Cyr61多克隆抗体。然后用此抗体对14例重度子痫前期胎盘进行检测,并与孕周匹配的14例正常胎盘比较。结果:Cyr61DNA测序结果与参考序列一致;Western blot竞争法证实制备的兔抗Cyr61抗体与商品化的羊抗Cyr61抗体有共同的靶点;用制备的兔抗人Cyr61蛋白抗体Westernblot检测发现,在重度PE胎盘中Cyr61蛋白含量较正常胎盘含量降低(14.2±1.0vs.29.2±1.1P<0.05)。结论:本研究成功地在大肠杆菌中表达出Cyr61融合蛋白,并制备了特异性高的兔抗人Cyr61抗体。重度PE胎盘中Cyr61蛋白表达水平降低。
- 苏莉刁振宇胡娅莉张艳青王志群
- 关键词：重组蛋白多克隆抗体子痫前期
- 脊髓性肌萎缩症携带者基因诊断及产前诊断研究
- 目的 探讨多重连接依赖性探针扩增(MLPA)技术在脊髓性肌萎缩症(SMA)携带者基因诊断及产前诊断中的应用。方法 选择来自8个SMA家系的患者4例,父母16例,胎儿4例,应用MLPA技术进行分析,对患者同时应用聚合酶链反...
- 朱海燕李洁杨滢吴星胡娅莉
- 关键词：脊髓性肌萎缩运动神经元存活基因产前诊断
