国家自然科学基金(30672253)
- 作品数：22 被引量：72H指数：5
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- 高氧致慢性肺疾病早产大鼠P16基因启动子区甲基化
- 2011年
- 目的探讨高氧致慢性肺疾病早产大鼠肺组织p16基因的启动子甲基化状态。方法将早产Wistar大鼠80只随机分为高氧组（吸人氧浓度0．90）和对照组（吸人氧浓度0．21），每组均为40只。分别采用半巢式甲基化特异性聚合酶链反应技术和甲基化特异性聚合酶链反应技术检测肺组织p16基因的启动子甲基化状态。同时，应用逆转录-聚合酶链反应技术、Western印迹及免疫组织化学方法检测肺组织p16基因mRNA和蛋白的表达水平。结果应用半巢式甲基化特异性聚合酶链反应技术和甲基化特异性聚合酶链反应技术，对照组中不同日龄早产大鼠均未发现有甲基化发生。半巢式甲基化特异性聚合酶链反应技术检测高氧组甲基化发生率为52．5％（21／40），高于甲基化特异性聚合酶链反应技术检测甲基化的发生率（42．5％，17／40），但差异无统计学意义。高氧组肺组织p16mRNA表达水平在7、14、21d时分别为1．73±0．40，1．29±0．19和0．95±0．25，均低于对照组（分别为2．11±0．37、1.60±0．27和1.72±0．34），t分别为2．19、2．95和10．43，P均〈0．05。高氧组肺组织p16蛋白表达水平在7、14、21d时分别为88．1±8．7、65．7±4．5和50．4±4．9，也低于对照组（分别为95．0±4．1、83．5士13．6和86．7±11．9），t分别为2．27、3．95和13．40，P均〈O．05。甲基化大鼠肺组织p16mRNA表达水平为1．06±0．61，蛋白表达水平为62．32±25．65，均低于非甲基化大鼠，分别为1．63±0．62和94．93±22．21，差异均有统计学意义（t=2．95，OR=0．86，P〈0．01；t=4．28，OR=0．85，P％0．01）。结论高氧可导致早产大鼠的肺组织p16基因启动子甲基化异常，且其甲基化的发生率随高氧暴露时间的延长而逐渐增加，高氧诱导的p16基因启动子高甲基化状态可能是p16mRNA及蛋白的低水平表达的机制之一，但并非基因沉默。
- 岳晓红富建华薛辛东
- 关键词：高氧症肺疾病基因甲基化早产
- 肺组织肺泡表面活性物质相关蛋白与高氧肺损伤肺水肿的关系被引量：7
- 2016年
- 目的探讨高氧损伤状态下,肺组织内表面活性物质相关蛋白A(SPA)、表面活性物质相关蛋白B(SPB)、表面活性物质相关蛋白C(SPC)mRNA的变化规律及其在肺水肿中的作用。方法将新生大鼠120只依据吸氧浓度(Fi O2)不同分为研究组1(Fi O280%)、研究组2(Fi O260%)、研究组3(Fi O240%)和空气对照组(Fi O221%),每组40只。各组分别于实验后1、3、5、7、14 d行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SPA、SPB、SPC mRNA,并对各组检测结果进行比较。结果各组新生大鼠肺组织内SPA mRNA水平在实验后1、3 d时比较差异均无统计学意义(P>0.05),研究组1和研究组2新生大鼠肺组织内SPA mRNA水平在实验后5、7 d时均较空气对照组低(P<0.05),研究组1在实验后5、7 d时和研究组2在实验后7 d时新生大鼠肺组织内SPA mRNA水平均较研究组3低(P<0.05),研究组1新生大鼠肺组织内SPA mRNA水平在实验后14 d时高表达,较空气对照组显著升高(P<0.05)。