国家自然科学基金(81101526)
- 作品数:9 被引量:48H指数:3
- 相关作者:邓敏郑国沛贺智敏谷依学刘季芳更多>>
- 相关机构:广州医学院附属肿瘤医院南华大学广州医学院更多>>
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- miR一216b通过靶向调控蛋白激酶Cα基因的表达抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭被引量:3
- 2013年
- 目的明确miR-216b是否通过靶向调控蛋白激酶Cα(PKCα)基因的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭。方法构建PKCα3’非编码区(UTR)-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统检测miR-216b对PKCα3’UTR-荧光素酶活性的影响。将miR-216b模拟物转染鼻咽癌细胞CNE2,采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测PKCα mRNA和蛋白的表达水平。将PKCα siRNA转染CNE2细胞,通过MTS细胞增殖实验和Transwell侵袭实验观察PKCα基因表达下调对CNE2细胞增殖和侵袭的影响。将PKCα重组质粒与miR-216b模拟物共转染CNE2细胞,通过MTS细胞增殖实验检测CNE2细胞的增殖能力。结果双荧光素酶报告检测结果显示,miR-216b能特异性地与PKCα mRNA的3’UTR结合,下调荧光素酶活性,其活性约为转染对照模拟物细胞的62.4%。过表达miR-216b的CNE2细胞中PKCα mRNA和蛋白的表达水平均降低,与对照细胞比较,分别降低49.1%和55.7%。siRNA干扰PKCα表达能抑制CNE2细胞的增殖和侵袭能力,能部分模拟miR-216b的抑瘤功能。过表达PKCα能部分逆转miR-216b对CNE2细胞的增殖抑制作用。结论miR-216b通过靶向调控PKCα基因的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭。
- 邓敏刘季芳谷依学郑国沛贺智敏
- 关键词:鼻咽肿瘤蛋白激酶CΑ细胞侵袭
- miR-218对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响被引量:2
- 2013年
- 背景与目的:miR-218在鼻咽癌组织中表达显著下调。本研究探讨过表达miR-218对人鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:使用脂质体将成熟miR-218序列模拟物(miR-218 mimics)转染人鼻咽癌细胞株5-8F,以无关序列(Scramble mimics)作为阴性对照。采用qRT-PCR技术验证miR-218 mimics转染细胞中miR-218的表达水平;通过MTS法及Transwell侵袭实验观察miR-218过表达对5-8F细胞增殖和侵袭力的影响。结果:在5-8F细胞中,转染miR-218 mimics细胞中miR-218的表达量是Scramble mimics细胞的17倍。过表达miR-218的细胞与对照细胞相比,增殖速度明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,转染miR-218 mimics后,与Scramble mimics细胞相比,5-8F细胞的侵袭力明显减慢(P<0.05)。结论:miR-218能抑制鼻咽癌细胞增殖及侵袭,在鼻咽癌的发生和进展中发挥重要作用。
- 邓敏刘季芳谷依学郑国沛
- 关键词:鼻咽癌MIR-218细胞增殖细胞侵袭
- 下调miR-21表达抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖和侵袭被引量:3
- 2013年
