辽宁省教育厅基金(2004D226)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：王桂珍赵芝娜何梦博曾晶晶周世冠更多>>
- 相关机构：中国医科大学沈阳药科大学沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 用量子点标记技术检测肺炎支原体抗原被引量：2
- 2012年
- 目的:通过建立鼠肺炎支原体肺炎模型,研究CdSe/ZnS量子点标记技术检测肺炎支原体抗原的最佳时期,并探讨其临床应用的可行性。方法:以CdSe/ZnS量子点标记兔抗肺炎支原体P1重组蛋白IgG作为检测抗体,对不同感染时期的鼠支气管灌洗液标本及105份临床呼吸道感染标本进行测定,观察CdSe/ZnS量子点标记方法检测肺炎支原体感染阳性率与病程的关系,以及该方法与聚合酶链反应(PCR)检测法的符合率。结果:感染3 d～7 d的鼠支气管灌洗液检测Mp阳性率最高。临床标本PCR检测阳性率为35.2%(37/105),量子点标记方法阳性率为31.4%(33/105),两者符合率达86.7%(91/105)。结论:量子点标记方法适用于肺炎支原体感染早期的检测,方法操作简单、检测快速,在实验室诊断中有良好的应用前景。
- 何梦博曾晶晶张晗杨颖赵之娜王桂珍
- 关键词：肺炎支原体聚合酶链式反应
- 量子点标记肺炎支原体重组蛋白抗体检测抗原方法的建立被引量：6
- 2011年
- 目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结果量子点标记抗体直接玻片荧光法检测Mp抗原具有较高的敏感性(检测灵敏度在0.001μg/mL),且与呼吸道常见病原菌无交叉反应。结论成功建立量子点标记技术检测肺炎支原体抗原方法,具有操作简单、检测快速的优良,适用于Mp感染的早期诊断。
- 曾晶晶何梦博赵芝娜周世冠王桂珍
- 关键词：肺炎支原体抗原检测
- 肺炎支原体重组蛋白抗原与膜蛋白抗原诊断试剂在临床应用中的比较被引量：1
- 2009年
- 目的以肺炎支原体(Mp)重组蛋白做包被抗原检测临床呼吸道感染患儿血清标本,验证重组蛋白抗原的诊断价值。方法利用Mp重组蛋白抗原包被酶标板,ELISA法检测临床疑似Mp感染患儿的血清标本,同时用Mp膜抗原被动凝集试验平行检测,并对比分析两种方法的检测结果。结果重组蛋白抗原ELISA检测Mp抗体的阳性率为49.00%(98/200),膜抗原被动凝集试验Mp抗体的阳性率为63.50%(127/200)。两种检测方法的总符合率为70.50%。阳性符合率为58.45%。结论Mp重组蛋白抗原ELISA检测肺炎支原体感染有诊断价值,其特异性优于膜抗原被动凝集试验。
- 赵芝娜李保强宋焕景宋娟王桂珍
- 关键词：肺炎支原体膜蛋白抗原ELISA
- 肺炎支原体双蛋白多抗原表位表达载体的构建被引量：2
- 2011年
- 目的构建肺炎支原体(Mp)双蛋白多特异抗原表位表达载体,提高重组蛋白抗原的敏感性。方法应用生物信息学方法筛选Mp P116粘附蛋白抗原表位序列,PCR点突变技术获取P116蛋白基因片段,与pMD-T载体重组,转入大肠埃希菌JM109,通过限制性酶切图谱和基因序列分析鉴定重组质粒。酶切回收P116基因片段与pGEX 6P-1-P1 DNA重组,转入大肠埃希菌JM109菌株。用Glutathione Sepharose 4B纯化重组蛋白,SDS-PAGE分析表达产物的相对分子量,用Mp免疫血清进行免疫印迹试验,鉴定重组蛋白的免疫原性。结果 PCR点突变扩增Mp黏附蛋白P116的基因片段为597 bp,该基因片段与已知的基因库序列分析比较,除两个突变位点由UAG突变为UGG外,其余核苷酸序列同源性为100%。SDS-PAGE分析多表位重组蛋白相对分子质量(Mr)为77.8 kDa。免疫印迹结果显示,Mp兔多价血清能与纯化的78KDa的重组蛋白发生免疫反应。结论本研究成功构建了Mp双蛋白多表位的表达载体。该表达载体表达的重组蛋白具有Mp特异的免疫反应性。重组蛋白的敏感性有待进一步鉴定。
- 卢可新赵芝娜刘宝山赵晨超王舰王桂珍
- 关键词：肺炎支原体基因克隆
