国家高技术研究发展计划(2008AA10Z423)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王战辉沈建忠孟辉温凯张素霞更多>>
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- 抗恩诺沙星噬菌体单链抗体库的构建及鉴定
- 2011年
- 本研究以兽药恩诺沙星为对象,构建噬菌体抗体库,为低成本、快速制备目的抗体提供新的途径。以恩诺沙星-鸡卵清蛋白(ENR-OVA)为免疫原对Balb/c小鼠进行免疫,取其脾细胞提取总RNA,并分别扩增全套抗体轻、重链基因,通过重叠延伸PCR技术,以编码柔性多肽(Gly3Ser)4的基因为接头,将轻重链基因组装为完整的scFv基因,将之克隆入pCANTAB5E载体,转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体M13KO7对其进行超感染,构建噬菌体抗体库并进行富集、筛选和鉴定;构建了库容量约为2.2×106的抗恩诺沙星噬菌体单链抗体库,并筛选出26株阳性克隆,为表达单链抗体、建立免疫检测方法奠定基础。
- 温凯沈建忠孟辉吴聪明王战辉张素霞
- 关键词：兽药恩诺沙星单链抗体噬菌体展示技术半抗原
- 抗庆大霉素噬菌体抗体库的构建和筛选被引量：2
- 2011年
- 本研究使用噬菌体抗体库技术筛选针对庆大霉素(gentamicin)的单链抗体。以抗庆大霉素杂交瘤细胞株(2A3)为基因来源构建scFv基因,连接至pCANTAB5E噬菌粒载体,通过电击转化TG1(Escherichia coli TG1)构建了库容量为6.5×106噬菌体单链抗体库。抗庆大霉素噬菌体单链抗体库进行三轮富集筛选,通过Phage-ELISA技术成功筛选出了9个抗庆大霉素噬菌体阳性克隆,为开发新型残留检测用抗体奠定了基础。
- 孟辉温凯沈建忠王战辉张素霞
- 关键词：庆大霉素噬菌体抗体库单链抗体
