国家自然科学基金(30672278)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：华中科技大学中山大学咸宁学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- P97抵抗高糖培养的人视网膜血管内皮细胞增殖
- 2009年
- 目的:研究含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,P97)对高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的作用。方法:体外高糖培养人视网膜血管内皮细胞(HRCECs),转染P97的RNA干扰质粒到HRCECs,抑制P97的表达,观察血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA水平变化,同时观察HRCECs增殖的变化。结果:RNA干扰P97组和对照组的VEGF/actin分别为:0.21±0.03和0.10±0.01,两组差异有显著性(P<0.05),RNA干扰P97组和对照组,HRCECs在G1期细胞分别为44.05%±3.62%、25.21%±3.20%,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:当P97表达受抑制后,VEGF的表达增高,HRCECs的增殖增强,这些变化可能与DR的发生发展相关。
- 李斌郑海红华开罗胡军
- 关键词：血管内皮生长因子糖尿病视网膜病变
- NTF2对视网膜新生血管的抑制作用
- 2009年
- 目的体外实验研究核转运因子2(NTF2)对视网膜新生血管的抑制作用。方法以血管内皮生长因子(VEGF)刺激体外培养人视网膜血管内皮细胞,并分为转染重组腺相关病毒2-NTF2(rAAV2-NTF2)的实验组和转染等量空白rAAV2的对照组,利用流式细胞仪和Boyden小室观察NTF2对激活状态的人视网膜血管内皮细胞增殖和迁徙的作用。结果流式细胞仪检测结果显示实验组在G1期的细胞比例为(49.57±0.43)%,对照组为(27.21±0.86)%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。Boyden小室实验检测迁徙细胞数,实验组和对照组分别为(13.8±1.5)和(34.6±2.5)(n=6,P<0.05),说明NTF2能抑制人视网膜血管内皮细胞的增殖和迁徙。结论NTF2对视网膜新生血管具有抑制作用。
- 李斌赵敏红李贵刚徐玲娟向艳毛晓春
- 关键词：视网膜新生血管
- P58^IPK基因在糖尿病鼠视网膜中表达的动态变化被引量：1
- 2011年
- 背景糖尿病视网膜病变（DR）的分子生物学发病机制仍不清楚，以往的研究表明内质网应激相关因子在糖尿病患者外周血中呈高表达，而P58^IPK可以抑制这些因子的表达，因此P58^IPK和糖尿病之间的关系值得深人研究。目的检测P58^IPK。在糖尿病大鼠模型视网膜中的动态表达，为进一步研究P58^IPK抑制DR的机制奠定基础。方法18只sD大鼠腹腔注射60mg／kg链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病动物模型，分别于造模后1、3、6个月各处死6只大鼠；另6只匹配的正常SD大鼠作为正常对照组。取视网膜组织采用实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）法检测P58^IPKmRNA在大鼠视网膜中的表达，观察P58^IPKmRNA随糖尿病的发展出现的动态变化。结果造模后糖尿病组大鼠表现出多饮、多食、多尿，血糖均≥16．5mmol／L，造模成功率为100％。造模后1个月、3个月鼠视网膜中P58^IPKmRNA／β-actinmRNA的A值分别为0．800±0．005和0．975±0．008，明显高于对照组的0．725±0．006，差异有统计学意义（t=22．589、t=62．784，P〈0．05），造模后6个月鼠视网膜P58^IPK／β—actin的A值为0．671±0．004，并明显低于对照组，差异有统计学意义（t=-17．984，P〈0．05）。结论P58^IPK。参与DR的发病机制，可能具有延缓DR发生和发展的作用。
