湖南省科技计划项目(05SK3026)
- 作品数：11 被引量：36H指数：4
- 相关作者：唐爱国罗昔波项忠元莫喜明肖乐东更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院邵阳市第一人民医院郴州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技计划项目湖南省医药卫生科研计划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 脑出血患者犬尿氨酸代谢产物与超敏C反应蛋白的关系被引量：1
- 2010年
- 莫喜明唐爱国项忠元罗昔波
- 关键词：犬尿氨酸超敏C反应蛋白脑出血患者代谢产物犬尿喹啉酸3-双加氧酶
- 高效液相色谱-荧光法同时测定血清中的色氨酸和酪氨酸被引量：5
- 2010年
- 目的建立一种高效液相色谱（HPLC）-荧光法（FD）同时测定血清色氨酸（Trp）和酪氨酸（Tyr）的方法。方法色谱条件：Megres C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,内径为5μm）,流动相为10%乙腈溶液,流速为1.2 mL/min,Tyr和Trp的荧光检测激发波长和发射波长分别为λexTyr=228 nm、λexTrp=285 nm和λemTyr=306 nm、λemTrp=353 nm。血清样本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样进行分析测定。且对样本的保存方法进行了探讨。结果 Tyr的保留时间为3.4 min,线性范围为0.275~275μmol/L,最低检出浓度为0.004μmol/L,回收率为90.5%~108.8%。Trp的保留时间为7.6 min,线性范围为0.490~196μmol/L,最低检测浓度为0.005μmol/L,回收率为88.8%~97.2%。Tyr和Trp的日内、日间测定的相对标准偏差均〈5%,苯丙氨酸、5-羟色胺、犬尿喹啉酸、犬尿氨酸和肌酐等物质对该法均无干扰。样本应-20℃冰冻保存。结论该方法简便、快速、敏感、特异,可同时测定血清Tyr和Trp,适合于临床和科研应用。
- 任亚萍唐爱国周前选项忠元
- 关键词：色氨酸酪氨酸高效液相色谱法荧光检测
- 高效液相色谱法在类风湿关节炎患者血清TRP和KYN检测中的应用与临床价值
- 2009年
- 目的探讨高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD）同时测定血清色氨酸（TRP）和犬尿氨酸（KYN）对诊断类风湿关节炎（RA）的临床意义。方法血清标本加等量5％（V／V）高氯酸溶液去除蛋白，离心取上清液20μl，直接进样分析。色谱柱为Hpersil C8柱（300mm×6.0mm i.d，10μm）；流动相为0.25mol／L醋酸锌和50mmol／L醋酸溶液（含3％乙腈），流速为1.5ml／min；0-10min荧光检测器的激发波长和发射波长分别为365nm和480nm，10min后激发波长和发射波长分别变换为254nm和404nm。同时，用该方法测定120名健康成人和110例RA患者血清TRP、KYN和TRP／KYN比值（K／T），并评价其诊断RA的敏感度、特异度和方法学效能。结果血清标本的KYN和TRP保留时间分别为8.1和11.5min，两者分离良好。KYN线性范围为0.098—19.600μmol／L，最低检测浓度为0.04μmol／L；回收率为90.8％—96.2％，日内变异系数为3.68％，日间变异率为4.97％。TRP的线性范围为4.9—196.0μmot／L。最低检测限为0.005μmol／L，回收率为92.6—106.9％，日内变异系数为3.63％，日间变异系数为4.44％。在本试验的色谱条件下测定苯丙氨酸（Phe）、酪氨酸（Tyr）、犬尿喹啉酸（KYNA）、5-羟色胺（5-HT）和Cr均无干扰。RA组患者血清KYN含量和K／T比值[（2.06±0.38）μmol／L和（55.46±5.81）×10^-3]与健康对照组[（1.51±0.35）μmol／L和（32.54±9.00）×10^-3]比较，均显著升高（U=3251.0，t=10741，P均为0.000），而RA组TRP含量[（38.24±5.27）μmol/L]与健康对照组[（47.52±5.79）μmol／L]比较，则显著降低（t=10.399，P=0.000）。K／T比值诊断RA的敏感度、特异度分别为83.6％（92／110）、85.8％（103／120）。结论HPLC-FLD同时测定血清TRP和KYN的方法精密度、回收率、抗干扰能力、线性范围等均符合临床检测要求。K／T比值可作为RA的辅助性诊断指标。
- 罗昔波唐爱国莫喜明皮兰敢敖翔
- 关键词：色谱法高压液相犬尿氨酸色氨酸类风湿
- 脑梗死患者血清IDO及KAT比活性测定被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨吲哚氨2,3-双加氧酶（IDO）及犬尿氨酸氨基转移酶（KAT）活性在脑梗死患者中的变化情况及病理作用.方法 正常对照组35例和脑梗死组81例,采用免疫透射比浊法测定血清超敏C反应蛋白（hsCRP）、载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B（APOB）浓度,采用酶法分析甘油三酯（TG）、总胆固醇（CHO）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、游离脂肪酸（NEFA）浓度,采用HPLC-荧光衍生法测定血液色氨酸（TRP）、犬尿氨酸（KYN）及犬尿喹啉酸（KYNA）浓度,计算IDO及KAT比活性,并进行对照分析.结果 脑梗死组TRP、KYNA、HDL、KAT比活性明显低于对照组（P均＜0.05）.脑梗死组hsCRP、IDO比活性明显高于对照组（P均＜0.01）.脑梗死患者IDO比活性与hsCRP呈正相关（r=0.425,P=0.027）.结论 脑梗死患者体内存在炎症反应,炎症应答上调IDO的活性表达,进而影响KYN代谢途径,可能与脑梗死患者的病理生理密切相关.
