河南省教育厅自然科学基金(200510472009)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 相关作者：宋向凤郭继强牛志国段长恩孙爱平更多>>
- 相关机构：新乡医学院新乡医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 17-β-雌二醇对人B淋巴细胞系IM-9细胞的调节作用被引量：4
- 2009年
- 目的：探讨17-β-雌二醇（17-β-estradiol,E2）在体外对人B淋巴细胞系IM-9细胞的调节作用。方法：MTT法检测IM-9细胞的增殖 RT-PCR检测IM-9细胞IgG及凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达 流式细胞术（FCM）检测IM-9细胞凋亡情况。结果：10-6~10-4mol/L浓度的E2对IM-9细胞增殖有明显的抑制作用,呈现剂量依赖性,并抑制IM-9细胞免疫球蛋白IgG的分泌,FCM显示E2诱导IM-9细胞凋亡,Bcl-2表达降低而Bax表达增强。结论：不同浓度的E2可通过调节Bcl-2、Bax基因表达及Bcl-2/Bax表达比调节B淋巴细胞增殖及其免疫球蛋白的分泌。
- 宋向凤牛治国郭继强黄青松
- 关键词：雌激素B淋巴细胞
- 兔抗人重组生长激素rhGH多克隆抗体的制备、纯化及鉴定
- 2010年
- 目的制备抗人生长激素(growth hormone,GH)的多克隆抗体并鉴定其性能。方法真核细胞表达质粒pcDNA3.0-GHcDNA免疫家兔,制备rhGH多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价。亲和层析法纯化后,进行Western blot、免疫组织化学和激光共聚焦显微镜检测,鉴定抗体的特异性与适用范围。结果得到兔抗人重组人生长激素rhGH多克隆抗体,效价达1:40000。纯化后的抗体可特异识别超表达的hGH和人内源性GH,可用于免疫组织化学实验、Western blot及激光共聚焦。结论用质粒免疫家兔制备的抗GH抗体具有较高的效价以及特异性,为hGH的功能性研究提供了有力的支持。
- 牛志国邓保国宋向凤王辉
- 关键词：重组人生长激素多克隆抗体
- 白藜芦醇对人外周血单核/巨噬细胞CCR5表达的影响
- 2008年
- 目的:观察白藜芦醇对人外周血单核/巨噬细胞CC型趋化因子受体5(CCR5)表达的调节作用。方法:采用F icoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,再经贴壁法纯化单核/巨噬细胞。采用IFN-γ(1×105U/L)诱导单核/巨噬细胞表达CCR5,再分别加入不同浓度的白藜芦醇(0.5,5,25,50和100μmol/L)进行干预。培养24 h后收集细胞,RT-PCR法检测外周血单核/巨噬细胞CCR5 mRNA表达水平;流式检测单核/巨噬细胞CCR5表达阳性率。同时将CCR5荧光素酶报告基因(pGL3-Basic-CCR5)转染各组细胞,检测各转染组的荧光素酶相对活性。结果:中、高浓度白藜芦醇处理组(25,50和100μmol/L)的CCR5 mRNA表达水平、CCR5阳性细胞率和CCR5-luc报告基因的荧光素酶相对活性比对照组均有所降低,低浓度白藜芦醇处理(0.5和5μmol/L)对单核/巨噬细胞CCR5的表达无明显影响。结论:中、高浓度白藜芦醇可抑制外周血单核/巨噬细胞CCR5的表达。
- 郭继强孙爱萍
- 关键词：白藜芦醇巨噬细胞移动抑制因子趋化因子受体
- γ-射线诱导Jurkat细胞凋亡过程中催乳素对Bcl-2及Bax表达的调节
- 2008年
- 背景:国内外文献表明,催乳素可通过调节细胞内凋亡相关蛋白的表达促进免疫细胞增殖并抑制细胞凋亡。目的:拟验证催乳素是否能通过调节T细胞Bax和Bcl-2的表达来影响Jurkat细胞凋亡。设计、时间及地点:以细胞为对象的对比观察实验,于2006-07/2007-05在新乡医学院免疫学实验室完成。材料:人白血病T细胞株Jurkat细胞为上海生工产品,人催乳素为sigma公司产品。方法:以10Gyγ-射线照射Jurkat细胞建立细胞凋亡模型。在射线照射前30min内,于模型中分别加入20μg/L,300μg/L和1000μg/L的人催乳素进行干预,同时设不含人催乳素的对照组,以及不进行辐射处理且不加催乳素的正常组。