各组新生大鼠肺组织内SPB mRNA水平在实验后1、3 d时比较差异均无统计学意义(P>0.05),研究组1和研究组2在实验后5 d时新生大鼠肺组织内SPB mRNA水平显著低于空气对照组,研究组1在实验后7、14 d时均较空气对照组显著升高,且14 d时较研究组3也明显升高(P<0.05)。各组新生大鼠肺组织内SPC mRNA水平在实验后1、5 d时比较差异均无统计学意义(P>0.05),研究组1、研究组3新生大鼠肺组织内SPC mRNA水平在实验后3 d时较空气对照组显著降低(P>0.05),研究组1在实验后7、14 d和研究组2在实验后14 d时新生大鼠肺组织内SPC mRNA水平虽有升高趋势,但仍显著低于空气对照组(P<0.05),研究组1新生大鼠肺组织内SPC mRNA水平在实验后7 d时较研究组2低、14 d时较研究组3低(P<0.05)。结论 SPA、SPB、SPC mRNA在高氧肺损伤早期表达明显降低,可能是导致肺水肿的重要原因之一。
- 岳冬梅佟雅洁薛辛东
- 关键词：高氧症上皮细胞肺损伤肺水肿
- 高体积分数氧致慢性肺疾病新生鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的改变被引量：5
- 2011年
- 目的探讨高体积分数氧(高氧)损伤状态下,新生鼠肺组织通透性及肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)超微结构的动态变化。方法新生大鼠320只,依据吸氧体积分数(FiO2)分组:实验组1(FiO2800 mL·L-1)、实验组2(FiO2600 mL·L-1)、实验组3(FiO2400 mL·L-1)、空气对照组(FiO2210 mL·L-1)。每组分别于实验1 d、3 d、5 d、7 d、14 d取8只鼠,计算其肺湿/干质量比值(W/D);另取8只新生鼠行支气管肺泡灌洗,检测其支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白水平的动态变化;透射电镜及硝酸镧示踪技术观察其AECⅡ超微结构及细胞膜通透性改变。结果各实验组5 d、7 d、14 d肺W/D比值明显高于空气对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05),高氧3 d后实验组1与实验组2、实验组3的BALF中蛋白水平与空气对照组比较均显著增高(Pa<0.05);各实验组7 d内随暴露时间延长呈上升趋势;BALF中蛋白水平在实验组3、实验组2、实验组1也呈逐渐增高趋势,且与空气对照组比较均显著增高(Pa<0.05)。实验组AECⅡ的超微结构在出生后不同时间可以出现明显改变,且对硝酸镧颗粒通透性明显增加。结论高氧肺损伤早期存在肺泡上皮通透性增加导致的肺水肿改变;新生鼠随着高氧暴露浓度的增高和时间的延长,肺损伤加重。
- 岳冬梅佟雅洁薛辛东
- 关键词：高体积分数氧上皮细胞肺水肿
- IGF-I和IGF-IR在高氧致新生鼠慢性肺疾病中的动态表达及其作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究IGF-I、IGF-IR在高氧致新生鼠慢性肺疾病(CLD)中的表达及作用。方法将足月新生大鼠144只随机分为高氧组和空气组,分别于实验1d,3d,7d,10d,14d,21d应用免疫组化和RT-PCR技术检测IGF-I、IGF-IR的动态表达。结果CLD时IGF-I和IGF-IR呈动态变化,高氧组和空气组比较,在实验3d^10d IGF-I和IGF-IR表达明显降低(P<0.05),14d和21d表达明显增强(P<0.05)。结论IGF-I和IGF-IR是肺泡发育的正向调节因子,与CLD时肺泡分隔受阻、肺泡成熟障碍和肺纤维化有关。
- 刘丹薛辛东白英龙
- 关键词：胰岛素样生长因子1慢性肺疾病
- 高氧致慢性肺疾病早产鼠的肺组织CDK4、p21动态变化及其意义被引量：7
- 2008年
