广东省自然科学基金(S2011010004230)
- 作品数：6 被引量：11H指数：3
- 相关作者：蒋茂林田超黎建欣曹正国董晓程更多>>
- 相关机构：汕头大学安徽医科大学附属省立医院中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- S-三甲基-L-半胱氨酸对膀胱尿路上皮癌细胞Eg5基因表达和凋亡的影响
- 2022年
- 目的:体外观察纺锤体驱动蛋白Eg5抑制剂S-三甲基-L-半胱氨酸(STLC)对人膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞Eg5基因表达和凋亡的影响。方法:分别采用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐微量酶反应(MTT)比色法、TUNEL染色法、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blotting法检测STLC对人膀胱癌BIU-87细胞的细胞周期、生长抑制率、凋亡指数、Eg5 mRNA及其蛋白相对表达水平的影响。结果:将STLC与BIU-87细胞共孵育,不同时间点收集细胞,可见随着STLC作用时间延长至16 h,细胞有丝分裂周期中G2/M期的BIU-87细胞明显增多(29.6%),且细胞发生凋亡的比例也有明显增加的趋势。统计分析显示,与0 h相比,STLC处理16 h时细胞凋亡比例升高,差异有统计学意义(P=0.020)。去除STLC后再培养,于不同时间点收集细胞,结果表明STLC去除后BIU-87细胞周期进程开始恢复,与去除1 h时G2/M期细胞比例(34.84%)相比,去除3 h后G2/M期细胞比例(24.9%)显著降低,差异有统计学意义(P=0.001);细胞凋亡比例差异也有统计学意义(P=0.049)。与对照组相比,STLC处理组细胞增殖抑制率和凋亡指数均显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与对照组相比,STLC处理组Eg5 mRNA和蛋白的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:STLC可有效抑制Eg5基因表达并诱导人膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞凋亡,为膀胱尿路上皮癌的药物治疗提供了实验依据和理论基础。
- 曹正国田超钟苏权周琳雄陈桂柳
- 关键词：膀胱尿路上皮癌
- GRIM-19在人膀胱尿路上皮癌中的表达及其与p63、STAT3的相关性研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究GRIM-19在人膀胱尿路上皮癌(BTCC)组织中的表达和临床意义,以及与p63、STAT3表达的相关性,探讨GRIM-19对p63、STAT3的影响及其在BTCC中的作用及机制。方法采用逆转录聚合酶链反应检测76例BTCC组织、45例相应的癌旁组织和30例正常膀胱组织的GRIM-19mRNA表达,免疫印迹法检测p63、STAT3蛋白的表达。结果 GRIM-19mRNA在76例BTCC组织中的阳性表达率为40.79%,显著低于癌旁组织和正常膀胱组织(分别为66.67%和96.67%)(P均<0.05);p63、STAT3蛋白在BTCC组织中的表达(分别为82.89%、72.37%)显著高于癌旁组织和正常膀胱组织(P均<0.01)。BTCC组织中GRIM-19mRNA的低表达与肿瘤的病理分级、淋巴转移密切相关,而与患者性别、年龄、临床分期、肿瘤直径和肿瘤发生情况等无相关性。相关性检验表明GRIM-19mRNA与p63、STAT3表达呈显著负相关(P<0.01)。结论GRIM-19mRNA在BTCC组织中的表达下调,提示GRIM-19作为重要的抑癌基因,可能与凋亡相关基因p63、STAT3在BTCC的发展中起拮抗作用,参与BTCC的发生和发展过程,并可能是BTCC转移的潜在标志。
- 曹正国田超黎建欣蒋茂林董晓程
- 关键词：膀胱尿路上皮癌GRIM-19P63STAT3
- PIWIL2在人类膀胱尿路上皮癌中的表达及其功能研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究PIWIL2在人类膀胱尿路上皮癌（BTCC）中的表达及siRNA对人类膀胱癌细胞PIWIL2表达的影响。方法采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测BTCC46例、腺性膀胱炎21例、癌旁组织17例、正常膀胱组织14例中PIWII．2mRNA的表达；设计合成针对PIWIL2的3个特异性siRNA，转入人类膀胱癌BIU-87细胞，分别采用四甲基偶氮唑蓝、DNA原位末端标记法、RT-PCR和Westernblot检测siRNA对BIU．87细胞生长抑制率（IR）、凋亡指数（AI）和PIWIL2mRNA及其蛋白表达的影响。结果BTCC组织中PIWIL2mRNA的表达率为76．08％（35／40），均显著高于腺性膀胱炎组织f42．86％（9／21）]、癌旁组织[41．17％（7／17）]和正常膀胱组织[7．14％（1／14）]（P=0．008，P：0．010，P：0．000）。BTCC组织中PIWIL2的高表达与肿瘤淋巴结转移、病理分级均密切相关。