于辐射后的0,24,48h收集细胞。主要观察指标:以四甲基偶氮唑盐法检测Jurkat细胞的增殖情况;以流式技术检测细胞凋亡情况;以琼脂糖凝胶电泳检测Jurkat细胞凋亡DNA;以WesternBlot法检测Jurkat细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平。结果:①在γ-射线处理后24和48h,与对照组比较,300μg/L和1000μg/L催乳素组和正常组的细胞数量明显增多(P<0.01)。②在细胞经γ-射线处理后48h,与对照组比较,300μg/L和1000μg/L催乳素组和正常组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。③在γ-射线处理后的24和48h,与对照组比较,各质量浓度催乳素组Bcl-2/β-actin灰度比值均明显升高(P<0.01);300μg/L和1000μg/L催乳素组Bax/β-actin灰度比值明显降低(P<0.01)。结论:在γ-射线诱导的Jurkat细胞凋亡过程中,催乳素可通过提高Bcl-2的表达并下凋Bax的表达,来抑制Jurkat细胞凋亡。
- 郭继强杨萍宋向凤
- 关键词：催乳素JURKAT细胞细胞凋亡
- 催乳素对外周血T细胞巨噬细胞移动抑制因子表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:观察催乳素(PRL)对人外周血T细胞分泌巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitionfactor,MIF)的调节作用。方法:采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,再经尼龙棉柱过滤法纯化T细胞。采用植物凝集素(PHA,10μg/ml)和乙酸豆寇佛波酯(PMA,5μg/ml)刺激T细胞活化,再分别加入不同浓度的催乳素(20,300,1 000 ng/ml)进行干预。细胞培养24 h后收集细胞,RT-PCR法检测外周血T细胞MIF基因表达水平;ELISA法检测T细胞培养液上清中的MIF含量。同时将MIF荧光素酶报告基因(pGl3-Basic-MIF)转染各组T细胞,检测各转染组的荧光素酶相对活性。结果:各催乳素处理组的MIF基因的表达水平、细胞培养上清的MIF浓度和MIF-lucr报告基因的荧光素酶相对活性比对照组显著增高。结论:催乳素可增强外周血T细胞表达和分泌巨噬细胞移动抑制因子。
- 郭继强宋向凤牛志国
- 关键词：催乳素T细胞巨噬细胞移动抑制因子报告基因
- 17-β雌二醇对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、一氧化氮产生和诱导型一氧化氮合酶表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的研究17-β雌二醇(E2)在体外对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、一氧化氮(NO)生成及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法取小鼠腹腔巨噬细胞,Griess反应检测不同浓度E2对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成时间和剂量依赖性影响,中性红吞噬试验检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测iNOSmRNA的表达。结果低浓度E2组(10-9mol.L-1、10-8mol.L-1、10-7mol.L-1)巨噬细胞吞噬能力、NO产生及iNOS表达从4 h开始均较对照组增高(P<0.05),其中10-7mol.L-1E2作用最为明显;高浓度E2组(10-6mol.L-1、10-5mol.L-1)巨噬细胞吞噬能力、NO产生及iNOS表达则有明显的降低(P<0.05),且浓度越高降低越明显。结论E2对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能、NO产生及iNOS表达有显著的调节作用,且呈现剂量相关性。
- 孙爱平王芳段长恩宋向凤
- 关键词：一氧化氮巨噬细胞小鼠
