国家自然科学基金(30370921) 作品数:5 被引量:14 H指数:3 相关作者: 李振岐 王美南 王阳 井金学 张如佳 更多>> 相关机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
小麦条锈菌白化菌系的遗传转化 应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(hpt)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行研究,建立了基因枪法转化小麦条锈菌的瞬时表达参数。用含有潮霉素抗性基因的质粒... 卢丽丽 张如佳 王阳 王美南 井金学 康振生关键词:小麦条锈菌 基因枪 文献传递 基因枪法导入GUS基因获得小麦条锈菌突变体 被引量:4 2009年 采用基因枪转化法用带有β-葡糖醛酸酶(GUS)报告基因的质粒pGUS6L20转化小麦条锈菌,建立了优化的转化体系;在转化当代的条锈菌中得到了GUS基因瞬时表达的菌株;连续继代转接培养后,在转化后第1代(T1)和第2代(T2)条锈菌中检测到了GUS基因稳定表达的菌株;利用GUS报告基因和毒性标记相结合的方法,经过3代筛选鉴定,在小麦条锈菌中国鉴别寄主尤皮Ⅱ号和抗引655上,各获得1个稳定的毒性突变体,经PCR及PCR-southern b lot证实外源片段已整合到毒性突变菌株的基因组中。该研究表明基因枪转化法是获得条锈菌毒性突变体的有效方法。 卢丽丽 张如佳 王美南 王阳 井金学 李振岐关键词:小麦条锈菌 基因枪 GUS 一种快速分离小麦条锈菌转GUS基因转化体的方法 被引量:1 2009年 为了获得更多整合有外源GUS报告基因并且稳定表达的小麦条锈菌毒性突变菌株。探索小麦条锈菌夏孢子转GUS基因遗传转化体的分离方法。以从菌种筛选品种上分离转化体法为主、从繁殖品种辉县红上分离转化体法为辅可有效提高转化体的检出率;建立了利用透明胶带粘取夏孢子并通过染色分离小麦条锈菌转GUS基因转化体的新方法。试验证明,透明胶带粘取夏孢子染色法是一种快速有效分离小麦条锈菌转GUS基因转化体的方法。 卢丽丽 张亮 严引娣 王美南 王阳 井金学关键词:小麦条锈菌 小麦条锈菌突变菌株相对寄生适合度测定 被引量:2 2005年 测定了CY17,CY31突变菌系在感病品种铭贤169上的相对寄生适合度属性,并利用“病害量”衡量突变菌株的相对寄生适合度。结果表明:CY17各突变菌株的相对寄生适合度均高于原始菌株,其中CY17mut-4最高,CY17mut-1较高,CY17mut-3,CY17mut-2相差不大,居中;而CY17mut-5最低,各突变菌株之间的差异主要表现在夏孢子萌发率、夏孢子堆长度、严重度3个属性上。CY31突变菌株的相对寄生适合度均低于原始菌株。其中CY31mut-1,CY31mutS-1,CY31mut-2,CY31mutS-2的相对寄生适合度高,CY31mutH-1,CY31mutH-2,CY31mut-6次之,CY31mut-3,CY31mut-5,CY31mut-4最低,其突变菌株间的相对寄生适合度属性在夏孢子萌发率、夏孢子堆长度和夏孢子堆密度上有较显著差异。 吴会杰 王国芬 徐智斌 井金学 李振岐关键词:小麦条锈菌 突变菌株 相对寄生适合度 基因枪法转化基因在小麦条锈菌中的瞬时表达 被引量:6 2006年 以小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)野生毒性菌株为转化受体,以含有gus报告基因的质粒(pGUS6L20)和潮霉素抗性基因的质粒(pKLHyg14)为载体,应用基因枪法研究了小麦条锈菌夏孢子遗传转化的瞬时表达特征。结果表明,在金粉直径为0.6μm、射程6cm、载体DNA5μL、可裂膜压力为900Psi或1100Psi时,gus基因和潮霉素抗性基因的瞬时表达率相对较高。 王阳 王美南 张如佳 徐长刚 冯强 李振岐关键词:小麦条锈菌 基因枪转化 基因枪介导小麦条锈菌毒性突变的研究 被引量:5 2007年 为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株,应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(Hyg)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究。结果表明,当小麦条锈菌夏孢子萌动2 h,可裂膜承载压力为1 100 Psi时进行轰击转化,所得的小麦条锈菌夏孢子在含有潮霉素的培养基上萌发率最高,为36.09%。进一步将转化的小麦条锈菌夏孢子进行扩繁,在筛选品种上筛选,将筛选到的突变体在其上继代培养4代,获得了两个稳定的毒性突变菌株MM-2、MM-3。MM-2菌株对南大2419的毒性减弱,反应型由野生菌系的4型变为2型;MM-3菌株在南大2419的反应型由野生菌系的4型变为2、3型,毒性发生分化。采用中国鉴别寄主对突变体的毒性研究表明,各突变菌株的毒性均较原始菌系发生了明显改变。进一步用Hyg基因特异PCR在两个突变菌系中均扩增到目的片段,表明MM-2、MM-3的突变是由Hyg基因插入引起的。 张如佳 王阳 王美南 井金学 李振岐关键词:小麦条锈菌 基因枪 插入突变 小麦条锈菌突变菌株相对寄生适合度测定 测定了CY17,CY31突变菌系在感病品种铭贤169上的相对寄生适合度属性,并利用“病害量”衡量突变菌株的相对寄生适合度。结果表明:CY17各突变菌株的相对寄生适合度均高于原始菌株,其中CY17mut最高,CY17mut... 吴会杰 王国芬 徐智斌 井金学 李振岐关键词:小麦条锈菌 突变菌株 相对寄生适合度 文献传递