中国博士后科学基金(2003033427)
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 相关作者：赵自平那晓东王绮如周江南李树浓更多>>
- 相关机构：中山大学中南大学中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胶原表面改性CPC对小鼠卵黄囊间质干细胞体外生长与BMP-2表达的影响被引量：1
- 2005年
- 目的 观察胶原表面改性磷酸钙骨水泥 (CPC)对小鼠卵黄囊间质干细胞体外生长与骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )表达的影响。方法 分离、纯化及传代培养小鼠卵黄囊间质干细胞 ,用0 .5 %Ⅰ型胶原对CPC进行表面改性 ,检测胶原表面改性CPC对卵黄囊间质干细胞增殖分数的影响 ,扫描电镜观察卵黄囊间质干细胞在胶原表面改性CPC表面的黏附生长情况 ,逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)检测与胶原表面改性CPC共培养卵黄囊间质干细胞BMP 2mRNA的表达。结果 胶原表面改性CPC有利于卵黄囊间质干细胞黏附生长 ,共培养 6d ,卵黄囊间质干细胞的增殖分数为 1.12 9,并可检测到BMP 2mRNA的表达。结论 胶原表面改性CPC能支持小鼠卵黄囊间质干细胞体外生长 ,并促进其BMP 2mRNA的表达。
- 赵自平那晓东蔡道章周江南
- 关键词：间质干细胞胶原卵黄囊BMP-2体外生长
- 小鼠骨髓内皮细胞条件培养液体外扩增胚胎及成体造血干/祖细胞的差异及其机制探讨被引量：6
- 2004年
- 本研究比较小鼠骨髓内皮细胞条件培养液 (mBMEC CM)联合FL和TPO对卵黄囊和骨髓造血干 祖细胞体外生长的影响 ,并对其机制进行探讨。取卵黄囊和骨髓单细胞悬液 ,对照组中加入含 10 %FBS的DMEM ,实验组分别加入 10 %mBMEC CM ,FL(5ng ml)和TPO(2ng ml) ,10 %mBMEC CM复合FL和TPO培养 2 4小时后进行集落培养 ,计数CFU GM和HPP CFC的集落数。应用AtlascDNAExpressionArray对卵黄囊和骨髓造血细胞表达的细胞因子受体进行检测。结果表明 :mBMEC CM能扩增卵黄囊和骨髓CFU GM和HPP CFC ,其与FL和TPO联合后扩增能力明显增强 ;mBMEC CM扩增骨髓CFU GM和HPP CFC的能力明显强于其扩增卵黄囊CFU GM和HPP CFC的能力。检测到小鼠卵黄囊及骨髓造血细胞存在差异表达的细胞因子受体 ;卵黄囊造血细胞表达PDGF Rβ ,PDGF Rα和促肾上腺皮质激素释放因子受体 ,而在骨髓造血细胞中未检测到上述受体的表达 ;在骨髓造血细胞中表达的IFN γR ,GM CSFR ,多巴胺D2受体和卵泡刺激素受体则未在卵黄囊造血细胞中检测到mRNA的表达。结论 :mBMEC CM能支持卵黄囊和骨髓造血祖细胞的体外扩增 ,其与FL和TPO联合后扩增能力明显增强 ;mBMEC CM对骨髓造血祖细胞表现出更强的扩增作用。
- 那晓东王绮如赵自平
- 关键词：骨髓卵黄囊造血调控体外扩增
- 小鼠卵黄囊内皮细胞的体外培养及其细胞因子表达的检测被引量：1
- 2003年
- 目的 :分离纯化小鼠卵黄囊内皮细胞 (YS -EC) ,并检测其细胞因子的表达。方法 :显微分离小鼠卵黄囊 ,经酶消化得到卵黄囊细胞 ,卵黄囊细胞经贴壁培养、传代纯化得到小鼠YS -EC ,酵母碎片吞噬实验检测YS-EC的吞噬功能 ,免疫组化方法检测YS -ECvWF的表达 ,应用AtlascDNAExpressionArray对卵黄囊内皮细胞表达的细胞因子进行检测。结果 :经体外培养纯化的小鼠卵黄囊内皮细胞大小形态均一 ,为圆形或卵圆形贴壁细胞 ,具有克隆形成能力 ,在传代培养过程中可形成血管条索样结构 ,具有吞噬功能 ,表达vWF ,符合内皮细胞的生物学特征。小鼠卵黄囊内皮细胞中有转化生长因子 β2 (TGF - β2 )、干扰素γ(IFN -γ)、胎肝激酶配基 (FL)、骨形态发生蛋白- 4 (BMP - 4 )、巨噬细胞炎性蛋白 - 1β(MIP - 1β)、骨形态发生蛋白 - 2A (BMP - 2A)、fms样酪氨酸激酶 2 (FLT2 )、内皮素 2 (endothelin 2 )、胸腺素β10 (thymosinβ10 )、白细胞介素 6 (IL - 6 )、白细胞介素 9(IL - 9)、白细胞介素 13(IL - 13)、小分子可诱导性化学因子A5 (SCYA5 )和酰基辅酶A结合蛋白 (ACBP)等细胞因子mRNA的表达。结论 :体外培养纯化的小鼠卵黄囊内皮细胞符合内皮细胞的生物学特征 ,有TGF - β2、IFN -γ、FL、BMP - 4、MIP - 1β、BMP - 2A?
- 那晓东王绮如赵自平
- 关键词：卵黄囊细胞因子类内皮细胞
- 人卵黄囊间质干细胞多向分化潜能的实验研究被引量：1
- 2005年
- 【目的】分离纯化及体外观察人卵黄囊间质干细胞(hYS-MSC)的多向分化潜能。【方法】卵黄囊单细胞悬液经贴壁培养、传代纯化得到 hYS-MSC,并从细胞表型及生物学特性等方面对其进行鉴定;采用地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素 C 作成骨诱导剂、β-巯基乙醇或复方丹参注射液作为神经诱导剂、地塞米松、消炎痛、胰岛素作为成脂诱导剂诱导 hYS-MSC 向成骨细胞、神经细胞及脂肪细胞定向分化。组织化学方法作成骨检测;免疫组化方法检测 NSE、NF 及 GFAP 在经神经诱导 hYS-MSC 中的表达;油红 O 染色检测中性脂肪。【结果】hYS-MSC 易于纯化,在培养过程中保持正常核型,具有较大增殖能力。hYS-MSC CD29、CD44、CD166及 CD105表达阳性,CD34、CD45和 CD86为阴性;AKP 弱阳性。hYS-MSC 经成骨诱导 AKP 强阳性,诱导两周后形成钙盐沉积形成的矿化区。hYS-MSC 经神经诱导可见 NSE、NF 或 GFAP 阳性细胞,符合神经元及胶质细胞的生物学特征。hYS-MSC 经成脂诱导转化为大小不等的园形或椭圆形细胞,胞浆内可见脂滴形成,胞核被挤于细胞的一侧,经油 O 染色脂滴染橘红色,符合脂肪细胞的生物学特征。【结论】hYS-MSC 与成体 MSC 表型一致,具有较大增殖及多向分化潜能,在体外可以诱导分化为成骨细胞、神经元、胶质细胞及脂肪细胞。
- 那晓东赵自平张秀明朱美玲黄春浓宋新民李树浓
- 关键词：间质干细胞胚胎发育分化