- 目的探讨CDK4及p21在高氧诱导早产鼠慢性肺疾病(CLD)形成中动态表达规律及对CLD肺纤维化的影响,完善CLD发生机制及研究新的防治策略。方法将80只新生早产SD大鼠随机分为实验组(FiO2为90%)和对照组(FiO2为21%)。分别采用免疫组化SABC方法检测特定时间点1,3,7,14,21d大鼠肺组织CDK4、p21蛋白表达并进行肺组织纤维化评分。结果实验组14,21d肺纤维化评分明显高于对照组;肺组织CDK4蛋白表达明显高于对照组,其与肺纤维化评分呈明显正相关;p21蛋白表达明显低于对照组,其与肺纤维化评分呈明显负相关。结论高氧可诱导早产鼠的肺组织CDK4表达增强及抑制p21表达,其异常表达可能是导致肺成纤维细胞过度增殖,最终发生肺间质纤维化的重要原因。
- 岳晓红富建华薛辛东
- 关键词：慢性肺疾病CDK4P21早产
- 高体积分数氧致慢性肺疾病新生鼠信号转导转录活化因子3表达及其对表面活性蛋白-B的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨高体积分数氧(高氧)损伤状态下,肺组织内信号转导转录活化因子3(STAT3)的动态变化规律,及其对表面活性蛋白-B(SP-B)的影响。方法新生鼠160只,依据吸氧体积分数(FiO2)分为4组:实验1组(FiO2=800 mL·L-1)、实验2组(FiO2=600 mL·L-1)、实验3组(FiO2=400 mL·L-1)、空气对照组(FiO2=210 mL.L-1)。每组分别于实验1d、3d、5d、7d、14d,免疫组织化学检测STAT3水平,反转录-PCR检测SP-B水平。结果高氧暴露使SP-B mRNA表达异常,实验1组1d、3d SP-BmRNA水平与空气对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05),实验1组5d、7d、14d SP-B mRNA水平与空气对照组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05),实验2组5d时SP-B mRNA水平与空气对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),实验3组与空气对照组差异无统计学意义(P>0.05)。实验各组肺组织STAT3蛋白的表达高氧刺激3 d明显增加,5d、7d差异更为显著(Pa<0.05)。实验组SP-B mRNA表达与STAT3呈明显正相关(r=0.892,P<0.001)。结论高氧肺损伤的早期伴随有信号转导酪氨酸蛋白激酶STAT3通路的激活发挥其对肺组织的保护作用,SP-B合成、分泌信号可能是STAT3途径转导的。
- 岳冬梅佟雅洁薛辛东
- 关键词：高体积分数氧
- 高氧致慢性肺疾病新生鼠肺组织水通道蛋白1、5的表达及其调控作用的研究被引量：5
- 2012年
- 目的水通道蛋白(AQP)是新近发现的一组与水通透性有关的细胞膜转运蛋白,该文旨在探讨高氧损伤状态下,肺组织内AQP1、AQP5的动态变化规律及其调控作用。方法新生鼠160只,依据吸氧浓度(FiO2)分为实验组1(FiO2800 mL/L)、实验组2(FiO2600 mL/L)、实验组3 FiO2400 mL/L)和空气对照组(FiO2210 mL/L)。每组分别于实验后1、3、5、7和14 d行AQP1、AQP5、细胞外信号调节激酶(ER K)的免疫组织化学检测,同时行AQP1、AQP5 Western blotting印迹检测。结果随吸氧浓度及暴露时间的增加,实验组AQP1第3天表达开始降低,第5天和第7天明显降低(P<0.05),第14天有所恢复。实验组AQP5表达低于对照组,第1天和第3天呈稍高表达,以后随日龄增加逐渐降低(P<0.05)。总趋势上AQP1、AQP5的表达在实验组3、实验组2、实验组1依次降低;肺组织ERK1/2表达对照组维持在较低的水平,实验组ERK1/2表达于第7天和第14天均明显高于对照组。ER K1/2变化与AQP1表达呈正相关(r=0.625,P<0.001;r=0.572,P<0.001;r=0.798,P<0.001;r=0.645,P<0.001)。结论 AQP1、AQP5在高氧肺损伤时表达降低,高氧肺损伤中AQP合成、分泌信号可能是ERK途径转导的。
