山东省自然科学基金(Y2007C079)
- 作品数:7 被引量:16H指数:2
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- 高效液相色谱-紫外可见检测器检测大鼠肝组织中的还原型谷胱甘肽被引量:1
- 2010年
- 目的建立一种高效液相色谱-紫外可见检测器测定大鼠肝组织中还原型谷胱甘肽含量的方法。方法肝组织在冰浴条件下匀浆后经乙腈沉淀蛋白,离心,取上清液在硼酸缓冲液中与荧光剂4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑(NBD-F)进行衍生化反应。流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(23∶77,V/V),流速1.0mL/min,检测波长470nm,进样量10μL;采用外标法定量。结果还原型谷胱甘肽在0.200~125μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9999(n=5),最低检测限为0.0400μg/mL(S/N=3);样品加标回收率为96.2%~104.5%;日内相对标准偏差为1.1%~4.6%,日间标准偏差为1.9%~7.5%。结论本方法操作简便,快速,准确,灵敏度高,稳定性好,适合肝组织中还原型谷胱甘肽的测定。
- 郗德凤王希峰苏冠民李琳杨燕邵丽华
- 关键词:还原型谷胱甘肽肝组织
- 生物样品中3-硝基酪氨酸检测的现状
- 2010年
- 综述了近年来生物样品中3-硝基酪氨酸的测定方法,主要涉及气相色谱法、高效液相色谱法及色谱-质谱联用方法的应用,并对此领域的发展提出了展望(引用文献38篇)。
- 郭帅邵丽华
- 关键词:生物样品3-硝基酪氨酸色谱质谱
- 固相萃取-高效液相色谱荧光检测法测定人血浆3-硝基酪氨酸含量被引量:7
- 2009年
- 建立了人血浆中痕量3-硝基酪氨酸的高效液相色谱-荧光检测法。血浆经乙腈沉淀蛋白后,上清液用氮气吹干,残渣复溶后过C18固相萃取小柱净化浓缩,洗脱液再用氮气吹干,残渣进行荧光衍生化反应。采用高效液相色谱分离,荧光检测器检测,外标法定量。3-硝基酪氨酸在0.50~50.0nmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.9999;样品加标绝对回收率为89.3%~91.9%,相对回收率为99.2%~107.9%;日内相对标准偏差为1.46%~4.79%,日间相对标准偏差为2.75%~9.20%;在血浆中检出限为0.25nmol/L;测定正常人血浆中3-硝基酪氨酸平均浓度为1.18nmol/L(n=21),Ⅱ型糖尿病病人血浆中3-NT平均浓度为3.63nmol/L(n=23)。本方法灵敏度高,重现性好,适用于临床研究中大样本量的测定。
- 郭帅邵丽华荣琳王希峰郗德凤
- 关键词:3-硝基酪氨酸人血浆荧光检测固相萃取高效液相色谱
- 肝性脑病中肝脑组织硝基化损伤的研究进展
- 2010年
- 肝性脑病(HE)是肝炎、肝硬化的严重并发症。有资料显示,HE病死率为78%~84%。目前HE发病机制尚未完全阐明。现将近年来关于HE发病与肝脏和脑组织中硝基化损伤关系的研究进展综述如下。
- 叶青邵丽华
- 关键词:肝性脑病蛋白质硝基化
- 检测肝损伤患者的血清3-硝基酪氨酸的临床意义——附49例报告被引量:5
- 2009年
- 目的:研究肝损伤患者血清3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)水平的临床意义。方法:肝损伤患者49例,根据病情轻重分为轻度组(24例)和重度组(25例),选择同期35名健康体检者作为正常对照组。测定3组的蛋白硝基化产物血清3-NT和脂质过氧化产物丙二醛水平,并对轻度组和重度组的3-NT与丙二醛水平进行直线相关分析。结果:肝损伤患者血清3-NT为(3.5±1.1)nmol/L、丙二醛为(9.3±3.9)μmol/L,明显高于正常对照组的(1.2±0.5)nmol/L和(4.2±1.1)μmol/L(均为P<0.01);肝损伤重度组患者的血清3-NT为(4.0±1.1)nmol/L、丙二醛为(11.5±3.7)μmol/L,明显高于轻度组的(3.0±0.9)nmol/L和(6.9±2.5)μmol/L(均为P<0.01);肝损伤轻度组患者血清3-NT和丙二醛水平无关(r=0.382,P>0.05),重度组患者血清3-NT和丙二醛呈正相关(r=0.439,P<0.05)。结论:监测肝损伤患者血清3-NT水平可预测肝损伤的严重程度,特别是对严重肝损伤患者预测意义更大。
- 马邵叶青郭帅王刚
- 关键词:肝损伤3-硝基酪氨酸丙二醛硝基化合物脂质过氧化
- 肝性脑病大鼠肝及脑组织蛋白质硝基化和细胞凋亡的研究被引量:2
- 2010年
- 目的探讨肝性脑病(HE)大鼠肝脏及脑组织中的蛋白质硝基化和细胞凋亡与HE发病的关系。方法雄性Wistar大鼠随机分为HE组和空白对照组。HE组用硫代乙酰胺(TAA)制造大鼠HE模型。采用链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫组化法检测肝脏和脑组织硝基化蛋白质和一氧化氮合酶(NO S);用原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,并计算凋亡指数;空白对照组大鼠用生理盐水做平行对照。结果 HE组大鼠肝脏和脑组织中检测到明显的硝基化蛋白质沉积,而对照组少见;HE组大鼠肝脏和脑组织中检测到NO S的表达,对照组甚少;HE组大鼠肝脏和脑组织细胞凋亡指数较对照组明显增高(P<0.01)。结论 HE与其肝脏和脑组织蛋白质硝基化关系密切。
- 叶青荣琳汪心婷邵丽华
- 关键词:肝性脑病细胞凋亡
- 依布硒啉对肝性脑病大鼠的保护作用被引量:1
- 2010年
- 目的探讨依布硒啉对肝性脑病(HE)大鼠的保护作用并探讨其机制。方法 Wistar大鼠随机分为4组:空白对照组(Ⅰ),HE模型组(Ⅱ),依布硒啉处理组(Ⅲ)和溶剂对照组(Ⅳ)。用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射,建立Ⅱ期HE模型后分别给予生理盐水、依布硒啉和二甲基亚砜(DMSO)灌胃1周。检测各组血清3-硝基酪氨酸(3-NT)、谷丙转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;观察肝脏的病理改变。结果Ⅲ组大鼠HE症状较Ⅱ组和Ⅳ组进展缓慢;Ⅲ组与Ⅱ组、Ⅳ组比较各血清指标差异均有统计学意义(P<0.05),与Ⅰ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论依布硒啉对TAA诱导的HE大鼠有一定的保护作用,可减缓HE的发展。其机制可能与依布硒啉能够清除体内过氧亚硝酸阴离子且阻止酪氨酸硝基化有关。
- 荣琳邵丽华郗德凤王淑娥王希峰汪心婷马立宪
- 关键词:依布硒啉肝性脑病3-硝基酪氨酸