国家自然科学基金(30872039) 作品数:17 被引量:112 H指数:7 相关作者: 秦岭 冯永庆 冯仲科 沈元月 曹庆芹 更多>> 相关机构: 北京农学院 北京林业大学 绵阳师范学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 北京市科技新星计划 更多>> 相关领域: 农业科学 经济管理 自动化与计算机技术 生物学 更多>>
板栗酰基转移酶基因的克隆及其在短雄花序发育中的表达 被引量:3 2012年 板栗短雄花序有利于减少树体营养消耗。雄花短化的机理研究对新种质的培育与利用有重要意义。试验从发育中的板栗芽变短雄花序cDNA中获得一个酰基转移酶cDNA全长。该结构基因包括一个1 335bp的开放阅读框,编码一个含445个氨基酸的完整阅读框架,预测蛋白的相对分子质量约为49kD,无跨膜结构。通过实时荧光定量PCR分析发现该酶在正常花序和芽变花序发育过程中表达量存在差异,短雄花序顶端死亡脱落时该基因表达量显著高于正常雄花序。初步推断在短雄花序生长发育过程中,该酶参与了花序顶端细胞的程序性死亡过程,其较高的表达是造成雄花序顶端死亡的原因之一。 邓舒 段续伟 秦岭关键词:板栗 短雄花序 酰基转移酶 板栗CmAPs基因的克隆及在芽变短雄花序中的表达分析 被引量:3 2010年 利用RT-PCR与RACE扩增方法,分别从板栗正常雄花序和芽变短雄花序cDNA中分离出编码板栗天冬氨酸蛋白酶cDNA全长的序列,序列分析表明:克隆的cDNA片段总长分别为1 822 bp和1 909 bp,基因内部含有完整的开放阅读框架,大小均为1 539 bp,可编码长度为513个氨基酸残基的蛋白质,所推导的蛋白质氨基酸序列与蓖麻、可可和葡萄的天冬氨酸蛋白酶的蛋白质氨基酸序列相似性分别为83%,80%和75%。正常与芽变短雄花序中天冬氨酸蛋白酶的氨基酸序列存在6个氨基酸的差异,其中有3个位于活性区。后证实分离出的2个天冬氨酸蛋白酶基因在正常雄花序和芽变短雄花序中共同存在,命名为CmAPs1和CmAPs2(GenBank登录号分别为GQ984143和GQ984144)。实时荧光定量PCR结果显示:在雄花序原基形成期、花簇原基形成期和花朵原基形成期,芽变花序中的CmAPs的总表达量均高于正常花序中的总表达量,而在发育的花被原基形成期即程序性死亡发生期,CmAPs在芽变花序中表达量远远低于正常花序中表达量。初步推测CmAPs与短雄花序发育过程中的程序性死亡有关。 段续伟 邓舒 沈元月 冯永庆 秦岭关键词:板栗 雄花序 细胞程序性死亡 天冬氨酸蛋白酶 板栗脂质转运蛋白基因的克隆及表达 被引量:5 2010年 利用RACE技术从板栗短雄花序突变体中扩增得到660bp的板栗脂质转运蛋白(lipid transfer protein,LTP)cDNA片段。该cDNA编码118个氨基酸,具有8个位置保守的半胱氨酸(C)残基及26个氨基酸的信号肽,它与棉花、草莓脂质转运蛋白氨基酸序列相似性为63%,基因序列已提交数据库(GenBank),其登录号分别为FJ490676(基因)和ACL01093(蛋白)。荧光定量分析表明板栗短雄花序突变体较正常雄花序的脂质转运蛋白表达量更高。将板栗脂质转运蛋白基因插入到硫氧还蛋白融合表达载体pET32a(+)中,构建了板栗的原核表达载体pET-LTP,在大肠杆菌菌株Rosetta-gamiTM2(DE3)中,IPTG诱导5h大量表达约为30ku的融合蛋白,通过Ni2+-chelating sepharose fast flow柱纯化的融合蛋白具有抑制板栗镰刀菌属病原真菌孢子萌发的功能。 唐征 杨凯 冯永庆 曹庆芹 沈元月 秦岭关键词:板栗 实时定量RT-PCR 抑菌功能 板栗赤霉素缺陷型短雄花序芽变的初步鉴定及CmGID1基因的表达分析 被引量:12 2011年 利用赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯利和吲哚乙酸分别涂抹板栗短雄花序,结果显示仅赤霉素能够抑制短雄花序顶端的细胞程序性死亡,并在一定程度上恢复短雄花序的伸长生长。通过RT-PCR扩增方法,从板栗短雄花序芽变和正常雄花序cDNA中克隆出赤霉素受体基因GID1部分序列。测序及序列分析结果表明:克隆的cDNA片段为786 bp,所推导的氨基酸序列与杨毛果GID1氨基酸序列有91%的同源性,与陆地棉、蓖麻GID1均有85%的氨基酸序列同源性。经氨基酸序列功能分析,推测该GID1序列是板栗有编码功能的赤霉素受体基因,命名为CmGID1(GenBank登录号为HQ651231)。