国家自然科学基金(81101518)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张丽刘健林晨詹启敏赵志龙更多>>
- 相关机构：大连大学附属中山医院中国医学科学院北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- MTA1转基因小鼠的构建及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的将人的MTA1外源基因整合到C57BL/6J小鼠中,构建稳定高表达MTA1的小鼠模型。方法通过RT-PCR方法克隆人的MTA1编码序列,将MTA1插入真核表达载体pcDNA3.1构建pcDNA3.1-MTA1载体,回收片段后利用显微注射技术将目的基因片段注入到受精卵的雄原核中,使用MTA1特异性的引物经PCR鉴定出基因型阳性的转基因小鼠,再利用Western-blot及免疫组化方法检测MTA1在转基因小鼠全身级织表达情况。结果成功构建了MTA1转基因注射片段。在320枚显微注射受精卵中挑选出300枚存活卵移植到10只ICR小鼠假孕受体的输卵管中,10只ICR小鼠均怀孕,移植成功率为100%,共生出子代鼠80只,经PCR检测其中共有9只整合了MTA1基因,整合率为11.25%。经PCR鉴定MTA1整合阳性的F1代小鼠,再经Western-blot和免疫组化分析检测MTA1表达水平在脑、肺、肝、肠等组织中表达明显增高,肾、骨骼肌表达无差异。结论成功构建了脑、肝、肺、结肠高表达MTA1的转基因小鼠,为进一步MTA1研究奠定了良好的研究模型。
- 薛洪省王海娟刘健张丽林晨詹启敏赵志龙钱海利
- 关键词：MTA1转基因