- 背景与目的:miR-21在人类多种肿瘤中异常高表达。本研究探讨干扰miR-21表达对鼻咽癌CNE2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:使用脂质体将miR-21 inhibitor转染CNE2细胞,以无关序列(NC inhibitor)作为阴性对照。采用qRT-PCR技术验证miR-21 inhibitor转染的CNE2细胞中miR-21的表达水平;通过MTS法、细胞划痕、Transwell侵袭实验观察下调miR-21表达对CNE2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:转染miR-21 inhibitor的CNE2细胞中miR-21的表达明显下调,并且呈浓度依赖性。表明转染miR-21 inhibitor能有效抑制CNE2细胞中miR-21的表达。转染miR-21 inhibitor的CNE2细胞与对照细胞相比,增殖速度明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验显示,下调miR-21表达抑制CNE2细胞迁移(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,下调miR-21表达抑制CNE2细胞侵袭(P<0.05)。结论:miR-21能促进鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭,其可能在鼻咽癌的发生、发展中发挥重要作用。
- 周克兵谷刚曹昕
- 关键词:鼻咽癌MIR-21细胞增殖细胞侵袭
- 过表达miR-218对胃癌MCG-803细胞增殖的影响
- 2012年
- 目的探讨miR-218对胃癌细胞MCG-803增殖的影响。方法使用脂质体将miR-218mimics转染MGC-803细胞,以无关序列(scramblemimics)作为阴性对照。采用qRT-PCR验证miR-218 nlinlics转染细胞中miR一218的表达水平;通过MTS法观察miR-218过表达对胃癌细胞MGC-803增殖和侵袭能力的影响。结果转染111iR-218mimics的MGC-803细胞中miR-218的表达量约为对照细胞的25倍:过表达miR-218的MGC-803细胞与对照细胞相比,增殖速度明显下降,差异具有显著性(P〈0.(J1)。结论miR一218能抑制胃癌细胞增殖能力,它可能在胃癌的发生和进展中发挥重要作用。
- 邓敏王成昆刘季芳
- 关键词:胃癌MIR-218细胞增殖细胞侵袭
- miR-125b通过靶向抑制Smad4调控骨髓间充质干细胞成骨分化被引量:11
- 2013年
- 目的:研究miR-125b是否通过调控其预测的靶基因Smad4表达而调节骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化。方法:构建Smad4 3'-UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告检测观察miR-125b对Smad4 3'-UTR-荧光素酶活性的影响;分离培养人骨髓MSCs,在MSCs中转染miR-125b mimics并进行成骨诱导,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹检测Smad4表达水平;Smad4 siRNA转染MSCs并进行成骨诱导,通过检测碱性磷酸酶(AKP)活性及RUNX2 mRNA表达水平变化考察Smad4下调对MSCs成骨分化的影响。结果:双荧光素报告检测显示miR-125b能特异性地与Smad4 mRNA的3'-UTR结合,抑制其荧光素酶活性(P<0.05)。过表达miR-125b能抑制MSCs成骨分化过程中Smad4表达水平。干扰Smad4表达能抑制AKP活性及RUNX2 mRNA表达水平,它能部分模拟miR-125b调控MSCs成骨分化的功能。结论:miR-125b通过抑制靶基因Smad4的表达调控MSCs成骨分化。
- 陆细红邓敏贺洪辉曾德辉张卫
- 关键词:间充质干细胞成骨分化SMAD4
- 鼻咽癌组织中miR-21的表达变化及意义被引量:1
- 2012年
- 目的观察鼻咽癌组织中miR-21的表达变化,并探讨其临床意义。方法收集54例鼻咽癌患者活检组织标本(观察组),35例正常及慢性鼻咽炎黏膜组织标本(对照组),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组miR-21的表达,分析miR-21表达水平与鼻咽癌临床病理参数及与患者预后关系。结果观察组中miR-21平均表达量为(16.76±1.73)×10-3,对照组为(2.39±0.62)×10-3,两组比较,P<0.01。临床Ⅲ/Ⅳ期鼻咽癌miR-21表达水平明显高于临床Ⅰ/Ⅱ期鼻咽癌组织(P<0.05);有淋巴结转移的鼻咽癌组织明显高于无转移的鼻咽癌(P<0.01);Kaplan-Meier生存分析发现,miR-21表达越高患者生存率越低(P<0.05)。结论鼻咽癌组织中miR-21的表达明显升高,与鼻咽癌的发生、临床进展及预后密切相关,可能是鼻咽癌新的诊断预后分子标志物及潜在的治疗靶点。
