辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(20061010)
- 作品数：15 被引量：42H指数：3
- 相关作者：郭磊刘魁赵玉岩高晓宇张世亮更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院沈阳市益民医院中国科学院金属研究所更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨性关节炎软骨细胞中胰岛素样生长因子Ⅱ表达的研究被引量：15
- 2009年
- 目的研究骨性关节炎(OA)软骨组织中细胞因子-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的基因表达的变化规律。方法选取OA患者(6例)和创伤性截肢的患者(5例)的膝关节软骨组织,HE染色光镜观察OA软骨组织病理学特征。采用原位杂交方法定位软骨组织中IGF-ⅡmRNA的表达。提取关节软骨组织的总RNA和蛋白质,RT-PCR和Western印迹杂交方法测定软骨组织中IGF-ⅡmRNA和蛋白质的表达。结果OA软骨组织表面粗糙不平,软骨细胞排列紊乱,数目减少,有细胞成簇现象,可见软骨细胞变性、坏死,软骨厚度变薄,基质染色不均匀,有异染性。正常软骨细胞的细胞核与细胞浆中有IGF-ⅡmRNA的表达。与正常成人相比,OA患者软骨组织内IGF-Ⅱ在基因的转录与翻译水平明显降低了75%和63%(P<0.05)。结论细胞因子IGF-Ⅱ在OA软骨细胞中呈低表达状态。IGF-Ⅱ基因的差异表达可能是骨关节软骨退变的发生机制之一。
- 赵玉岩郭磊田蕾高晓宇刘魁
- 关键词：骨性关节炎软骨细胞基因表达
- 二噁英对成骨肉瘤细胞的凋亡及胰岛素样生长因子结合蛋白6表达的影响
- 2008年
- 目的探讨二噁英（TCDD）对调控成骨肉瘤细胞（SaOS-2）凋亡和胰岛素样生长因子结合蛋白6（insulin—like growth factor binding protein 6，IGFBP-6）基因表达的影响。方法应用1×10^9、1×10^-8、1×10^-7mol／L浓度的TCDD作用于SaOS-2细胞株，采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测TCDD对SaOS-2细胞增殖能力的影响，流式细胞仪检测SaOS-2细胞株细胞凋亡率，采用对硝基酚磷酸盐法测定SaOS-2细胞内碱性磷酸酶（ALP）的活力，采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）半定量分析SaOS-2中IGFBP-6 mRNA的表达，采用Western印迹杂交鉴定SaOS-2中IGFBP-6蛋白的表达。结果在1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7mol／LTCDD浓度下SaOS-2的增殖指数分别为18．4±4．5、22．5±3．6、29．4±4．2。SaOS-2 ALP的活力分别为1．12±0．28、1．58±0．14、1．96±0．17U／mg Pro，均高于对照组；且1×10^-7、1×10^-8mol／L组与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；1×10^-7mol／LTCDD浓度组的细胞凋亡率明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。3个不同浓度组的mRNA表达和1×10^-7mol／LTCDD组蛋白的表达均明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论低浓度的TCDD对SaOS-2的凋亡代谢具有拮抗作用。TCDD对SaOS-2内IGFBP-6基因表达的抑制效应，可能是TCDD参与骨肿瘤发生及生长的作用机制之一。
- 郭磊赵玉岩张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：致癌物成骨细胞生长调节素类
- 白介素-6在关节软骨退变中的表达及意义被引量：2
- 2008年
- 目的研究骨性关节炎（osteoarthritis,OA）软骨组织中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的基因表达及其在OA发病机制中的意义。方法选取OA患者6例和创伤性截肢患者5例的膝关节关节软骨组织,HE染色、光镜观察OA软骨组织的病理学特征;提取关节软骨组织的总RNA和蛋白质,RT-PCR和Western印迹杂交方法测定软骨组织中IL-6 mRNA和蛋白质的表达。结果OA软骨组织表面粗糙不平,软骨细胞排列紊乱,数目减少,有细胞成簇现象,可见软骨细胞变性、坏死,软骨厚度变薄,基质染色不均匀,有异染性。本研究中OA患者及健康青年人软骨组织中均有IL-6基因转录和翻译水平的表达;与健康青年组比较,OA患者软骨组织内IL-6 mRNA和蛋白质的表达分别升高88%和160%,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论IL-6在OA软骨中呈高水平的基因及蛋白表达状态,IL-6基因的差异表达可能是骨关节软骨退变的机制之一。