- 莫喜明唐爱国项忠元李影郑荣罗昔波
- 关键词：脑梗死犬尿氨酸犬尿喹啉酸超敏C反应蛋白
- 高效液相色谱-荧光法同时测定血清5-羟色胺和色氨酸方法的建立被引量：1
- 2010年
- 目的建立一种同时测定血清中5-羟色胺(5-HT)和色氨酸(Trp)浓度的高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)。方法采用的色谱柱为Hypersil C18柱(250mm×4.6mmi.d.,7μm),流动相为0.1mol/L磷酸二氢钾/甲醇(85:15,V/V)溶液,流速1.0ml/min,荧光检测激发波长和发射波长在0～6min分别为278和338nm,6～10min转换为280和340nm。结果5-HT保留时间约为4.9min,线性方程为Y=4223461X-35303.9,最低检出浓度为0.001μmol/L,回收率为82.70%～95.40%,日内和日间RSD分别为2.03%和3.42%;Trp保留时间约为8.4min,线性方程为Y=421314X+38292.9,最低检出浓度为0.007μmol/L,回收率为83.67%～94.98%,日内和日间RSD分别为1.32%和3.31%;苯丙氨酸、酪氨酸、犬尿氨酸和犬尿喹啉酸等物质对本方法无干扰;健康成人(n=71)血清中5-HT和Trp的浓度分别为(544.8±156.8)nmol/L和(53.08±8.29)μmol/L。结论该方法简便、快速、灵敏,适于临床和科研应用。
- 周前选唐爱国任亚萍项忠元
- 关键词：高效液相色谱法荧光检测色氨酸5-羟色胺血清
- 分析前标本处理对血犬尿氨酸测定的影响
- 2008年
- 目的探讨血液犬尿氨酸(Kyn)测定时标本采集与保存对测定结果的影响。方法采用高效液相色谱-荧光法测定血清及相应血浆标本中Kyn浓度,对结果进行比较;测定在不同温度下保存不同时间的血清标本中Kyn浓度,对结果进行统计分析。结果EDTA-K2抗凝血浆与血清中犬尿氨酸测定结果比较无统计学意义(P>0.05)。冰冻(-20℃)条件下一周内血清中的Kyn浓度保持稳定。结论在血Kyn测定时,可用EDTA-K2抗凝血浆标本代替血清。血清标本不能及时检测时,最好置于≤-20℃条件下保存。
- 肖乐东唐爱国罗昔波
- 关键词：犬尿氨酸血清血浆标本采集高效液相色谱法
- 高效液相色谱-荧光法测定SLE患者血清色氨酸及其代谢产物被引量：4
- 2010年
- 目的建立一种同时测定血清色氨酸（tryptopban，Trp）、犬尿氨酸（kynurenine，Kyn）和犬尿喹啉酸（kynurenic acid，Kyna）的高效液相色谱-荧光检测法（HPLC—FD），并用此法检测SLE患者血清中Trp及其代谢产物Kyn、Kyna的含量。方法血清标本经0．624mol／L的高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液20μl直接进样分析测定。色谱柱为Hypersil C18柱，流动相为0．20mol／L醋酸锌、8．3mmoL／L醋酸和2．5％的乙腈；流速为1．5ml／min；荧光检测激发波长和发射波长在0～11min分别为365nm和480nm，11～15．5min变换为344nm和404nm，15．5～20min为254nm和404nm。采用建立的方法测定体检健康者和SLE患者血清Trp、Kyn和Kyna的含量。结果Trp的线性范围为0．610～196μmol／L，最低检出浓度为0．005μmol／L，平均回收率为103．71％；Kyn线性范围为0．049～98μmol／L，最低检出浓度为0．025μmol/L，平均回收率为97．45％：Kyna线性范围为1．050-1047nmol/L，最低检出浓度为0．050nmol/L，平均回收率为100．60％。日内、日间测定值的变异系数均小于5％。苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺对测定均无干扰。与正常对照组比较，SLE患者的Trp含量显著减少，Kyn和Kyna的含量及Kvn／Trp的比值显著增高。结论建立的HPLC—FD法能同时测定血清中Trp、Kyn和Kyna的含量，简便、快速、灵敏、特异。
- 项忠元唐爱国任亚萍周前选
- 关键词：色氨酸犬尿氨酸犬尿喹啉酸
- 高效液相色谱-荧光检测法在慢性肾功能不全患者血清芳香族氨基酸检测中的临床价值被引量：1
- 2011年