实时荧光定量PCR结果显示,从花序萌发至花药萌发前期,除其中一个时期(5月23日)外,芽变短雄花序CmGID1的表达量均高于正常雄花序;在花序的快速生长期,芽变短雄花序CmGID1表达量显著高于正常雄花序(P<0.01);且赤霉素处理后恢复生长的短雄花序CmGID1表达量显著降低(P<0.01)。综合试验结果,初步揭示了该短雄花序为一个赤霉素缺陷型突变体。 李兴亮 郭献平 沈元月 曹庆芹 冯永庆 秦岭关键词:板栗 短雄花序 实时定量PCR 赤霉素对板栗短雄花序表型恢复的效应 被引量:2 2011年 为研究赤霉素与板栗芽变雄花序短化的关系,以板栗短雄花序为材料,用IAA,CTK,GA3,GA4+7,IAA∶CTK=1∶1,GA3∶CTK=1∶1,GA3∶IAA=1∶1,处理短雄花序。结果表明单独使用GA3处理的恢复长度最好,平均长度为7.17 cm,恢复超过2 cm占60%。之后用HPLC法测定内源GA3的含量,结果表明GA3处理和GA4+7处理后的雄花序内源GA3的含量均显著高于对照。LC-MS法测定内源GA4含量表明,GA3处理和GA4+7处理后的雄花序内源GA4的含量均极显著高于对照。赤霉素可使短雄花序恢复伸长。 张维鼎 冯永庆 郭献平 曹庆芹 秦岭关键词:板栗 赤霉素 短雄花序 表型 板栗短雄花序发育期内源激素变化研究 1995年在北京密云板栗(Castanea mollissima Blume)产区发现的一株雄花序短小的板栗植株,其最显著的特征是雄花序短小,长度仅为2.2 cm,为对照的1/7左右,是研究板栗花发育的珍贵材料。本研究主... 韩宝 冯永庆 秦岭关键词:板栗 芽变 花序 雄花序 文献传递 板栗CmMYB转录因子基因的克隆及在花序发育中的表达分析 被引量:7 2010年 板栗大量雄花序影响产量形成,寡雄性状是板栗重要的育种目标。利用RT-PCR与RACE扩增方法,从板栗极短雄花序芽变和正常雄花序cDNA中分离出一个板栗MYB转录因子cDNA全长,进行测序和序列分析。结果表明,克隆的cDNA片段总长为1 522 bp,基因内部含有完整的开放阅读框架,大小为1 071 bp,可编码长度为357个氨基酸残基的蛋白质,所推导的蛋白质氨基酸序列与苹果的MYB91、豌豆的MYB转录因子和蒺藜苜蓿的MYB转录因子基因分别具有88%、87%和87%的氨基酸序列同源性。序列分析及空间结构预测发现该序列具有完整的R2R3区域,推测其具有转录激活功能。命名为CmMYB(GenBank登录号为GU076490)。实时荧光定量PCR结果显示,芽变雄花序CmMYB转录因子在雄花序原基形成期、花簇原基形成期、花朵原基形成期、雄蕊原基形成期和花药形成期的表达量均低于正常雄花序中的表达量,而在花被原基形成期表达量高于正常雄花序中表达量,说明该转录因子调控的主要基因与雄花序的短化存在一定联系。 段续伟 曹庆芹 沈元月 冯永庆 秦岭关键词:板栗 雄花序 MYB转录因子 荧光定量PCR 板栗新品种‘短花云丰’ 被引量:6 2011年 ‘短花云丰’是实生芽变选育的板栗新品种,属于中国栗华北品种群,坚果均重8.2 g,总糖20.5%,淀粉31.10%,蛋白质5.7%,脂肪0.25%。该品种的雄花序短小,均长2.07 cm,仅为正常花序的1/8,结果母枝平均抽生结果枝3.26个,结果枝平均结总苞1.58个,总苞平均含坚果2.6粒,出实率39.1%,是适于山地及瘠薄地区栽培的优良品种。 秦岭 杨东生 高天放 周自军 王铁明 冯永庆 田瑞冬关键词:板栗 雄花序 耐瘠薄 天津滨海新区湿地景观格局变化研究 被引量:9 2010年 以天津滨海新区湿地景观为主要研究对象,基于ETM/TM遥感及非遥感数据,以1999~2007年为时间尺度,以滨海新区新的行政区划为空间(尺度)范围开展景观格局变化研究。结果表明,湿地景观变化的主要特征是自然湿地和农用地呈减少趋势,盐田、养殖区、建设用地面积有明显增加。整体景观的形状均向着简单化和规则化的方向发展;随着人口与社会经济的发展,人类对景观过程的干预能力也不断提高。 杜林芳 冯仲科 刘东云 唐雪海 吴根松关键词:湿地 转移矩阵 板栗蛋白磷酸酶PP2A催化亚基基因的克隆与同源性分析 被引量:2 2009年 利用RACE技术从板栗雄花序中扩增得到1 347 bp的板栗蛋白磷酸酶2A的催化亚基(protein phospha-tase PP2A catalytic subunit,PP2Ac)cDNA片段。序列分析表明该片段包含基因的5′非翻译区4 bp,3′非翻译区407 bp,开放阅读框为936 bp,编码311个氨基酸,预计分子量为35.6 KD,等电点为5.94。基因序列数据库(GenBanK)登录为FJ840479(基因)和ACO57639(蛋白)。与葡萄、拟南芥、水稻等其他物种PP2Ac氨基酸序列相似性约为92%。 唐征 杨凯 冯永庆 秦岭关键词:板栗 RACE