- 邓敏谷依学郑国沛刘季芳贺智敏
- 关键词:微小RNA-21鼻咽肿瘤鼻咽癌
- 微小RNA-218在鼻咽癌中的表达及其临床意义被引量:7
- 2013年
- 目的:检测微小RNA-218(microRNA-218,miR-218)在鼻咽癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法:收集鼻咽癌活检组织标本54例,同时以35例正常及慢性炎性反应鼻咽黏膜活检组织作为对照,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)法检测鼻咽癌组织及对照组织中miR-218的表达情况,分析miR-218表达水平与鼻咽癌临床病理参数之间的关系,以及与患者预后的关系。结果:与对照鼻咽黏膜组织相比,miR-218在鼻咽癌组织中的表达水平普遍下调。鼻咽癌组织中miR-218平均表达量明显低于对照鼻咽上皮组织,差异有统计学意义(P=0.000)。miR-218表达水平在低分化鼻咽癌组织明显低于高/中分化鼻咽癌(P=0.032),临床Ⅲ/Ⅳ期鼻咽癌组织明显低于临床Ⅰ/Ⅱ期鼻咽癌(P=0.007),有转移的鼻咽癌组织明显低于无淋巴结转移的鼻咽癌(P=0.019)。Kaplan-Meier生存分析发现,miR-218表达水平越高,患者生存时间越长(P<0.05)。结论:miR-218与鼻咽癌的发生、临床进展及预后密切相关,它可能成为鼻咽癌新的潜在的治疗靶点及诊断预后分子标志物。
- 邓敏贺智敏刘季芳谷依学郑国沛
- 关键词:鼻咽肿瘤MIR-218
- miR-23a与转移抑制因子1在结肠癌中的表达及其临床意义被引量:21
- 2012年
- 目的探讨miR-23a(HomosapiensmiR-23a)与转移抑制因子1(metastasissuppressor1,MTSSl)在结肠癌中的表达情况及其临床意义。方法运用荧光素报告载体系统检测miR-23a直接调控的靶基因并采用Transwell侵袭实验检测miR-23a对人结肠癌SW620细胞的侵袭能力。收集结肠癌患者手术标本92例,癌旁组织作为正常对照,分别运用原位杂交、免疫组织化学EliVision法检测结肠癌组织及癌旁组织中miR-23a、MTSS1的表达水平,并对二者进行相关性分析。结果MTSSl是miR-23a直接调控的靶基因,miR-23a下调MTSS1蛋白的表达,增强结肠癌细胞侵袭能力。在92例结肠癌组织中miR-23a阳性表达率为87.0%(80/92),MTSS1蛋白阳性表达率为17.4%(16/92),分别与癌旁对照组比,差异有统计学意义(P〈0.01);miR-23a的表达随着结肠癌临床分期演进(P=0.029)和浸润深度增加而增加(P=0.000),且有淋巴结转移的miR-23a的表达显著高于无淋巴结转移组(P=0.041);MTSS1的表达随着结肠癌临床分期演进(P=0.027)和浸润深度增加而下调(P=0.017),且有淋巴结转移的MTSS1的表达显著低于无淋巴结转移组(P=0.009);相关性分析表明,miR-23a表达与MTSSl的表达呈显著负相关(r=-0.594,P=0.013)。结论miR-23a通过靶向抑制MTSS1促进结肠癌SW620细胞生长、侵袭转移;miR-23a的高表达和MTSS1蛋白低表达可能是肠黏膜恶性转变以及结肠癌发生浸润转移的重要生物学标志,检测二者对预测结肠癌浸润转移有重要意义。
- 唐海林邓敏廖前进曾希周秀田苏琦
- 关键词:结肠肿瘤微RNAS肿瘤抑制蛋白质类
- 乳铁蛋白对胃癌MGC-803细胞迁移和侵袭的影响
- 2012年
- 目的探讨乳铁蛋白对胃癌细胞MCG-803迁移和侵袭能力的影响。方法用10ug/L的重组人乳铁蛋白处理MGC-803细胞.通过细胞划痕和transwell侵袭实验观察乳铁蛋白对胃癌细胞MGC-803迁移和侵袭能力的影响。结果乳铁蛋白处理细胞划痕愈合率明显低于对照组细胞(P〈0.01);transwell侵袭实验结果显示,乳铁蛋白处理细胞侵袭能力较对照细胞明显下降(P〈0.01)。结论乳铁蛋白能抑制胃癌细胞MCG-803迁移和侵袭能力。
- 邓敏王成昆谷依学贺智敏
- 关键词:乳铁蛋白迁移胃癌