siRNAI一3组细胞的IR[（37．52±8．84）％、（64．36±9．64）％、（62．94±8．43）％]和AI[（26．18±5．42）％、（38．75±6．19）％、（40．02±5．64）％1均分别显著高于对照组[（1．97±0．02）％、（3．35±0．47）％]（均P=0．000），PIWIL2mRNA及其蛋白表达水平均显著低于对照组；其中siRNA2、3组细胞的IR、AI和对PIWIL2表达的抑制作用均显著高于siRNA1组。结论PIWIL2在BTCC中的高表达，提示其与膀胱癌的发生、发展密切相关；体外转录合成的siRNA可抑制BIU一87细胞PIWIL2的表达，诱导肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞生长，提示PIWIL2可作为膀胱肿瘤基因治疗的重要靶点。
- 曹正国田超蒋茂林吴奎黎建欣吴宝国黄洪才
- 关键词：SIRNA膀胱肿瘤
- 人膀胱癌组织中肿瘤干细胞样细胞的分离培养及PIWIL2表达被引量：4
- 2012年
- 目的从人膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中分离培养肿瘤干细胞样细胞(CSLC),鉴定其生物学特性,并研究PIWIL2在CSLC中的表达和意义。方法收集12例不同临床分期BTCC患者组织标本,通过酶消化和原代培养相结合等方法处理,采用无血清悬浮培养法分离培养获得含CSLC的悬浮细胞球,流式细胞仪检测细胞表面分子标志CD133和CD44的表达,免疫磁珠分选系统分离CD133+CD44+细胞;采用半定量逆转录聚合酶链反应检测PIWIL2mRNA在CSLC中的表达;裸鼠皮下接种CS-LC,观察其成瘤能力。结果成功地从人膀胱癌组织分离培养获得可悬浮生长、稳定传代的CSLC,CSLC高表达CD133和CD44,裸鼠皮下接种1×104、1×105个CSLC均可全部成瘤,PIWIL2mRNA在CSLC的表达显著高于正常膀胱组织细胞。结论采用无血清悬浮培养法成功从人膀胱癌组织中分离获得CSLC,具有肿瘤干细胞特性,能高度表达PIWIL2,为靶向肿瘤干细胞的治疗提供了实验依据。
- 曹正国田超蒋茂林董晓程黎建欣肖恒军
- 关键词：肿瘤干细胞膀胱肿瘤
- PIWIL2在人膀胱移行细胞癌肿瘤干细胞样细胞中的表达及意义被引量：3
- 2011年
- 目的研究P1WIL2在人膀胱癌肿瘤于细胞样细胞（CSLC）中的表达和意义，探讨PIWIL2化靶向肿瘤干细胞治疗中的作用。方法用无血清悬浮培养法从人膀胱移行细胞癌细胞株BIU-87中分离扶得悬浮细胞球，流式细胞仪检测细胞表面分子标志CDl33和CD44的表达，免疫磁珠分选系统分离CDl33＋C1）44＋细胞；分刖采用Transwell小室侵袭实验、膜联蛋白／碘化丙锭双标流式细胞术、半定量逆转录聚合随链反应（RT—PCR）检测CSLC的体外侵袭能力、凋亡率和PIWIL2 mRNA的表达。结果BIU-87细胞可在无血清培养攮小形成可悬浮生K、稳定传代的肿瘤干细胞样细胞球。与贴壁的BIU-87细胞相比，CSLC高表达CDl33和CD44，具仃更强的体外侵袭力、较低的凋亡率，P1WIl2mRNA在CSLC的表达也显著高于BIU-87细胞。结论采用尤血清悬浮培养法从人膀胱移行细胞癌细胞株中分离获得的CSLC，具有自我更新平和多分化的能力，高懂表达PIWIL2。
- 曾正国田超蒋茂林董晓程吴宝国黎建欣黄洪才
- 关键词：膀胱肿瘤
- 膀胱尿路上皮癌中的细胞外基质蛋白-1表达和意义及其与VEGF的相关性研究
- 2022年
- 研究细胞外基质蛋白1(ECM-1)在膀胱尿路上皮癌(UCCB)中的作用方式和临床意义,以及与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的相关性,探讨ECM-1表达在膀胱尿路上皮癌的发现、确诊和监测中所能够起到的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)作为检测ECM-1的表达结果,检测对象共136处,分别为膀胱尿路上皮癌组织71例、癌旁组织50例、正常膀胱尿路组织15例;免疫蛋白印迹法(Western Blotting)作为检测VEGF蛋白表达的技术,检测对象与RT-PCR中所选取的组织结构保持一致。结果:在71例UCCB组织中,ECM-1表现出的阳性表达率高达78.87%,相较于阳性表达率仅为10%的癌旁组织和0%的健康膀胱组织,表达率与是否存在癌细胞的关系明显存在密切关系,所代表的统计学意义不可忽视(P均<0.05)。VEGF蛋白表达率也在UCCB组织、癌旁组织和健康膀胱组织之间也存在明显区别,与癌细胞的存在同样表现出密切关系,说明其可作为临床上发现、确诊、监测膀胱癌的参考对象。UCCB组织中ECM-1和VEGF的高表达结果表现出与膀胱尿路上皮癌的淋巴转移和病理分级均关系密切;而与参与本次实验的患者性别、年龄分布、临床分期、直径和肿瘤发生情况等均无明显关系。本次实验结果表明ECM-1与VEGF都与癌细胞的存在有关,二者相互之间存在一定关系,且统计学意义明确(P<0.05)。结论:ECM-1在UCCB组织中的表达升高,可促进膀胱癌内微血管形成,提示ECM-1可能作为证明膀胱尿路上皮恶性肿瘤存在、转移的标志。
- 曹正国田超钟苏权周琳雄陈桂柳
- 关键词：膀胱尿路上皮癌VEGF
