国家自然科学基金(30671061) 作品数:69 被引量:227 H指数:9 相关作者: 韩榕 陈慧泽 王小花 李晓阳 高丽美 更多>> 相关机构: 山西师范大学 晋中学院 南京师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山西省自然科学基金 山西省青年科技研究基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 环境科学与工程 理学 更多>>
适合流式细胞仪分析的小麦细胞核提取方法比较 被引量:7 2012年 为制备供流式细胞仪分析的高纯度小麦细胞核悬液,以冬小麦"临优2018"为材料,分别采用酶解法和直接剪切法对其幼苗的细胞核进行提取,对所得到的细胞核在形态结构和数量等方面进行了分析和比较,根据其优缺点优化出最适合流式细胞仪分析的小麦幼苗细胞核的提取方法。结果显示:在直接剪切法所用的3种细胞核提取缓冲液中,MgSO4缓冲液的提取效果最好,细胞核形态及内部结构完整,且得到的细胞核量多;OttoⅠ对细胞核的提取效果显著,但是在加入OttoⅡ后细胞核破裂明显;Tris.MgCl2缓冲液提取的细胞核数量较少;酶解法制备的细胞核悬浮液中杂质较多,且需时较长。结果表明采用MgSO4提取缓冲液的直接剪切法是适合流式细胞仪对小麦幼苗DNA含量的分析。 孙永星 李素花 魏小丽 韩榕关键词:小麦 流式细胞术 酶解法 Effects of Exogenous Nitric Oxide on Membrane Lipid Peroxidation in Wheat Seeding Exposed to Enhanced Ultraviolet-B Radiation 被引量:7 2010年 [Objective] Effects of different concentrations of nitric oxide on membrane lipid peroxidation of wheat induced by enhanced UV-B radiation were researched,sodium nitroprusside (SNP) was selected as an exogenous nitric oxide(NO)donor.[Method] There are 3 groups including CK,UV treatment group (B),B+SNP treatment group,0,1,2,3,4 d sampling after treatment respectively,and physiological and biochemical indexes of MDA content and CAT,POD,SOD and so on were determined,repeated 3 times,and statistical analyzed.[Result] The results showed that,after the enhanced UV-B radiation,activity of the catalase (CAT),superoxide dismutase (SOD) and of the guaiacol peroxidase (POD) all reduced apparently,and the concentration of malondialdehyde (MDA) increased obviously,leading to oxidative damage in wheat seedlings.Impose different concentrations of SNP after UV-B radiation,may mitigate oxidative damage of wheat seedling from different degrees,which was in agreement with the effect of making the concentration of MDA decrease and the activity of the CAT,SOD and POD all increased.The mitigation role of 0.01 mol/L SNP was more obvious for roots' oxidative damage,while 0.1 mmol/L SNP is more effective for oxidative damage of leaves.[Conclusion] Exogenous NO donor SNP had obvious relieve effects on oxidative damage of wheat seedlings caused by UV-B radiation,which can enhance adaptive capacity of plants to adversity stress. 