福建省科技厅青年人才基金(2006F3031)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：福建省立医院复旦大学更多>>
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- 合成成骨生长肽对人骨髓间充质干细胞成骨转化的促进被引量：7
- 2009年
- 背景:成骨生长肽在体内外细胞培养中具有明显的促成骨活性,这种促成骨作用的分子机制还不清楚,现已通过人工方法成功制备了合成成骨生长肽。目的:探讨合成成骨生长肽对体外培养的人骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的作用。设计、时间及地点:基因和蛋白水平的细胞学体外观察,于2006-07/2007-12在福建省医学科学研究所基因工程实验室及复旦大学附属中山医院中心实验室完成。材料:骨髓标本来源于福建省立医院骨一科收治的男性髂骨植骨患者,合成成骨生长肽由中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所崔大敷教授惠赠,ERK1/2抑制剂U0126为美国CST公司产品。方法:密度梯度离心法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,单纯矿化液组加入由10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50mg/LL-抗坏血酸组成的矿化液;10-7,10-9,10-11mol/L合成成骨生长肽组分别加入对应浓度的合成成骨生长肽,再加入矿化液;常规培养组加入含体积分数为0.1胎牛血清的低糖DMEM。主要观察指标:倒置显微镜观察细胞形态变化,RT-PCR法和免疫组织化学染色检测成骨标志物的表达,Western-blot法分析合成成骨生长肽对ERK1/2信号通路的影响,观察U0126对合成成骨生长肽作用的干预。结果:加入合成成骨生长肽后,骨髓间充质干细胞体积增大,突起增多,呈多角形,胞浆含有较多颗粒状物质,出现致密细胞结节。合成成骨生长肽在mRNA和蛋白水平均能促进成骨标志物碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨钙素的表达,定量分析结果显示10-9mol/L合成成骨生长肽促成骨作用最强。加入合成成骨生长肽后能够引起ERK1/2信号通路的持续性激活,经U0126预处理后几乎完全阻断了合成成骨生长肽对骨髓间充质干细胞的促成骨作用。结论:合成成骨生长肽可明显促进人骨髓间充质干细胞向成骨方向的转化,在10-9mol/L浓度下促成骨�
- 徐杨陈统一林飞跃尹晓明
- 关键词：成骨生长肽骨髓间充质干细胞成骨ERK1/2
- 合成成骨生长肽对人骨髓间充质干细胞的促成骨作用被引量：4
- 2009年
- 目的研究合成成骨生长肽(sOGP)对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的影响。方法分离BMSCs进行体外培养,加入不同浓度的sOGP,观察细胞形态变化,RT-PCR法检测3种主要成骨标志物[碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原、骨钙素]的表达,组织化学染色检测ALP、Ⅰ型胶原的表达及钙质的沉积并进行图像分析。结果sOGP在mRNA和蛋白水平均能促进各成骨标志物的表达,定量分析结果显示,sOGP在10-9mol/L浓度组促成骨的作用最强。结论sOGP能促进人BMSCs向成骨方向转化。这种促成骨能力与其浓度密切相关,以10-9mol/L浓度促成骨能力最强。
- 徐杨陈统一林飞跃尹晓明
- 关键词：成骨生长肽骨髓间充质干细胞成骨
