河南省自然科学基金(511042700)
- 作品数：9 被引量：14H指数：3
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- 相关机构：郑州大学郑州大学第二附属医院河南省医学科学研究所更多>>
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- 重症肌无力患者胸腺组织CMTM8、CKLF1及相关趋化因子的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:比较重症肌无力(MG)患者与非自身免疫对照组胸腺组织CMTM8、CKLF1、相关趋化因子及受体的表达,为揭示MG胸腺异常及其发生机制提供理论依据。方法:用基因芯片筛选差异表达的趋化因子基因,采用RT-PCR和实时荧光定量PCR方法分别检测正常胸腺和MG胸腺中CMTM8 mRNA的表达,用免疫组织化学方法对CKLF1蛋白的表达和分布进行检测。结果:增生型MG胸腺组织中CMTM8 mRNA的表达明显高于正常人胸腺(2-△△Ct=8.3),差异有统计学意义;CKLF1蛋白在正常胸腺、MG胸腺中的均有广泛的表达,阳性细胞主要为胸腺基质细胞;CXCR6、CCL2、CCL8、CX3CL1、CXCL10和CCR1在MG患者胸腺表达水平显著低于对照组;CCL22、CCL3、CXCL12、CCR5、CCR7和CCR9基因在MG患者胸腺表达水平显著高于对照组。结论:CMTM8及多种趋化因子基因在增生型MG胸腺的表达明显高于对照组胸腺,可能在MG患者T细胞异常发育的某些阶段起重要作用。
- 李倩如杜英赵航高峰张清勇张钦宪
- 关键词：重症肌无力胸腺趋化因子
- 重症肌无力患者胸腺自身免疫相关基因表达的研究
- 2008年
- 目的探讨MG患者和正常对照者的胸腺组织炎症反应与自身免疫性疾病相关基因的表达情况。方法取MG患者(MG组)和正常对照者(对照组)的胸腺组织标本,提取总RNA,反转录合成cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与基因芯片进行杂交,通过化学发光法检测基因表达,比较两组胸腺组织基因表达的差异。结果MG组与对照组比较,有61条基因存在显著性差异,其中表达上调33条,下调28条,这些基因包括炎症相关趋化因子基因、细胞因子及其受体基因、与细胞因子产生与代谢有关的基因、细胞因子及其受体相互作用相关的基因、炎症反应相关基因以及体液免疫相关基因等。结论芯片筛选MG患者胸腺自身免疫相关基因表达与正常对照组存在显著差异。
- 赵航李倩如杜英
- 关键词：重症肌无力胸腺基因芯片基因表达
- CD74基因对重症肌无力患者胸腺上皮细胞IFN-γR基因表达的影响
- 2011年
- 目的:探讨CD74基因对重症肌无力患者胸腺上皮细胞(TEC)IFN-γR基因表达的影响。方法:原代培养重症肌无力患者胸腺上皮细胞,脂质体法转染pCMV-CD74,荧光定量RT-PCR法检测转染结果及TEC中IFN-γR等与自身免疫病相关基因mRNA水平的表达。结果:原代培养并传代的胸腺上皮细胞转染pCMV-CD74质粒后,CD74基因的表达显著提高。TEC高表达CD74基因,可引起HLA-A、ECFG1、IL-4R、IL-32和IFN-γR基因表达显著增加。结论:CD74基因对TEC表达IFNγR基因有明显的促进作用。
- 李倩如臧文巧高峰杜英张清勇
- 关键词：CD74胸腺上皮细胞
- MG患者胸腺移植BALB／c nu／nu裸鼠模型的建立及其功能研究被引量：3
- 2009年
