国家自然科学基金(81001040) 作品数:13 被引量:27 H指数:4 相关作者: 南岩东 金发光 杨拴盈 姜华 房延凤 更多>> 相关机构: 第四军医大学唐都医院 西安交通大学 西安交通大学医学院第二附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人肺腺癌S100A6 mRNA表达与临床特征关系分析 被引量:1 2016年 目的:探讨肺腺癌组织S100A6 mRNA表达与患者临床特征的关系及其意义。方法:用RT-PCR方法检测98例手术后新鲜肺腺癌及癌旁正常肺组织S100A6 mRNA的表达,分析S100A6 mRNA表达与患者临床病理特征及生存预后的关系,ROC曲线法评价S100A6 mRNA表达对肺腺癌的诊断能力。结果:S100A6mRNA在肺腺癌组织中的表达显著高于正常肺组织(P<0.01);S100A6 mRNA表达与患者性别和年龄无相关性(P>0.05),而与吸烟指数、肿瘤分化、淋巴结转移、远处转移、TNM分期显著相关(P<0.05)。其中,肿瘤分化、TNM分期和S100A6 mRNA表达是影响肺腺癌患者预后的独立因素。应用ROC曲线法评价S100A6mRNA表达对肺腺癌的诊断能力,其灵敏度、特异度、阳性预测值等指标均明显优于临床上传统肿瘤标志物。结论:S100A6 mRNA在肺腺癌组织中呈过表达,有望成为肺腺癌诊断、治疗评估及预后判断的重要指标。 南岩东 房延凤 姜华 金发光 杨拴盈关键词:S100A6 MRNA 肺腺癌 预后 非小细胞肺癌中ING4和XIAP的表达及临床意义 2013年 目的研究ING4和XIAP基因在非小细胞肺癌组织及其对应的正常组织中的mRNA的表达情况及其相关联系。方法采用RT-PCR实验技术检测ING4和XIAP基因mRNA在56例非小细胞肺癌组织及其对应的正常组织中的表达情况。结果 RT-PCR结果显示:(1)ING4 mRNA在非小细胞肺癌组织及其对应正常组织中的表达有统计学意义差异(P<0.05)。XIAP mRNA在非小细胞肺癌组织及与其正常组织中的表达量有差异,且有统计学意义(P<0.05);(2)ING4 mRNA的表达和非小细胞肺癌组织的分化情况有关(P<0.05),与年龄、性别、病理分型、病理分期等临床病理分组都无关(P>0.05);XIAP mRNA的表达只和癌组织分化及分期有关(P<0.05),与年龄、性别、病理分型等临床病理因素均无关(P>0.05)。结论 ING4和XIAP mRNA与非小细胞肺癌的发展联系紧密;且ING4和XIAP mRNA在非小细胞肺癌组织及其对应的正常组织之间有统计学差异,和非小细胞肺癌的分期、分化程度有关,预示着可能与非小细胞肺癌的复发与转移有一定关系。 韩丰立 李王平 南岩东关键词:逆转录聚合酶链反应 ING4 下调S100A6基因对裸鼠肺腺癌移植瘤生长和凋亡的影响 被引量:2 2017年 目的探讨下调靶向基因S100A6对在体肺腺癌移植瘤生长和凋亡的影响。方法 18只健康Balb/c雄性裸鼠随机分为空载体对照组、阴性对照组及S100A6基因RNA干扰组三组,每组6只动物;分别应用不携带目的基因的空载质粒、未转染任何质粒以及含有S100A6基因RNA干扰慢病毒质粒的A549肺腺癌细胞接种于裸鼠皮下,构建移植瘤动物模型;观察不同组移植瘤组织生长情况;采用Real-Time PCR、免疫组织化学及Western-blot等技术检测S100A6 mRNA和蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果成功构建了裸鼠肺腺癌皮下移植瘤模型;病理学特征显示,阴性对照组和空载体对照组可见到成巢的肿瘤细胞,癌细胞核大,而干扰组肿瘤细胞较稀疏,间质组织明显;接种细胞2周时,阴性对照组、空载体对照组和RNA干扰组肿瘤组织体积和质量差异具有统计学意义(P<0.05);S100A6基因和蛋白表达在三组之间差异具有统计学意义(P<0.05);各组裸鼠移植瘤凋亡细胞呈现不同程度的棕褐色肿瘤细胞核,三组肿瘤细胞凋亡率的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论下调肿瘤瘤组织S100A6蛋白表达,可抑制肿瘤生长,诱导细胞凋亡,为进一步开发肺腺癌分子靶点提供了新途径。 南岩东 姜华 房延凤 金发光 杨拴盈关键词:S100A6 肺腺癌 S100A6基因过表达对A549肺腺癌细胞恶性表型特征的影响 2016年 目的 探讨S100A6基因过表达对于肺腺癌细胞恶性表型的影响。