- 岳冬梅佟雅洁薛辛东
- 关键词：水通道蛋白高氧细胞外信号调节激酶新生鼠
- 高氧致新生大鼠慢性肺损伤肺组织血管紧张素Ⅱ1型受体表达的变化被引量：1
- 2008年
- 目的观察血管紧张素II1型受体(AT1R)在高氧致慢性肺疾病演变过程中的变化。方法足月新生大鼠生后24h内分别置在85%～90%玻璃氧舱和空气中持续暴露,实验开始后的第1,3,7,14,21d留取肺组织,HE染色观察肺组织病理改变、免疫组化和RT-PCR方法检测肺组织AT1R蛋白和mRNA表达。结果新生大鼠肺组织AT1R主要定位在肺泡上皮细胞、间质细胞、间质巨噬细胞、支气管和毛细血管外膜;空气组3d后表达逐渐下降,21d仅在肺泡上皮细胞及血管外膜弱表达;高氧组21d在损伤部位的间质巨噬细胞、成纤维细胞仍有较强的免疫染色。高氧组1,3,7dAT1R蛋白及mRNA表达与空气组无明显差别,14d和21d时较空气组表达显著增强(P<0.01)。结论血管紧张素II作为AT1R配体可能参与高氧慢性肺损伤的发生。
- 陈宁刘雪雁富建华薛辛东
- 关键词：高氧肺纤维化1型受体
- 高体积分数氧致慢性肺疾病早产鼠肺上皮细胞凋亡及其调控机制被引量：7
- 2008年
- 目的 探讨高体积分数氧致慢性肺疾病（CLD）早产鼠肺泡上皮细胞（AEC）凋亡的动态变化规律及Caspase-3 mRNA、Bax和Bcl-2基因的调控作用。方法 将60只早产SD鼠生后1d内随机分为高体积分数氧暴露组（高氧组）和空气组（对照组）各30只，制备高体积分数氧致CLD早产鼠模型，应用脱氧核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记（TUNEL）、反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术及链霉亲和素-过氧化物酶复合物（SABC）免疫组织化学方法，检测生后1、3、7、14及21d AEC的凋亡指数（AI）和肺组织Caspase-3mRNA、Bax及Bcl-2基因蛋白的表达。相关分析采用Spearman分析。结果 与对照组比较，高氧组3dAEC的AI、肺组织Caspase-3 mRNA水平及Bax基因蛋白表达开始升高，7～21d明显增加，Caspase-3 mRNA水平在此期间持续于高水平；Bcl-2基因表达7d开始降低，14～21d明显降低。高氧组AEC的AI与肺组织Caspase-3 mRNA及Bax表达均呈正相关，与Bcl-2表达呈负相关。结论高体积分数氧可致CLD早产鼠肺组织Caspase-3 mRNA基因表达增强，使Bax和Bcl-2介导Bax／Bcl-2基因表达比例失衡，是CLD早产鼠肺上皮细胞凋亡的重要机制之一。
- 岳晓红富建华薛辛东
- 关键词：高体积分数氧慢性肺疾病B细胞淋巴瘤/白血病-2
- 新生儿上呼吸道梗阻病因的早期识别被引量：3
- 2012年
- 上呼吸道梗阻尽管在新生儿期并非常见，但由此导致的功能性或解剖性气管狭窄，不仅使患儿生后即可表现为吸气性喘鸣和发绀，多数还伴喂养和吞咽困难，重者甚至因窒息而猝死。因此，在新生儿生后早期，应准确识别导致气管梗阻的原因，以便及时采取适当措施解除或减轻梗阻，从而避免因严重低氧血症导致的一系列并发症的发生。
- 薛辛东
- 关键词：上呼吸道梗阻新生儿期梗阻病因严重低氧血症气管狭窄气管梗阻