- 刘荣石慧胡维琨闫淑崔铮李涛裴晗李斌
- 关键词：内质网应激糖尿病视网膜病变
- VEGF映射ROP新生血管的初步研究被引量：3
- 2008年
- 目的:利用VEGF的变化映射早产儿视网膜病变新生血管的发生发展过程。方法:建立缺氧小鼠新生血管动物模型,实时定量PCR检测小鼠视网膜VEGF在不同时间点的mRNA值,通过函数绘制VEGF与新生血管的拟合曲线,并求得VEGF映射视网膜新生血管的函数方程。结果:通过实验和数学推算,我们获得VEGF映射视网膜新生血管的线性方程。结论:利用VEGF的mRNA表达,可以建立方程映射视网膜新生血管的发生发展,为下一步研究奠定基础。
- 李斌李艳会徐玲娟华开罗
- 关键词：VEGF映射视网膜新生血管
- 鼠视网膜血管内皮细胞体外培养的改良及鉴定被引量：6
- 2011年
- 背景视网膜血管内皮细胞（RVECs）的体外培养是进行视网膜血管性疾病研究的基础，人眼球供体的缺乏是限制人血管内皮细胞培养的主要原因，与人高度同源的大鼠血管内皮细胞的培养方法已经建立，但其分离方法对细胞损伤较大，影响细胞的培养效率。目的建立和改良大鼠RVECs的培养方法。方法选取5只SD大鼠眼球，获得视网膜，用组织块培养法，将大鼠视网膜用质量分数0．1％胶原酶消化，并加入质量分数20％胎牛血清、血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮细胞生长添加物（ECGS），用血管内皮细胞培养基中和后充分吹打，制备细胞及组织悬液，接种于人纤维粘连蛋白（FN）包被的培养瓶中。用Ⅷ因子相关抗体鉴定培养的内皮细胞。结果组织块法消化培养2d可见细胞从组织块游出，培养4d可伸出触角呈梭形，5～6d可融合生长，培养14d后的细胞呈单层生长，培养的细胞Ⅷ因子相关抗体染色阳性。传代培养的细胞接种2h可重新贴壁，恢复融合生长状态。结论视网膜组织块培养并用胶原酶消化可获得活性较强的细胞和碎片，再用高选择性的血管内皮细胞培养基和FN促贴壁进行选择性培养，可获得纯度较高的RVECs。
- 崔铮闫淑刘荣李贵刚陈志祺杨红裴晗李涛李斌
- 关键词：视网膜血管内皮细胞体外培养动物模型
- 不同年龄组人视网膜微血管内皮细胞特性的研究(英文)
- 2009年
- 目的:研究2个不同年龄组供体来源的人视网膜微血管内皮细胞的特性。方法:分离培养2个不同年龄组的人视网膜微血管内皮细胞,分别为出生后30 d内和40-65岁供体组。视网膜微血管内皮细胞具有特异性表达,通过免疫荧光染色CD31、vWF和乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)的摄取来定位内皮细胞的标记。通过使用matrigel基质胶培养细胞,激光共聚焦显微镜和Western blotting分析vWF在细胞内的分布,评估2组细胞管状结构形成能力以及vWF在细胞内的不同分布。结果:从2个不同年龄组中成功地获得高纯度视网膜微血管内皮细胞。2组在种到基质胶后6 h均能形成典型的二维管腔样结构,但婴幼儿组评分比成人组高(27.2%±2.2%),且二维管腔样结构在30 h仍可较好地维持,而成人组已看到部分自发降解。另外可见到vWF在婴幼儿组主要表达在细胞核内,而成人组主要表达在胞浆。结论:不同年龄来源的人视网膜血管内皮细胞具有某些自身特定的性状特征,在与年龄相关的疾病的体外研究中,供体年龄因素可能造成的影响应该得到一定的重视。
- 李建桥罗燕马伟丁小燕袁玲肖伟李杰史煜唐仕波
- 关键词：血管内皮细胞视网膜WILLEBRAND因子
- 内质网应激热休克蛋白4在高糖大鼠视网膜的表达
- 2012年
- 随着生活水平的提高和人口老龄化的加剧，糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）的发病率在世界范围内呈上升趋势，对人群总体健康的危害程度越来越大。在病理状态下，内质网的蛋白质不折叠或错误折叠都会引起内质网应激，触发未折叠的蛋白反应，引起细胞凋亡。
- 张新法朱运玲裴晗李贵刚胡维琨李涛李斌
- 关键词：糖尿病视网膜病变内质网应激热休克蛋白人口老龄化