- 目的:通过建立MG患者胸腺移植BALB/c裸鼠动物模型,探讨MG患者胸腺对脐血干细胞分化的影响。方法:将4mm3无菌切除的MG患者胸腺和非自身免疫病正常胸腺组织行BALB/c裸鼠左肾包膜下移植,2周后给BALB/c裸鼠静脉输入脐血单个核细胞。胸腺移植60天后通过免疫组化试验检测CD3分子的表达,利用流式细胞仪检测BALB/c裸鼠外周血中人源T细胞、B细胞、NK细胞、调节性T细胞数量。结果:胸腺移植60天,移植的胸腺组织在BALB/c裸鼠肾包膜下存活,组织结构清晰,免疫组化显示移植块中的胸腺细胞表达CD3分子;流式细胞分析显示CD3+、CD4+、CD19+、CD161+细胞以及CD3+CD56+、CD4+CD25+细胞百分率在MG胸腺、正常胸腺和脐血MNC联合移植组明显高于对照组,正常组CD3+、CD19+比例增加更明显,MG组CD4+细胞比例高于先心组。结论:胸腺组织块植入BALB/c裸鼠肾被膜下,能有效存活,并参与脐血细胞在体内的分化;移植的MG胸腺与正常胸腺在脐血细胞中的作用存在差异。MG患者胸腺、脐血干细胞联合移植建立的人胸腺-裸鼠动物模型可作为MG胸腺功能研究、免疫细胞分化成熟研究的工具。
- 李倩如杜英赵航高峰张清勇李国喜胡祥张钦宪
- 关键词：重症肌无力胸腺移植脐血CD3
- CD53和胸腺细胞亚群与重症肌无力胸腺异常关系的研究
- 2009年
- 目的:比较重症肌无力患者胸腺与正常胸腺中CD53与胸腺细胞亚群的差异,探讨重症肌无力患者胸腺异常增生的机制。方法:采用流式细胞术分析重症肌无力患者胸腺与正常胸腺(对照组)中胸腺细胞CD4、CD8、CD45RA、CD45RO的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测重症肌无力患者和对照组胸腺组织CD53mRNA的表达水平。结果:重症肌无力患者胸腺双阳性细胞(CD4+CD8+)、单阳性细胞(CD4+CD8-和CD4-CD8+)均高于对照组差异有统计学意义(P<0.01)。CD45RA分子表达明显低于对照组(P<0.01),CD45RO分子表达明显高于对照组(P<0.01)。荧光定量PCR发现CD53mRNA的相对表达量在重症肌无力患者胸腺组织中为(4.45±0.5),对照组为(5.58±3.140),与对照组相比较,重症肌无力患者胸腺组织中CD53mRNA的表达上调2.66倍。结论:CD53与重症肌无力患者胸腺细胞亚群异常分布有关,可能与重症肌无力胸腺异常及其发病机制有关。
- 李倩如李沛赵航杜英杨璇高峰张清勇
- 关键词：重症肌无力胸腺CD45RO
- 重症肌无力CD45RA、CD45RO胸腺细胞亚群及相关细胞因子表达分析被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨胸腺细胞异常分化与重症肌无力发生的关系。方法:采用基因芯片对多种白细胞介素、干扰素及其受体mRNA表达进行分析,采用流式细胞术测定胸腺细胞CD45RA、CD45RO的表达率,采用免疫组化对胸腺组织切片CD45RA、CD45RO表达及分布进行检测。结果:MG患者IL-1R、IL-4R、IFNγR1、IFNγR2、IL-6、IL-8表达水平显著低于对照组;IL-10RB表达水平显著高于对照组;IL-1、IL-2、IL-4、IL-10、IL-7、IFN-α、IFN-β、IFN-γ表达水平在MG和对照组均很低,无显著差异;MG患者CD56+胸腺细胞百分率(0.56±0.33)显著低于对照组(1.78±0.69),MG患者CD45RO+、CD1a+细胞显著高于对照组。免疫组化和RT-PCR也有相同结果。结论:MG患者胸腺细胞发育过程中CD45RO+细胞向CD45RA+T细胞转变存在异常。