方法构建重组pLeno—DCE—S100A6载体,慢病毒转染A549肺腺癌细胞,应用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot鉴定S100A6基因和蛋白表达;采用四甲基偶氮唑蓝法、Transwell和流式细胞仪分别检测细胞增殖、侵袭、细胞周期及凋亡等恶性表型特征。结果转染S100A6基因的A549肺腺癌细胞S100A6mRNA和蛋白的表达较空载体对照组和阴性对照组均有明显的上调(P值均〈0.05);细胞增殖和侵袭能力较空载体对照组和阴性对照组增加(P值均〈0.05);细胞周期比例在G0/G1期与空载体对照组和阴性对照组比较差异无统计学意义(P值均〉0.05),在S期显著高于其他两组(P值均〈0.05),在G。/M期显著低于其他两组(P值均〈0.05);平均凋亡率较空载体对照组和阴性对照组下降(P值均〈0.05)。结论肺腺癌细胞S100A6基因过表达可增强肿瘤细胞的增殖和侵袭能力,增加DNA合成,减弱凋亡等,与肿瘤发生、发展、侵袭及转移等生物学行为密切相关,有望作为肺腺癌诊断和治疗的分子标志物。 南岩东 姜华 田应选 金发光 杨拴盈关键词:S100A6 转染 肺腺癌 肺腺癌细胞S100A6基因siRNA慢病毒载体构建及鉴定 被引量:1 2015年 目的:构建肺腺癌细胞S100A6基因siRNA慢病毒载体并鉴定。方法:慢病毒载体(pL enR-GPH)构建靶向S100A6基因的RNA干扰重组体,用以建立S100A6基因稳定沉默的肺腺癌A549细胞株。结果:PCR鉴定结果显示3个扩增的阳性片段均已插入pL enR-GPH载体,测序结果证实三个重组慢病毒载体SH1、SH2、SH3的插入序列完全正确,重组慢病毒载体转染到293T细胞中包装成病毒颗粒,将其感染肺癌A549细胞后,RT-PCR和Western blot检测结果均证实三组重组体感染的细胞内S100A6 mRNA和蛋白的表达受到不同程度的抑制,沉默效率分别为98.29%、84.05%及78.24%。结论:成功构建了S100A6基因RNAi慢病毒重组载体,并建立了其稳定表达的肺腺癌A549细胞株,为探讨S100A6基因对肺腺癌生物学行为的影响提供了可靠的细胞模型。 李小龙 姜华 金发光 南岩东关键词:RNA干扰 A549细胞 人肺腺癌组织S100A6蛋白表达及其临床意义 2016年 目的 探讨 S100A6 蛋白表达对肺腺癌患者的临床特征及其转移预后的影响。方法 收集手术切除、经病 理 证实 的肺 腺癌 及 配对 癌旁 正常 肺 组织 标 本 各 98 例,通 过 Westernblot 检 测S100A6 蛋白表达。结果 肺腺癌组织 S100A6 蛋白表达量显著高于癌旁正常肺组织 ( t =19.884 , P 〈0.05 ); S100A6 蛋白表达与肺腺癌患者性别、年龄无相关性 ( P 值均 〉0.05 ),与患者吸烟指数、肿瘤细胞分化、淋巴结转移、远处转移、临床分期均有显著相关 ( P 值均 〈0.05 ); Kaplan-Meier 法比较低表达组和高表达组患者的生存期,差异有统计学意义 ( P 〈0.05 ); COX 比例风险多因素回归分析发现,肿瘤分化、 TNM 分期和 S100A6 蛋白表达是影响肺腺癌患者预后的独立因素。结论 S100A6在肺腺癌组织显著高表达,可以作为与肿瘤发生、发展密切相关的一种标志蛋白。 南岩东 姜华 陈艳丽 金发光 杨拴盈关键词:肺腺癌 肿瘤相关蛋白质S100A6结构和功能的分析与预测 被引量:11 2013年 目的:分析S100A6蛋白分子结构和功能,预测其在肿瘤发生发展过程中可能的分子机制。方法:利用计算机软件,生物信息学工具,查询国际通用的生物信息学数据库,对S100A6氨基酸序列、二级结构域功能域、酶切位点、转录后修饰、亚细胞定位、跨膜结构域、分子功能、蛋白质相互作用等进行分析,并对其生物学功能进行分析和预测。结果:S100A6蛋白为酸性、小分子、稳定性蛋白质、亲水性评估-0.289;该蛋白的二级结构显示为非球状蛋白质,存在两个结构域及两个钙结合区域,没有跨膜区域;该蛋白为非信号肽类型的分泌蛋白,有16个酶切位点,亚细胞定位于核膜、胞质和细胞膜;有10个蛋白质与S100A6蛋白质存在直接的相互作用关系,存在3个磷酸化位点、可能存在2个赖氨酸糖化作用位点、可能存在乙酰化作用,没有糖基化位点。该蛋白质的功能区域存在4个自然突变位点。该蛋白存在钙传感器、介导细胞内钙信号释放,并与其它蛋白相互作用,间接的重组肌动蛋白细胞骨架及在细胞能动性上发挥作用,S100A6蛋白可能调控细胞周期及细胞分化,同时可能刺激Ca2+依赖的胰岛素释放,刺激催乳素分泌及胞外分泌。