国家自然科学基金(30070336)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 相关作者：郝淑玲于忠和齐保申周晓梅李建东更多>>
- 相关机构：北京军区总医院中国医学科学院北京协和医学院北京大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肾上腺髓质素对低氧时肺成纤维细胞内钙离子动态变化的影响被引量：2
- 2012年
- 目的动态观察低氧(2%O2)对培养的人胚肺成纤维细胞内游离钙离子浓度的影响及肾上腺髓质素预处理对其作用。方法 1、采用体外细胞培养方法,培养并鉴定人胚肺成纤维细胞;2、建立人胚肺成纤维细胞低氧(2%O2)模型;3、采用激光扫描共聚焦显微镜技术动态观测低氧时成纤维细胞内游离钙离子浓度的变化及肾上腺髓质素对其影响。结果低氧促进成纤维细胞内游离钙离子浓度升高。与常氧组比较,低氧后成纤维细胞内游离钙离子浓度增加,标准荧光值峰值上升了70%(P<0.01)。肾上腺髓质素预处理成纤维细胞后,低氧引起的成纤维细胞内游离钙离子浓度升高受到抑制,标准荧光值峰值上升了40%(P<0.01),持续时间缩短了20s。结论肾上腺髓质素可以抑制低氧引起的人胚肺成纤维细胞内游离钙离子浓度增加,提示这可能是其发挥调节成纤维细胞功能的作用机制之一。
- 郝淑玲于忠和齐保申周晓梅
- 关键词：低氧肾上腺髓质素成纤维细胞钙离子
- 肾上腺髓质素和转化生长因子β_1对肺成纤维细胞增殖及c-myc表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)促肺成纤维细胞增殖及c-myc基因表达的影响。方法体外原代培养人胚肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblasts,HFLFs),分为对照组、AM组、TGF-β1组和AM+TGF-β1组,采用MTT法观察各组光吸度(optical density,OD)值;各组提取细胞总RNA,采用反转录PCR观察c-myc基因mRNA表达情况。结果 AM+TGF-β1组HFLFs细胞培养24、48、72h时OD值(0.615±0.054、0.483±0.017、0.675±0.014)明显低于TGF-β1组(0.830±0.012、0.753±0.089、0.929±0.039)(P<0.05),TGF-β1组HFLFs细胞培养72h时OD值(0.929±0.039)明显高于对照组(0.605±0.274)(P<0.05),AM组HFLFs细胞培养24、48h时OD值(0.559±0.019、0.412±0.096)明显低于对照组(0.785±0.081、0.646±0.038)(P<0.05);AM组c-myc mRNA相对表达量(0.450±0.025)明显低于对照组(P<0.01);TGF-β1组c-myc mRNA相对表达量(1.160±0.100)高于对照组(P<0.05);AM+TGF-β1组c-myc mRNA相对表达量(0.340±0.030)低于TGF-β1组(P<0.01)。结论 AM能抑制肺成纤维细胞增殖和c-myc基因表达,AM可能具有抗纤维化作用。
- 郝淑玲王卫平李建东于忠和
- 关键词：肾上腺髓质素纤维化C-MYC
- 低氧时肾上腺髓质素对人胚肺成纤维细胞胶原合成和转化生长因子β_1表达的影响
- 2004年
- 观察低氧(2%O2)条件下肾上腺髓质素(ADM)对人胚肺成纤维细胞胶原合成和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。体外培养人胚肺成纤维细胞,分常氧和低氧24、48、72 h组,用[3H]-脯氨酸掺入法反映细胞总胶原合成和分泌,ELISA法检测细胞土清液中TGF-β1活化蛋白质含量。低氧24、48、72 h,细胞总胶原合成和分泌分别是常氧组的125.88%和124.74%、183.44% 和165.73%、152.55%和172.93%(P<0.01)。低氧24、72 h,ADM(10-7 mol/L)组细胞胶原合成分泌减少了19.24%和20.76%(P<0.01)、9.57%(P<0.05)和10.98%(P<0.01);低氧48 h,ADM(10-9、10-8、10-7mol/L)组胶原合成分泌分别降低了5.57%(P<0.05)和9.19%(P>0.05)、11.09%(P<0.01)和14.49%(P<0.05)、35.41%(P<0.01)和18.57%(P<0.05)。低氧48 h,细胞培养液中TGF-β1上升了24.17%(P<0.05),加入ADM(10-7mol/L),TGF-β1比对照组下降了17.53%(P<0.05);低氧72 h, ADM(10-7mol/L)组TGF-β1下降了19.49%(P<0.05)。低氧时ADM通过阻碍戍纤维细胞胶原合成而影响低氧性肺血管改建及损伤组织修复过程,ADM与TGF-β1可能通过相互拮抗,共同调节成纤维细胞胶原的生成。
- 郝淑玲于忠和齐保申罗继征周晓梅
- 关键词：肾上腺髓质素人胚肺成纤维细胞胶原合成低氧性肺动脉高压低氧环境