- 李倩如杜英赵航高峰张清勇张钦宪
- 关键词：白细胞介素CD45RACD45RO重症肌无力胸腺
- 趋化因子及其受体在重症肌无力患者胸腺组织的异常表达被引量：4
- 2011年
- 本研究利用基因芯片方法筛选出MG患者和正常胸腺组织差异性表达的趋化因子,并采用趋化实验和流式细胞术观察MG患者胸腺组织提取液对胸腺细胞的趋化作用。基因芯片结果显示,有49种基因在MG患者和对照组胸腺组织表达量均低,有21种基因在MG和对照组胸腺呈显著表达;其中CCL3、CCL22、CCL25、CCR7、CCR9基因在MG患者胸腺表达显著高于对照组,CCL2、CX3CL1、CXCL10、CXCR6、IL-8基因在MG患者胸腺组织表达显著低于对照组。趋化实验显示,MG胸腺提取液对CD8和CD4单阳性细胞的趋化作用,与正常人胸腺提取液相比,已发生明显变化。提示MG患者胸腺组织中存在趋化因子及其受体的表达异常可能通过对不同胸腺细胞亚群的趋化作用影响胸腺细胞的分化发育。
- 苏艳宾李倩如高峰张清勇杜英
- 关键词：趋化因子趋化因子受体重症肌无力胸腺
- 人胸腺和脐血造血干/祖细胞联合移植对裸鼠T细胞免疫功能影响
- 2010年
- 目的:建立人胸腺和脐血造血干/祖细胞联合移植裸鼠动物模型,探讨胸腺对造血干细胞发育分化的机制。方法:实验组为人胸腺与脐血CD34+细胞联合移植,对照组只给予人脐血CD34+细胞移植,通过观察裸鼠移植胸腺CD3、HLA-DR的表达、人源CD3+细胞在小鼠脾脏的表达、裸鼠血液CD3+、CD4+、CD8+和CD4+CD25+细胞的百分比,以及联合移植裸鼠对移植肿瘤的排斥能力,判断联合移植对裸鼠免疫功能的影响。结果:移植胸腺在裸鼠肾被膜下存活,表达CD3和HLA-DR分子;裸鼠脾脏中检测到人源CD3+T细胞呈点块状分布;裸鼠血液中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+细胞均增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合移植组能抵抗肿瘤细胞的生长,单独脐血造血干/祖细胞移植组不能抑制肿瘤生长。结论:裸鼠移植人胸腺能促进人脐血造血干/祖细胞向T细胞分化、促进免疫功能重建。
- 蒋慧李倩如杜英张清勇李国喜胡祥
- 关键词：胸腺脐血裸鼠T细胞
- 人CK8&18阳性胸腺上皮细胞对脐血CD34^+细胞向T细胞分化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:通过CK8/18阳性胸腺上皮细胞与人脐血单个核细胞在Transwell板的共培养,探讨CK8/18阳性TEC对T细胞增殖分化的影响。方法:用胶原酶消化法分离纯化胸腺上皮细胞、免疫组化鉴定分离纯化的TEC,采用密度梯度离心法分离获得脐血单个核细胞,并采用免疫磁珠分选CD34+细胞,将TEC种植培养于Transwell双层培养板上层,使其均匀平铺于上层板底部,再将分选后的细胞加入上层小室,经过48小时的共培养,流式细胞术检测进入下室细胞的表型变化。结果:分离纯化的TEC经免疫组化鉴定CK8/18阳性。TEC与脐血单个核细胞共培养后,CD3+CD4-CD8-双阴性、CD3+CD4+CD8-单阳性细胞显著增加,CD3+CD4+CD8+双阳性细胞亚群细胞减少,CD8单阳性细胞增加不明显;CD45RA阳性细胞比率无显著变化,CD45RO阳性细胞比率显著增加。结论:CK8/18阳性TEC能选择促进脐血单个核细胞CD4+T细胞和CD45RO+细胞增殖。
- 李倩如杜焱苏艳宾杜英张清勇李国喜胡祥
- 关键词：胸腺上皮细胞脐血单个核细胞T细胞亚群