- 目的建立同时测定血清AAA含量的HPLC—FLD法，探讨CRI患者血清AAA含量变化及其临床应用价值。方法血清标本来自于100名健康体检者和80例CRI患者。将CRI患者按2002年美国肾脏基金会（NKF）诊断分期标准进行分期：CKD2期4例、CKD3期12例、CKD4期12例和CKD5期52例；按CRI不同病因分组：慢性肾炎型32例、糖尿病型36例和高血压型12例。血清经高氯酸去蛋白后，离心取上清液测定，外标法定量。采用MegresC18色谱柱，流动相为乙腈：水（体积比为1：9），流速为1．0ml／min，荧光检测器在不同时间段设定特定波长对血清AAA进行测定。对健康对照组和CRI患者组血清中AAA总量、Tyr、Phe和Trp含量及不同分期和不同病因CRI患者血清Tvr、Phe和Trp含量进行比较，同时评价血清AAA总量诊断CRI的敏感度与特异度。结果Tyr、Phe和Trp线性范围分别为0．550～275．000、3．050～1220．000和0．049～49．000μmol／L，最低检测限分别为0．014、0．500和0．005μmoL／L，平均回收率分别为100．9％、101．3％和98．5％，日内精密度为2．32％～3．92％（平均为3．13％），日间精密度为3．18％～4．20％（平均为3．58％）。CRI患者组血清AAA总量、Tyr、Trp含量及Tyr／Phe比值分别为（135．74±12．23）、（52．27±8．25）、（21．49±4．25）μmol／L和[0．87（0．68～1．05）]，低于健康对照组的（174．47±11．57）、（63．53±4．68）、（44．22±3．67）μmol／L和[0．97（0．94—1．00）]，差异均有统计学意义（t=-14．709、4．452、22．100，U=266．000，P均〈0．05）。不同分期CRI患者Tyr、Phe和Trp含量差异无统计学意义；Tyr含量在慢性肾炎组、高血压组和糖尿病组间差异无统计学意义，Phe在慢性肾炎组与高血压组、慢性肾炎组与糖尿病组问差异有统计学意义（U=114．00、395．00，P均〈0．05），Trp在慢性肾炎组与糖尿病组间差异有统�
- 李影唐爱国穆萨肖乐东
- 高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸被引量：10
- 2009年
- 建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）和犬尿喹啉酸（kynurenic acid,KYNA）含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8柱;流动相为0.25mol/L醋酸锌-50mmol/L醋酸溶液（含3%乙腈）,流速为1.5mL/min。在0~10min时间段,在激发波长和发射波长分别为365nm和480nm时检测Kyn;10min后,在激发波长和发射波长分别变换为344nm和404nm时检测KYNA。Kyn的保留时间约为8.1min,线性范围为98~19 600nmol/L,最低检出浓度为50nmol/L,平均回收率为94.88%,日内、日间测定值的相对标准偏差（RSD）均低于4%。KYNA的保留时间约为13.0min,线性范围为2.62~1 047nmol/L,最低检出浓度为0.11nmol/L,平均回收率为102.72%,日内、日间测定的RSD均低于4%。苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺等物质对目标物的检测无干扰。71例健康成人血清中,Kyn和KYNA含量分别为（1.40±0.34）μmol/L和（24.22±8.67）nmol/L。该方法简便、快速、灵敏、特异,适于临床和科研应用。
- 肖乐东唐爱国莫喜明罗昔波皮兰敢
- 关键词：荧光检测犬尿氨酸犬尿喹啉酸色氨酸血清
- 高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸被引量：11
- 2008年
- 建立了高效液相色谱-荧光检测（HPLC-FLD）测定血清中犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱（300mm×6.0mm,10μm）,流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液（含3%乙腈）,流速为1.5mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365nm和480nm。血清标本经5%（v/v）高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定。研究结果表明Kyn保留时间约为8.3min,线性范围为0.098-19.6μmol/L,最低检出浓度为0.04μmol/L,回收率为90.8%-96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰。建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用。
- 罗昔波唐爱国皮兰敢肖乐东敖翔卜艳红王瑞
- 关键词：高效液相色谱法荧光检测犬尿氨酸人血清