- 肾上腺髓质素通过Smad2/3信号途径抑制TGF-β1刺激的肺成纤维细胞前胶原蛋白的合成被引量：4
- 2014年
- 目的观察肾上腺髓质素(AM)对转化生长因子β1(TGF-β1)促进肺成纤维细胞1型前胶原蛋白α1(Col1α1)、3型前胶原蛋白α1(Col3α1)基因表达及Smad2/3通路的影响,探讨AM对TGF-β1促肺成纤维细胞胶原合成作用的机制。方法体外原代培养人胚肺成纤维细胞(HFLF),利用反转录PCR(RT-PCR)观察AM及TGF-β1对HFLF的Col1α1、Col3α1 mRNA表达的影响;Western blot法观察AM及TGF-β1对HFLF磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白表达的影响。结果 TGF-β1可以刺激HFLF的Col1α1、Col3α1 mRNA和p-Smad2/3蛋白表达,AM则可抑制基础条件下TGF-β1促进的Col3α1 mRNA表达,同时也抑制Smad2/3蛋白的表达。结论 AM可能通过Smad2/3信号转导途径,抑制TGF-β1促进的HFLF前胶原蛋白的合成作用。
- 郝淑玲王卫平于忠和李建东
- 关键词：肾上腺髓质素转化生长因子Β1SMAD2/3
- 肾上腺髓质素与组织纤维化的研究进展被引量：1
- 2014年
- 肾上腺髓质素(AM)是一种含52个氨基酸的环状结构肽,最初在人肾上腺嗜铬细胞瘤中发现,其具有舒张血管、调节细胞生长和凋亡等作用。AM及其受体在肺、心、肾脏等多种组织中表达,其作为配体通过激活细胞表面的受体而发挥作用。AM与纤维化有较为密切的关系,其在肺、心、肾等脏器纤维化过程中表达升高,并且可以抑制与纤维化密切相关的细胞生长,减轻或缓解组织纤维化,在肺、心、肾肝脏的纤维化中发挥保护作用。
- 郝淑玲钟郁鸿李建东
- 关键词：肾上腺髓质素肺脏肾脏肝脏纤维化
- 肾上腺髓质素与低氧性肺血管结构重建的关系被引量：3
- 2006年
- 目的:观察低氧时肾上腺髓质素(adrenom edu llin,ADM)对人胚肺成纤维细胞增殖和胶原合成的影响,以阐明ADM在低氧性肺血管结构改建过程中可能发挥的作用,为研究防治低氧性肺动脉高压的途径提供新的思路和实验依据。方法:采用体外细胞培养方法,建立人胚肺成纤维细胞低氧(2%O2)模型;在培养细胞中加入不同浓度的ADM,按24、48及72 h进行培养;采用细胞计数、四氮唑盐(MTT)法、3H-脯氨酸掺入法,分别观察不同浓度ADM及不同时间的低氧对成纤维细胞增殖及胶原合成与分泌的影响,并与常氧组进行对照。结果:原代培养人胚肺成纤维细胞免疫组化染色α-actin阴性,证明本实验所培养的细胞是成纤维细胞。低氧24、48及72 h组均明显促进成纤维细胞增殖和胶原合成与分泌,与对照组比较,差别有非常显著性意义(P<0.01)。低氧各组加入ADM后,成纤维细胞增殖受到抑制(P<0.05),以ADM10-7mol/L组抑制作用最明显。低氧24、48及72 h均明显促进成纤维细胞胶原合成与分泌(P<0.01)。低氧各组加入ADM后,成纤维细胞胶原合成与分泌受到抑制(P<0.05,P<0.01),以ADM10-7mol/L组抑制作用最明显。结论:低氧可诱导肺成纤维细胞增殖、胶原合成和分泌增加,ADM可以抑制低氧引起的肺成纤维细胞增殖和胶原合成,提示ADM具有抑制低氧性促肺血管重塑效应。
- 郝淑玲于忠和齐保申周晓梅
- 关键词：缺氧肾上腺髓质素成纤维细胞增殖胶原合成
- 肾上腺髓质素对TGF-β1促肺成纤维细胞增殖和胶原合成的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:观察肾上腺髓质素(ADM)对转化生长因子β1(TGF-β1)促肺成纤维细胞增殖和胶原合成的影响,探讨ADM在肺血管结构改建和组织损伤修复中可能发挥的作用。方法:采用体外细胞培养方法,培养人胚肺成纤维细胞,免疫组化法鉴定。采用细胞计数、四氮唑盐(MTT)法测定成纤维细胞增殖,3H-脯氨酸掺入法测定成纤维细胞胶原合成与分泌。结果:原代培养人胚肺成纤维细胞,免疫组化染色α-actin阴性,证明本实验所培养的细胞是成纤维细胞。TGF-β1明显促进成纤维细胞增殖和胶原合成。加入TGF-β1,成纤维细胞数和A值分别增加了46.8%和32.03%,胶原合成和分泌增加了54.14%和43.40%(P<0.01)。给予ADM,TGF-β1的促增殖和胶原合成作用受到抑制,加入10-9、10-8、10-7mol/LADM,成纤维细胞数和A值分别下降了18.36%和17.7%、31.19%和21.31%、52.83%和40.14%(P<0.01);胶原合成分别被抑制了16.12%(P<0.05)、4.52%(P>0.05)、38.17%(P<0.01)、16.36%(P<0.05)、42.30%、26.48%(P<0.01)。结论:ADM可以抑制TGF-β1引起的肺成纤维细胞增殖和胶原合成,提示ADM具有抑制TGF-β1的促血管重塑和纤维化效应。
- 郝淑玲于忠和齐保申周晓梅
- 关键词：肾上腺髓质素成纤维细胞转化生长因子Β1胶原合成
