国家自然科学基金(31171796)
- 作品数：8 被引量：52H指数：5
- 相关作者：黄丽丽高小宁韩青梅何媛媛王海英更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苹果树腐烂病菌一个引起植物细胞坏死的效应基因VmE02的鉴定
- 由死体营养型（Necrotrophic）真菌Valsa mali导致的苹果树腐烂病能够引起苹果树皮严重坏死甚至整株死亡,给苹果产业造成巨大经济损失。引起植物细胞坏死对于死体营养型真菌侵染定殖寄主有重要作用,鉴定该病原菌坏...
- 聂嘉俊尹志远李正鹏康振生黄丽丽
- 关键词：基因水平转移同源基因
- 文献传递
- 根癌农杆菌介导的苹果树腐烂病菌的遗传转化和突变体库建立
- 中国是世界重要的苹果出产国，苹果及苹果产业的发展为我国苹果产区农村经济发展和农民增收作出了巨大贡献.但由于苹果树腐烂病(Valsa canker of apple)近些年的普遍发生，加之人们对苹果树腐烂病菌(Valsa ...
- 胡杨杨哲王典茹周洁任德成黄丽丽
- 关键词：根癌农杆菌苹果树腐烂病菌
- Candidate effector proteins of the necrotrophic apple canker pathogen Valsa mali can suppress BAX-induced PCD
- Canker caused by the Ascomycete Valsa mali is the most destructive disease of apple in Eastern Asia, resulting...
- Zhengpeng LiZhiyuan YinYanyun FanMing XuZhensheng KangLili Huang
- 关键词：APPLECANKERSECRETEDVIRULENCE
- 苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因Vmpl4的致病功能研究
- 苹果树腐烂病是由黑腐皮壳属真菌Valsa mali引起的严重枝干皮层腐烂病害,Vmpl4是苹果树腐烂病菌侵染过程中上调表达倍数最高的果胶裂解酶（Pectate lyase,PL）基因。本研究通过对Vmpl4敲除突变体的致...
- 许春景孙迎超吴玉星冯浩高小宁黄丽丽
- 关键词：苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因敲除致病力
- 文献传递
- 利用Nested-PCR技术检测苹果树一年生枝条中的苹果树腐烂病菌
- 由黑腐皮壳属真菌Valsa mali Miyabe et Yamada[无性阶段：Cytospora sacculus (Schwein.) Gvrit.]引起的苹果树腐烂病(apple tree valsa canke...
- 尹志远戴青青臧睿李正鹏黄丽丽
- 关键词：苹果树腐烂病分子检测潜伏侵染
- 腐烂病菌Valsa mali侵染过程中苹果抗性相关基因的鉴定
- 由死体营养真菌Valsa mali引起的苹果树腐烂病（Apple valsa canker）作为苹果的主要病害,严重威胁着我国苹果产业的可持续发展。目前,由于病菌主要为害韧皮部并且对苹果的抗性机制知之甚少,导致病害很难得...
