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安徽省人才开发基金(20052040)
作品数:
2
被引量:11
H指数:2
相关作者:
沈佐君
吴赟
高人焘
孙余婕
李宜
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1篇
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甲氨蝶呤对映体诱导肺癌细胞耐药后引起血管内皮细胞分化差异的研究
被引量:2
2009年
目的研究甲氨蝶呤(MTX)对映体大剂量冲击作用肺癌A549细胞后,MTX对映体耐药细胞血管分化是否具有手性选择性。方法用大剂量冲击法诱导获得A549对映体耐药肺癌细胞,流式细胞双色分析细胞CD44/CD31以及P-170表达;皮下接种裸鼠,成瘤后取瘤体切片,进行CD34组化染色,计数新生微血管密度(MVD)。以A549亲本细胞(未获得耐药)作为对照组。结果分别建立耐药浓度为15μmol/L的L—MTX和D—MTX的A549耐药细胞株;它们与各自对映体的耐药指数分别为12.4±1.2和20.14-2.3;A549亲本细胞、L—MTX耐药细胞和D.MTX耐药细胞中:CD31’阳性率分别为55.5%±9.7%、32.9%±8.O%和91.9%±3.2%,差异有统计学意义(F=511.92,P=0.000);P-170阳性率分别为85.5%±4.6%、71.5%±8.2%和87.0%±8.9%,L—MTX耐药细胞P-170的阳性率低于D.MTX耐药细胞(t=6.13,P=0.002);3种细胞植入裸鼠成瘤后切片免疫标记CD34统计新生MVD,A549亲本细胞为3.6±1.2,L-MTX耐药细胞为7.24-1.7,D-MTX耐药细胞为55.9±11.9,D.MTX耐药细胞显著高于L—MTX耐药细胞(t=13.37,P=0.000)。结论MTX对映体诱导肺癌A549耐药细胞向血管内皮细胞分化能力不同,D—MTX耐药细胞经血管转移高于L.MTX耐药细胞,这提示MTX制剂中D型组分不能简单当成污染物而忽视,应尽量选用单-对映体的L-MTX药物制剂,减少D—MTX带来的副作用。
何晓东
胡世莲
沈佐君
陶绍能
董林
朱园园
李明
关键词:
抗药性
甲氨蝶呤
细胞分化
对映体
实时荧光PCR监测HBV感染患者拉米夫定治疗病毒YMDD变异
被引量:9
2007年
目的 建立一种快速准确的实时荧光PCR方法检测HBV感染患者经拉米夫定治疗后YMDD变异情况。方法 首先用PCR法筛选HBVDNA阳性血清157例,HBVDNA含量为2.0×10^3-8.0×10^8拷贝/ml,HBVDNA阴性血清30例,然后采用TaqMan探针技术和选择性引物的实时荧光PCR对其进行YMDD变异检测。通过变异株和对照管的循环阈值(cyclethreshold,Ct值)差来计算血清中总HBV中的YMDD变异株含量,并用PCR产物直接测序方法随机对69例HBVDNA阳性标本RT区进行基因序列分析,验证所建立方法的准确性。结果 187例接受拉米夫定治疗患者血清标本中,发生YMDD变异88例,其中YIDD变异39例,YVDD变异38例,YIDD与YVDD混合变异11例。突变株的含量为10%~100%。30例HBVDNA阴性血清的C管循环40次,69例测序结果显示68例两种方法检测结果完全相同,符合率为98.55%。结论 采用选择性引物和TaqMan探针技术建立实时荧光PCR方法能快速准确地检测YMDD变异情况,并能检测患者变异株在HBV总量中的比例,为临床使用拉米夫定治疗乙型肝炎病毒感染监测耐药性提供一种有效方法。
孙余婕
沈佐君
吴赟
高人焘
李宜
杨志军
关键词:
乙型
拉米夫定
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