国家杰出青年科学基金(30825033)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 旋毛虫成虫丝氨酸蛋白酶对S774A.1巨噬细胞的毒性作用被引量：2
- 2011年
- 为探究旋毛虫成虫排泄分泌抗原(ES)中丝氨酸蛋白酶对宿主免疫调节作用,用PCR扩增出旋毛虫成虫期特异性丝氨酸蛋白酶基因Zh68,克隆至表达载体pET28a,转化到大肠埃希菌BL21(DE3),经诱导表达后的重组蛋白免疫接种动物获取抗血清。将抗体封闭前后的ES分别作用于S774A.1巨噬细胞,CCK-8检测巨噬细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果发现ES可以抑制S774A.1细胞增殖,并促使其出现凋亡趋势。但用Zh68多抗封闭ES后,这种作用减弱。证实了旋毛虫成虫ES中的丝氨酸蛋白酶可以抑制巨噬细胞增殖,促巨噬细胞出现凋亡趋势,从而为旋毛虫的侵袭与生存提供了有利的环境。
- 于建立白雪刘国兴吴秀萍王学林刘明远
- 关键词：旋毛虫成虫排泄分泌抗原丝氨酸蛋白酶巨噬细胞毒性作用
- 旋毛虫肠道1期幼虫抗原性基因的筛选与分析被引量：3
- 2009年
- 筛选旋毛虫肠道1期幼虫抗原性基因。利用λZAP载体构建旋毛虫肠道1期幼虫cDNA文库。用感染旋毛虫26 d猪血清对其进行免疫学筛选,对筛选出的阳性克隆进行测序与分析;应用RT-PCR方法对编码p46 000蛋白强阳性克隆基因在不同发育时期虫体转录情况进行检测。成功构建了旋毛虫肠道1期幼虫cDNA文库,其库容量为1.5×106pfu,重组率为95%,插入片段在400 bp^2 000 bp之间,扩增后文库滴度为1.5×1012pfu/mL。筛选出阳性克隆33个,序列分析表明,有20个克隆为同一已知基因,称为旋毛虫p46 000蛋白,编码旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂,且在筛选过程中反应信号均较强;还发现了一些旋毛虫新基因,如编码Ubc蛋白,GM13181蛋白,Rieske硫铁蛋白1等。本研究获得了一个高丰度、反应原性较强抗原基因,其编码蛋白为半胱氨酸蛋白酶抑制剂。
- 吴秀萍刘相叶王学林张小玲王子见唐斌陈根元杨勇刘明远
- 关键词：旋毛虫抗原基因