- 尹志远柯希望康振生黄丽丽
- 关键词：果树病害细胞色素P450几丁质
- 文献传递
- 苹果树腐烂病菌GTP-环化水解酶II基因敲除载体构建及其突变体的表型分析被引量：16
- 2014年
- 【目的】利用反向遗传学方法构建苹果树腐烂病菌(Valsa mali)中表达GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1的敲除载体,通过同源重组的方法进行基因敲除分析目标基因的功能,为全面解析苹果树腐烂病菌致病的分子机制奠定基础,并为有效控制苹果树腐烂病的方法技术和药剂研制提供理论依据。【方法】通过对笔者实验室苹果树腐烂病菌转录组数据的分析比对得到GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1(暂命名),该基因在接种5 d后,在病组织中表现出一定的上调表达,推测该基因可能与苹果树腐烂病菌致病相关。采用Double-joint PCR方法,将目标基因Vmgtp1的上游片段UP、下游片段DOWN及筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hph)进行片段融合。对得到的PCR产物及质粒pHIG2RHPH2-GFP-GUS进行双酶切,通过T4连接酶,将片段UP-HPH-DOWN连接到质粒pHIG2RHPH2-GFP-GUS上,转化到JM109菌株中,挑取阳性克隆,提取质粒,得到含有hph的Vmgtp1敲除载体,再利用PEG介导的遗传转化获得抗潮霉素的突变体,然后用4对引物对突变体进行PCR检测及Southern Blot验证得到敲除突变体,最后对敲除突变体及野生型菌株03-8进行菌落颜色、菌落大小、繁殖体产生情况等表型分析和接种在离体苹果烫伤枝条上观察病斑大小的致病性检测,对检测数据用SPSS软件进行差异显著性分析。【结果】通过上述方法成功构建了表达GTP-环化水解酶II基因的Vmgtp1敲除载体,并利用PEG介导的遗传转化方法在苹果树腐烂病菌中进行了转化,共获得101个能够在含潮霉素PDA培养基上生长的突变菌株,经过PCR及Southern Blot对101个突变菌株进行分析验证,得到1个敲除突变体,编号为ΔVmgtp1-90。在PDA培养基上,敲除突变体ΔVmgtp1-90与野生型菌株03-8相比,ΔVmgtp1-90菌落平均生长速率为11.33 mm·d-1,03-8平均生长速率为24.67 mm·d-1,突变体菌落生长速率明显变慢,颜色变浅,气生菌丝稀疏;ΔVmgtp1-90�
- 宋娜戴青青黄丽丽韩青梅韩青梅
- 关键词：同源重组PEG
- 苹果树腐烂病菌胞外蛋白提取方法被引量：3
- 2014年
- 选择一种理想的蛋白提取方法,获得数量多、质量高的苹果树腐烂病菌Valsa mali胞外蛋白用于蛋白质组学分析,为全面解析该病原菌的致病机制奠定基础。采用冷冻干燥透析结合法、脱氧胆酸钠(DOC)-10%TCA沉淀法、硫酸铵沉淀法3种方法分别提取苹果树腐烂病菌的胞外蛋白,并筛选最适的硫酸铵浓度,利用Bradford法测定蛋白总量、SDS-PAGE检测蛋白条带分辨率及不同致病力菌株蛋白差异。结果表明,70%硫酸铵沉淀提取的胞外蛋白量最高、SDS-PAGE电泳可辨认蛋白条带最多。强弱致病菌株胞外蛋白的SDS-PAGE电泳图谱在37-50 kD有4条蛋白条带差异明显,由此表明,70%硫酸铵盐析法更适合用于苹果树腐烂病菌胞外蛋白质差异分析时蛋白质的提取。
- 王海英何媛媛黄丽丽韩青梅
- 关键词：苹果树腐烂病菌硫酸铵沉淀蛋白定量聚丙烯酰胺凝胶电泳差异蛋白
- 陕西省苹果树腐烂病菌基因多态性的ISSR分析被引量：9
- 2012年
- 为了从分子水平上揭示苹果树腐烂病菌的群体遗传多样性,采用正交设计对ISSR-PCR体系进行了4因素3水平的筛选,并从47条ISSR引物中筛选出11条多态性较好的引物。对供试的87个分离株进行扩增的结果显示,11条引物在129个位点扩增出稳定的条带,其中多态性位点119个,多态性位点率为92.25%。POPGENE分析显示,病菌种群的遗传多样性和基因多态性丰富,群体间的遗传分化系数(Gst)为0.109,群体内为0.891,群体内多样性大于群体间多样性。两个地理种群间的居群每代迁移数(Nm)为2.046,两者之间存在广泛的基因交流。在遗传相似系数为0.88时,可将21个自然种群划分为9个不同的类群,表明陕西省苹果树腐烂病菌的各个自然种群之间的遗传亲缘关系与其地理来源之间无明显的相关性。
- 臧睿黄丽丽李正力高小宁康振生
- 关键词：苹果树腐烂病正交设计
- 苹果褐斑病原菌侵染苹果属山定子的转录组学研究
- 苹果褐斑病（Marssonina leaf blotch of apple）是由Diplocarpon mali引起的东亚地区苹果生产中主要早期落叶病害之一,该病害引起生长季节叶片黄化和早落,进而造成严重的经济损失。前期...
- 李海录宋艳艳冯浩黄丽丽韩青梅
- 关键词：山定子苹果褐斑病转录组高通量测序
- 文献传递