结论:S100A6蛋白是钙周期蛋白,很可能在肿瘤发生发展过程中对诱导细胞分化及信号转导方面发挥十分重要的作用。 南岩东 常蕊静 穆德广 潘蕾 张宵汉 车鑫 金发光 杨拴盈关键词:生物信息学 肿瘤 分子功能 S100A6基因过表达慢病毒载体的构建、转染及鉴定 被引量:1 2016年 目的构建S100A6基因重组慢病毒质粒,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达。方法 PCR扩增S100A6基因序列,将目的基因与酶切线性化载体p Len O-DCE定向连接,转化E.Coli DH5α感受态细胞,对阳性重组子进行DNA测序及比对。将构建成功的目的质粒和辅助包装质粒共转染293T细胞生产病毒液,荧光显微镜观察报告基因在293T细胞中的荧光表达,判断重组慢病毒的感染效率。用得到的病毒液转染人肺腺癌A549细胞,real-time PCR和Western blot检测转染A549细胞后S100A6蛋白和S100A6 mRNA的表达。结果测序提示重组慢病毒质粒构建成功;荧光显微镜观察显示在包装细胞中获得较高的转染效率。real-time PCR检测显示A549细胞中有S100A6 mRNA表达;Western blot显示S100A6蛋白在A549细胞中稳定表达。结论成功构建S100A6基因慢病毒表达载体,并成功感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达,为S100A6基因功能及特性的研究和探索提供了实验基础。 李洁 胡进 马力天 叶欣 南岩东 吴大方关键词:慢病毒载体 A549细胞 S100A6基因过表达促进肺腺癌裸鼠移植瘤生长及其机制研究 被引量:1 2017年 目的:研究体内S100A6基因过表达对肺腺癌移植瘤生长的影响及其可能机制。方法:18只健康Balb/c雄性裸鼠随机分为三组,空载体对照组、阴性对照组及S100A6基因过表达组,每组6只;分别应用含有空载质粒、未转染任何质粒以及过表达S100A6基因的A549肺腺癌细胞接种于裸鼠皮下,构建肺腺癌移植瘤动物模型;观察不同组移植瘤组织体积、质量及微观形态学,检测S100A6基因的表达和细胞凋亡。结果:成功构建了S100A6基因过表达肺腺癌移植瘤动物模型;S100A6过表达组肿瘤组织的体积和质量均明显高于阴性对照组和空载体对照组;S100A6基因过表达组肿瘤细胞体积较大,核异型性明显;核浆比例大,核糖体和粗面内质网较多,肺泡隔小血管内可见癌栓;S100A6基因或蛋白表达在三组之间差异具有统计学意义(P<0.05);S100A6基因过表达组肿瘤凋亡细胞数显著低于阴性对照组和空载体对照组(P<0.05)。结论:肺腺癌细胞S100A6基因过表达可显著促进在体肺腺癌细胞的生长,其可能涉及了细胞凋亡途径,为探索肺癌发病机制提供了实验基础。 姜华 南岩东 房延凤 金发光 杨拴盈关键词:肺腺癌 S100A6 过表达 肿瘤相关基因S100A6在肺腺癌组织中的表达及临床意义 被引量:4 2015年 目的探讨肿瘤相关基因S100A6在肺腺癌组织及肺腺癌细胞系的表达及其临床意义。方法分别应用RT-PCR和Western-blot方法对20例肺腺癌组织及其癌旁正常肺组织S100A6基因和蛋白表达进行检测,比较肺癌组织和正常肺组织之S100A6表达有无差异,对肺癌组织S100A6表达与患者临床病理特征相关性进行分析;进一步检测A549人肺腺癌细胞系S100A6基因和蛋白表达。结果肺腺癌组织S100A6 m RNA表达相对比值为0.77±0.39,癌旁正常肺组织S100A6 m RNA表达相对比值为0.15±0.08,二者比较差异具有显著性(P<0.05);Western-blot分析结果显示,肺腺癌组织S100A6蛋白表达相对比值为0.76±0.19,癌旁正常肺组织S100A6蛋白表达相对比值为0.29±0.15,二者比较差异具有显著性(P<0.05);肺腺癌组织S100A6与患者临床特征关系分析显示,在大于或等于60岁和小于60岁的两个年龄组患者中S100A6 m RNA和蛋白表达均无显著性差异(P>0.05),在男、女两组患者之间无显著性差异(P>0.05);而吸烟指数大于或等于200组患者S100A6 m RNA和蛋白表达均显著高于吸烟指数小于200组患者(P<0.05);ⅢⅣ分期组S100A6 m RNA和蛋白表达显著高于Ⅲ分期组(P<0.05);A549人肺腺癌细胞系S100A6基因和蛋白可稳定高表达。结论 S100A6在肺腺癌中明显高表达,且与肿瘤发生发展密切相关,有望作为肺腺癌的重要生物标志物。 郎红娟 姜华 金发光 杨拴盈 南岩东关键词:S100A6 肺腺癌