国家杰出青年科学基金(39825116)
- 作品数：9 被引量：34H指数：4
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- 人胚胎多能干细胞研究中的几个问题
- 2003年
- 目前在人胚胎多能干细胞的研究中存在材料来源不足、培养体系复杂和自发性分化的问题。这 3个基本问题限制了人胚胎多能干细胞的基础和临床应用研究。要建立新的胚胎多能干细胞系应利用细胞核移植和细胞质重新编程功能建立新的途径 ,并探讨其中的机制和可能的关键因子 ;干细胞培养时主要进行简化培养体系和抑制细胞分化的研究 ;对干细胞分化进行临床应用研究时 。
- 刘善荣戚中田
- 关键词：胚胎多能干细胞
- 人胚胎生殖系细胞分离与体外培养的初步研究被引量：10
- 2003年
- 目的 :初步探讨人胚胎生殖系细胞的分离与体外培养。 方法 :体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织 ,按单纯机械分离、酶消化分离、二者结合法及是否有饲养层将组织分为 5种不同的方式培养后 ,用碱性磷酸酶标记 ,计数阳性克隆并进行比较。 结果 :酶消化法培养所获得的克隆较单纯机械分离方法多 ,原代培养时种植到饲养层上效果较好。将分离到的组织用0 .2 5 %胰酶消化 3min ,种植到丝裂霉素C处理过的小鼠胚胎成纤维细胞上培养 3d ,挑取克隆传代 ,在第 1 0天形成 30 .7个阳性克隆 ,显著高于其他方法获得的阳性克隆数。用碱性磷酸酶标记的细胞 (克隆 )具有多样性 ,细胞胞体为圆形 ,分为有突起和无突起两种 ;阳性细胞克隆呈圆球形、条带形和块形 ,与周围细胞分界清楚。 结论 :人胚胎体内的微环境限制生殖系细胞的体外扩增培养 。
- 刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏熊俊蒋正戚中田
- 关键词：胚胎细胞分离体外培养碱性磷酸酶
- 哺乳动物生殖细胞的形成、性分化和永生化被引量：1
- 2003年
- 小鼠原始生殖细胞产生于原肠胚形成阶段 ,迁移到生殖嵴位置后获得性别分化决定。体外培养时原始生殖细胞可大量增殖 ,现在已经建立了人类EG细胞株 ,这些永生的EG细胞具有正常的核型和多向分化能力 ,它可分化为某些特定的细胞类型 。
- 刘善荣胡凯猛刘厚奇戚中田
- 关键词：原始生殖细胞哺乳动物生殖细胞永生化
- Oct4调节胚胎干细胞全能性扩增的研究进展被引量：2
- 2003年
- Oct4是一种POU转录因子 ,属于Ⅴ类POU蛋白 ,在小鼠全能胚胎干细胞和生殖系干细胞表达。在早期鼠胚中 ,只有在ICM变成滋养层阶段 ,Oct4为维持其全能表型而发挥作用。Oct4表达可能是由位置效应引起的 ,还与特异调节Oct4活性的元件 ,如近端、远端增强子元件有关。Oct4对转录的调节分为抑制转录和转录激活两种。Oct4的激活有 3种模式 :远端依赖性共激活 ,构象依赖性共激活 。
- 刘善荣刘厚奇戚中田
- 关键词：OCT4胚胎干细胞
- 不同发育阶段人胚胎原始生殖细胞的定位及体外培养被引量：4
- 2003年
- 目的 :对不同发育阶段的人胚胎原始生殖细胞 (PGC)进行定位并比较其体外培养的差异。 方法 :取 4～ 7周发育阶段的人胚胎 ,应用组织化学法检测PGC内碱性磷酸酶 (AP)以对其定位。体外分离人胚胎生殖嵴和肠系膜组织进行培养 ,第 1次传代后 ,用AP标记 ,计数不同发育阶段AP阳性的PGC和体外培养的阳性克隆并进行比较。 结果 :在卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处有AP强阳性细胞 ,阳性信号位于胞质内。阳性细胞散在分布 ,在生殖嵴处聚集成团。不同发育阶段的胚胎组织培养均有阳性克隆出现。统计学分析结果表明 ,4～ 7周人胚胎内AP阳性的PGC数目及细胞内信号强度无明显差异(P >0 .0 5 ) ;由胚胎组织培养获得的AP阳性克隆数也无显著差异。 结论 :人PGC位于卵黄囊、原肠、背侧肠系膜和生殖嵴处。 4～ 7周发育阶段 。
- 刘善荣刘厚奇汤淑萍惠宁冀凯宏蒋正戚中田冯根生
- 关键词：胚胎原始生殖细胞体外培养碱性磷酸酶组织化学法
- TT型病毒基因组的克隆与进化分析
- 2001年
- 利用PCR方法从输血传播性病毒 (transfusiontransmittedvirus,TTV)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖TTV基因组的DNA片段。将PCR扩增片段克隆到pT Adv载体中 ,筛选获得阳性克隆。DNA序列测定结果表明所克隆的片段为TTV基因组序列。利用DNA片段中特有的限制性内切酶位点将TTV的DNA片段首尾相连 ,得到近全长的基因组克隆 ,命名为TTV0 2 1。对TTV0 2 1的核酸序列进行分析 ,TTV0 2 1长 3472nt,存在 2个阅读框架ORF1和ORF2 ,分别编码 785和 1 46个氨基酸。将TTV0 2 1与其它已知的TTV基因组全序列进行了同源性比较 ,并进行进化分析。结果表明 ,TTV0 2 1序列与TTV分离株CHN2、BDH1的遗传距离较近 ,而与其它分离株相对较远。
- 任浩董辉朱分禄缪晓辉王文戚中田
- 关键词：克隆同源性进化分析病毒基因组
- TTV基因组的克隆与进化分析
- 2001年
- 任浩董辉朱分禄缪晓辉王文戚中田
- 关键词：进化分析基因组染色体组TTV
