江西省教育厅科学技术研究项目([2005]187)
- 作品数：4 被引量：21H指数：4
- 相关作者：刘德伍毛远桂陈剑平蓝蔚杨慧更多>>
- 相关机构：南昌大学第一附属医院南昌大学更多>>
- 发文基金：江西省科技厅重大科技招标项目江西省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表皮干细胞联合脱细胞真皮构建人工皮肤促进创面愈合的实验研究被引量：5
- 2009年
- 目的探讨表皮干细胞联合脱细胞真皮构建人工皮肤促进创面愈合的可行性。方法(1)用胰蛋白酶和EDTA联合消化法分离表皮,用Ⅳ型胶原快速黏附法分离、纯化人表皮干细胞,以含表皮生长因子、角质细胞无血清培养液等组成人表皮干细胞培养基进行体外培养,测定克隆形成率。(2)将培养人表皮干细胞接种于制备的脱细胞真皮支架中,构建组织工程人工皮肤,移植治疗兔全层皮肤缺损创面,观察创面修复效果。(3)取新西兰白兔常规制作背部全层皮肤缺损创面,随机分为4组:A、B、C组分别用含表皮干细胞的组织工程皮肤、含角质细胞的组织工程皮肤和单纯脱细胞真皮移植于皮肤缺损创面;D组用创面空置为对照。观察创面修复情况、局部炎症反应,并记录创面愈合时间。结果体外培养的人表皮干细胞增殖稳定,克隆形成率明显高于角质细胞对照组(P<0.05)。移植后A组创面愈合良好,局部炎症反应轻微,无出血、积脓、坏死,创面愈合时间较B、C、D组明显缩短(P<0.05或P<0.01)。结论以表皮干细胞作为种子细胞联合脱细胞真皮构建人工皮肤可用于皮肤缺损创面的修复治疗。
- 彭燕刘德伍杨慧钟清玲
- 关键词：表皮干细胞脱细胞真皮克隆形成率人工皮肤创面愈合
- 不同发育阶段人表皮干细胞端粒酶反转录酶表达的比较被引量：4
- 2007年
- 目的:目前已知端粒酶活性的丧失及其增殖相关基因表达的改变是造成多种成体干细胞体外复制和扩增受限的主要原因,而端粒酶反转录酶对端粒酶活性起关键作用。体外分离培养人胚胎、少儿、成人3种不同皮肤来源的表皮干细胞,对比观察不同发育阶段端粒酶反转录酶表达的差异。方法:实验于2005-09/2007-04在南昌大学第一附属医院烧伤研究所完成。①对象:因创伤等原因致意外流产的妊娠24～26周龄胎儿皮肤标本,4～12周岁少儿及25～45岁成年人烧伤整形植皮手术剩余皮片标本,分别由南昌大学第一附属医院产科、烧伤科提供,产妇与烧伤患者对治疗及实验均知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法:取胎儿、少儿和成年人的全层皮肤,用胰蛋白酶和EDTA联合消化法分离表皮,胶原快速贴附法纯化人表皮干细胞,用未黏附的角质细胞作为对照,以含表皮生长因子、角质细胞无血清培养液组成的表皮干细胞培养基进行体外培养。③实验评估:通过β_1整合素、角蛋白19、p63免疫细胞化学染色对培养细胞进行鉴定,计算克隆形成率。以免疫细胞化学染色法和图像定量分析法检测3种不同皮肤来源的表皮干细胞端粒酶反转录酶的表达差异。结果:①细胞生长特征:分离培养的人表皮干细胞呈明显克隆性生长,克隆形成率高于角质细胞对照组(P<0.05)。②表皮干细胞的鉴定:细胞克隆经免疫细胞化学染色后,β_1整合素、角蛋白19、p63均呈阳性表达。③端粒酶反转录酶免疫细胞化学染色及定量表达:不同皮肤来源的表皮干细胞端粒酶反转录酶均呈阳性,但表达强度不同,人胚胎>少儿>成人。3种皮肤来源的表皮干细胞平均吸光度值和阳性面积值均随年龄增加而逐渐降低,人胚胎>少儿>成人(P<0.05)。结论:人胚胎、少儿、成人皮肤来源的表皮干细胞均有端粒酶反转录酶表�
- 刘德伍黄培信毛远桂陈剑平蓝蔚王联群
- 关键词：表皮干细胞端粒酶反转录酶发育阶段
- 组织工程皮肤的结构和特性被引量：7
- 2008年
- 人体组织和器官的结构是其功能的基础。人体皮肤丢失的同时也丧失了其相应的功能。当皮肤缺失面积相当大时,用自体皮来封闭皮肤缺损创面就存在皮源不足的问题。而组织工程研究的进展,使应用人工皮肤来修复皮肤缺损成为可能。为了使研制出的组织工程皮肤的功能与正常皮肤接近甚至相同,在结构上,也应使它们尽可能地接近与相似。本文就表皮替代物、真皮替代物、复合人工皮肤的构建及其特性和应用作一综述。相信随着多学科的发展和基础与临床研究的深入,制备的组织工程皮肤替代物在结构与特性上将更接近正常皮肤。
- 陈剑平刘德伍毛远桂
- 关键词：组织工程皮肤
- 表皮干细胞生物学特性研究现状被引量：6
- 2008年
- 表皮干细胞是来源于胚胎外胚层皮肤组织的专能干细胞,主要分布于表皮基底层和毛囊隆突部,形态学上具有未分化细胞的特征,在生物学方面是皮肤及其附属器发生、修复、改建的源泉。现阶段对表皮干细胞的鉴定需采用整合素、角蛋白、增殖细胞核抗原、基因物质及连接蛋白等多个标记物,其增殖分化受整合素、信号转导通路及细胞因子等因素影响。目前表皮干细胞研究在皮肤创面修复、组织工程皮肤的构建、基因治疗等方面均已取得显著进展,但仍存在如何确立一种绝对公认的特异标记物、从胚胎干细胞向表皮干细胞分化培养过程中怎样维持其干细胞特性以及快速大量扩增、应用于临床是否会恶性变而产生医疗安全等急需解决的问题。
- 蓝蔚刘德伍毛远桂
- 关键词：表皮干细胞标记物增殖分化