- 郭磊赵玉岩朱世博张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：骨性关节炎白细胞介素6基因表达
- 维甲酸调控IGF-2基因对软骨细胞促凋亡的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨维甲酸对软骨细胞凋亡的影响及细胞内IGF-2的表达规律。方法1月龄雄性中国白兔1只,体重约500g。取兔双膝关节股骨髁软骨,采用胰酶消化法体外培养白兔软骨细胞。取第2代软骨细胞,培养液内加入终浓度为1×10-6mol/L的全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)25μL(实验组),作用24h;对照组加入25μLDMEM液作为对照。采用细胞免疫组织化学法观察软骨细胞中Ⅱ型胶原的分泌变化,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率,RT-PCR半定量分析软骨细胞中IGF-2mRNA的表达,Western blot印迹杂交鉴定软骨细胞中IGF-2蛋白质表达。结果实验组ATRA抑制了软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达。流式细胞仪检测实验组软骨细胞凋亡率为21%±2%,较对照组(5%±1%)增加了5倍;RT-PCR检测实验组IGF-2mRNA的表达为0.2±0.1,较对照组(0.8±0.2)降低75%;Western blot印迹杂交分析发现,实验组软骨细胞IGF-2的表达为0.3±0.1,较对照组(0.7±0.2)降低了57%;各指标组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论维甲酸可能通过抑制软骨细胞靶基因IGF-2的表达,负性调节软骨细胞分泌和增殖功能,促进软骨细胞凋亡。
- 郭磊赵玉岩张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：维甲酸软骨细胞凋亡IGF-2基因表达
- 维甲酸对软骨细胞的凋亡及其IGFBP-6表达的影响
- 2008年
- 目的探讨维甲酸对软骨细胞凋亡功能的影响及细胞内胰岛素样生长因子结合蛋白6(insulin-like growthfactor binding protein 6,IGFBP-6)的表达规律。方法胰酶消化法体外培养兔的软骨细胞;全反式维甲酸(ATRA)作用软骨细胞株;细胞免疫化学观察软骨细胞中Ⅱ型胶原的合成和分泌变化;流式细胞仪检测软骨细胞株细胞凋亡率;采用RT-PCR半定量分析软骨细胞中IGFBP-6 mRNA的表达;应用Western印迹杂交鉴定软骨细胞中IGFBP-6蛋白质的表达。结果1×10-6mol/L剂量的ATRA作用软骨细胞24 h,ATRA抑制了软骨细胞中Ⅱ型胶原的分泌;1×10-6mol/L剂量的ATRA使软骨细胞凋亡率增加250%,出现明显亚二倍体峰(凋亡细胞峰),差异有统计学意义(P<0.05);ATRA使软骨细胞中IGFBP-6 mRNA和蛋白质的表达分别增加了128%和195%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论维甲酸负性调节软骨细胞分泌功能,促进软骨细胞凋亡;维甲酸可能通过调控靶基因IGFBP-6的基因转录和翻译,发挥对软骨细胞的促凋亡作用。
- 郭磊赵玉岩朱世博张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：维甲酸软骨细胞基因表达
- AZ31B镁合金植入小鼠的生物相容性考察被引量：11
- 2008年
- 目的:评价羟基磷灰石(hydroxyapatite,HAP)涂层的AZ31B镁合金(HAP/AZ31B)作为植入材料的生物安全性。方法:采用恒电压阴极电沉积法制备表面HAP涂层的HAP/AZ31B材料;判定生物材料的致突变及毒性作用;检测材料表面的腐蚀状况并进行能谱分析。结果:HAP/AZ31B材料无致突变作用,对动物组织未产生严重的炎症反应;经HAP涂层后的AZ31B材料腐蚀较慢,微核出现率为4.4‰,溶血率为0.25%。结论:HAP/AZ31B表现出较好的生物安全性和相容性,有可能成为新型可降解骨支架材料。
