国家社会公益研究专项计划(2005DIB4J041)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：柳纪省李志勇殷相平马友记李发弟更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家社会公益研究专项计划国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒全长可读框的表达及其产物免疫原性分析被引量：6
- 2007年
- 将亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)全长约为6.9kb的可读框(ORF)克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF.pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞,经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病毒Bm-ORF.免疫荧光技术证明,重组病毒能够正确表达插入的外源基因.将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫,双抗体夹心ELISA法和电子显微镜观察证明,目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳.用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛,免疫动物均产生了特异性抗体.免疫后21d进行病毒攻击保护实验,获得了2/4的完全保护.
- 李志勇易咏竹殷相平张志芳柳纪省
- 关键词：FMDVORF免疫原性疫苗
- A型口蹄疫病毒空衣壳抗原的表达及其产物免疫原性分析
- 将口蹄疫病毒A/WH株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C-与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞,...
- 李志勇易咏竹殷相平张韵刘明张志芳柳纪省
- 关键词：FMDV疫苗
- 文献传递
- 三株猪2型圆环病毒甘肃分离株的全基因组序列分析被引量：1
- 2007年
- 根据GenBank中发表的猪2型圆环病毒（PCV2）全基因组序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法对来自甘肃不同猪场的3份病料中的PCV2进行基因的扩增、克隆和测序,得到全基因组长度为1 768 bp的PCV2Ww株（登录号DQ322701）以及全基因组长度为1 767 bp的PCV2 LZ株和TS株（登录号DQ363860和DQ355153）.应用DNAstar软件序列分析可得,3个分离株全基因组与国内外参考毒株核苷酸序列同源性在94.8%~99.4%,3个分离株之间的核苷酸序列同源性为96.4%~99.4%;PCV2分离株与PCV1分离株核苷酸序列同源性为69.0%~70.0%;ORF1和ORF2所编码的氨基酸序列与国内外PCV2毒株比较,同源性也很高,分别为99.0%~99.4%和92.7%~98.7%.进化树分析表明,PCV2分离毒株在进化上存在地域上的相关性.
- 马友记柳纪省李志勇殷相平杨彬李发弟张利
- 关键词：猪2型圆环病毒基因组ORF2
- 杆状病毒/哺乳动物基因转移载体应用于活载体疫苗研究的进展
- 2010年
- 李志勇殷相平张韵李学瑞李宝玉柳纪省
- 关键词：基因转移载体活载体疫苗杆状病毒人兽共患传染病
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组腺病毒的构建及特性研究被引量：3
- 2008年
- 将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-GP5,经酶切充分暴露反向末端重复序列,再与脂质体混合转染AD-293细胞,成功获得了AD-GP5复制缺陷型腺病毒,经检测证实AD-GP5稳定性好,安全性高.转录水平检测证实,GP5蛋白基因得到了转录;荧光检测发现,外源蛋白已得到表达.
- 马友记赵兴绪黄连清李发弟程小磊柳纪省
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5重组腺病毒同源重组
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GS株非编码区分子克隆及其一二级结构的分析
- 2008年
- 参照GenBank中PRRSV VR-2332株全序列对非编码区(non-coding region,NCR)设计特异性引物,经过基因的扩增、连接、转化、筛选阳性克隆以及核苷酸测序.结果表明PRRSV GS株5′NCR长190 bp,与VR-2332和LV株核苷酸序列的同源性分别为93.2%和61.1%,紧接ORF1起始密码子上游有一个保守基序:5-′UUU-AACC-3′,其作用是连接5′前导序列与各亚基因组mRNAs;3′NCR长151 nt,其后有一个长14个碱基的poly(A)尾,通过序列比较分析,发现该区核苷酸序列较为保守,与VR-2332及LV 3'NCR的核苷酸同源性分别为95.4%和78.2%,在poly(A)尾巴的上游具有一个高度保守的8核酸序列:5-′CCGAAATT-3',在病毒的复制过程中,该保守基序可能起着重要作用.非编码区的二级结构分析发现其有复杂的二级结构.
- 马友记柳纪省张利
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒非编码区分子克隆