- 刘魁郭磊黄晶晶杨柯
- 关键词：镁合金羟基磷灰石涂层生物安全性
- 二噁英对成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2基因表达的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨环境类致癌因子对调控成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2)基因表达的作用机制。方法应用环境类致癌因子二噁英(TCDD)作用于人成骨肉瘤细胞(SaOS-2)细胞株;采用流式细胞仪检测TCDD对SaOS-2细胞凋亡的影响规律;采用实时定量PCR定量分析SaOS-2细胞中IGF-2 mRNA的表达;采用Western印迹杂交鉴定SAOS-2细胞中IGF-2和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的p38 MAPK蛋白质的表达及磷酸化水平的变化。结果1×10-9mol/L、1×10-8mol/L、1×10-7mol/L剂量的TCDD对SaOS-2细胞具有抗凋亡作用,在基因转录和翻译水平上增强SaOS-2细胞中IGF-2的表达;TCDD明显地降低了SaOS-2细胞内p38 MAPK磷酸化水平。结论低生理浓度的TCDD可促进靶基因IGF-2的表达,并通过p38 MAPK信号转导通路,发挥拮抗成骨细胞凋亡的毒性作用。
- 赵玉岩郭磊田蕾张世亮刘魁
- 关键词：二噁英肿瘤细胞胰岛素样生长因子2信号通路
- AZ31B镁合金基体羟基磷灰石涂层材料的生物相容性研究
- 2008年
- 我们采用表面羟基磷灰石（hydroxyapatite，HAP）涂层制备HAP／AZ31B镁合金复合生物材料，检测镁合金生物材料的细胞毒性和生物适应性，为可降解镁金属植入材料在新型医用生物材料领域中的应用提供依据。
- 郭磊刘魁张世亮高晓宇
- 关键词：羟基磷灰石生物相容性复合生物材料医用生物材料细胞毒性
- 肥胖大鼠血糖及胰岛素水平与下丘脑中增食欲素受体1的表达被引量：2
- 2018年
- 目的研究增食欲素受体1(OX1R)反义硫代磷酸化-脱氧寡核苷酸(OX1R-PS-ASDDNs)对肥胖大鼠下丘脑OX1R蛋白表达及血糖、胰岛素代谢的影响。方法 40只大鼠建立高脂饮食诱导的肥胖大鼠模型(肥胖组),37只造模成功,另选择进食普通饲料大鼠10只为正常组。取32只肥胖模型大鼠随机分为反义组、错义组、盐水组、对照组,每组8只,除对照组外,分别于侧脑室插管注射OX1R反义、错义硫代磷酸化-脱氧寡核苷酸及生理盐水。微型血糖仪检测各组大鼠血糖,化学发光免疫法测定血清胰岛素,免疫组化方法分析下丘脑OX1R蛋白的表达。结果肥胖组大鼠体重、Lee's指数、胰岛素、血糖及体脂含量均增加,与正常组比较均有统计学差异(P <0. 01)。下丘脑OX1R蛋白表达肥胖组较正常组增加,差异有统计学意义(P <0. 05)。大鼠侧脑室注射OX1R-PS-ASODNs后,肥胖大鼠反义组较对照组、错义组及盐水组OX1R蛋白表达减少,血糖及胰岛素水平下降,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 OX1R与营养性肥胖相关,参与能量平衡与代谢调节,OX1R-PS-ASODNs可减少营养性肥胖大鼠下丘脑OX1R蛋白的表达,改善血糖及胰岛素水平。
- 马冬杰马冬杰
- 关键词：增食欲素肥胖大鼠模型高脂饮食反义脱氧寡核苷酸
- 二噁英对胰岛素样生长因子Ⅱ表达的调控
- 2008年
- 目的探讨二噁英（TCDD）对成骨细胞胰岛素样生长因子Ⅱ（insulin—like growth factorⅡ，IGF-Ⅱ）基因表达的影响。方法应用1×10^-9、1×10^-8．1×10^ -7mol／L的TCDD作用于原代培养的大鼠颅盖骨成骨细胞，采用实时定量聚合酶链反应（PCR）和Western印迹杂交分析成骨细胞中IGF—Ⅱ mRNA及蛋白质的表达。结果TCDD增加了成骨细胞中IGF-Ⅱ的基因表达，1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7mol／LTCDD组IGF-Ⅱ mRNA表达水平分别为10．85±0．18、11．82±0．16、11．92±0．18，与对照组（5．06±0．02）比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；1×10^-7mol／L剂量的TCDD使IGF-Ⅱ的mRNA和蛋白质的表达分别上调130％和280％。结论TCDD在基因转录和翻译水平上正性调控成骨细胞内IGF—Ⅱ基因的表达。
- 赵玉岩郭磊都健马冬杰田蕾
- 关键词：环境污染物基因表达