高宇霞 韩榕关键词:WHEAT 不同时间的UV-B辐射对拟南芥幼苗生长的影响 被引量:16 2015年 以哥伦比亚野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)为实验材料,用辐射功率为16.67μW·cm–2但不同时间(0.5、1、1.5、2、2.5和3小时)的UV-B辐射对拟南芥幼苗进行处理,观察叶片形态,并测定其根长、叶绿素含量、可溶性蛋白含量、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及叶绿素荧光参数。结果显示,短时间UV-B辐射可促进拟南芥根的伸长,叶绿素和可溶性蛋白含量升高;长时间UV-B辐射则抑制拟南芥根的生长,使叶绿素含量、可溶性蛋白含量、叶绿素荧光参数Fv/Fm及q P逐渐降低,MDA浓度、SOD活性、CAT活性和q N值升高,并随着时间的延长逐渐降低或升高。当辐射功率为16.67μW·cm–2时,其最佳辐射时间为1.5小时。UV-B辐射作为一种环境胁迫,其胁迫程度都是在一定的范围内,当胁迫达到极限时,植株都会对UV-B辐射产生一定的适应效应而使损伤降低。 韩雯 韩榕关键词:拟南芥 UV-B辐射 幼苗生长 He-Ne激光和增强UV-B辐射对小麦幼苗类囊体捕光色素的影响 被引量:3 2010年 采用5mW.mm-2He-Ne激光辐照、10.08kJ.m-2d-1UV-B辐射及二者组合对冬小麦幼苗进行处理。通过测定叶绿体捕光色素含量和色素蛋白组成的变化,进一步探讨He-Ne激光对增强UV-B辐射后小麦幼苗类囊体捕光色素损伤的修复效应。循环处理小麦幼苗4d,利用90%乙醇和80%丙酮分别提取各处理组小麦幼苗叶片中的叶绿素,通过纸层析和分光光度法检测捕光色素含量的变化,并探讨不同处理对叶绿素与蛋白质结合牢固性的影响。利用柱层析法测定色素蛋白的主要成分。研究表明:与对照组相比,增强UV-B辐照后小麦幼苗捕光色素总含量降低了17.76%,叶绿素和蛋白质结合牢固度显著降低,色素蛋白的组成也发生变化,D1和D2蛋白质条带消失;而一定剂量He-Ne激光辐照可使增强UV-B辐射后的叶绿体色素含量增加约10.64%,但仍低于ck组约8.12%,叶绿素和蛋白质结合牢固度也显著高于B组,色素蛋白的组成与对照组相似。因此,低剂量的He-Ne激光辐照对增强UV-B辐射后小麦幼苗类囊体捕光色素的损伤具有促进修复效应。 高丽美 李永锋 韩榕关键词:HE-NE激光 UV-B辐射 小麦 He-Ne激光对增强UV-B辐射后小麦叶片蛋白及核酸影响的研究 被引量:2 2010年 采用He-Ne激光辐照对增强UV-B辐射后小麦幼苗的损伤修复作用进行了研究.小麦种子在盛有湿滤纸的培养皿内25℃下进行萌发.萌发后小麦幼苗在经10.08kJ·m-·2d-1的增强UV-B辐射,然后再用10mW·mm-2的He-Ne激光进行辐照.通过测定小麦幼苗叶片中可溶性蛋白、核酸含量以及相关酶活性的变化,研究了He-Ne激光对小麦UV-B损伤的修复作用.结果显示,可溶性蛋白、核酸含量、硝酸还原酶含量及活性的变化同小麦幼苗损伤修复的能力相关联.增强UV-B辐射抑制小麦生长,降低小麦生物量和小麦叶片可溶性蛋白及核酸含量.小麦叶片蛋白水解酶活性上升、硝酸还原酶活性下降、叶片总游离氨基酸含量增加.通过He-Ne激光辐照,可溶性蛋白及核酸含量提高,蛋白水解酶活性增高程度有所缓解,而硝酸还原酶活性降低的程度有所上升. 马晓丽 冀瑞萍 韩榕关键词:增强UV-B辐射 HE-NE激光 小麦 可溶性蛋白 核酸 硝酸还原酶 增强UV-B辐射对小麦根尖分裂期细胞肌动蛋白的影响 被引量:4 2011年 以增强UV-B(10.08kJ·m-2·d-1)辐射后的小麦根尖细胞为材料,异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-Ph)为探针,利用激光共聚焦扫描显微镜,观察分析小麦根尖分裂期细胞肌动蛋白在分裂周期的分布及形态变化。结果表明:UV-B辐射处理后,间期细胞肌动蛋白纤丝排列紊乱;前期细胞周质中肌动蛋白纤丝变为短的片段,点状荧光随机分布在周质;中期细胞荧光强度明显减弱,明亮的肌动蛋白片段消失,点状荧光消失;有丝分裂后期到末期,成膜体区域肌动蛋白纤丝或成弥散状或完全消失,且出现落后染色体、染色体桥、不均等分裂及三束分裂等染色体畸变类型和异常分裂现象。 陈慧泽 翟菁如 杜美婷 韩榕关键词:增强UV-B 小麦 肌动蛋白 激光共聚焦扫描显微镜 外源NO对UV-B胁迫下小麦幼苗生长、活性氧组分和光合特性的影响 被引量:7 2013年 为了研究外源NO对UV-B胁迫下小麦幼苗生长、活性氧组分以及光合特性的影响,以ML7113小麦为受试材料,以硝普钠(Sodium nitroprusside,SNP)作为外源NO的供体,预先用0.1mmol/L的SNP浸种24h,设置4个处理组:对照组(CK)、紫外线UV-B胁迫处理组(B)、UV-B胁迫和SNP复合处理组(B+SNP)、SNP单独处理组。待幼苗生长7天后取其叶片进行可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、超氧阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)、气孔密度、光合色素及叶绿素荧光参数等指标的测定。结果表明,NO供体SNP能显著增加经UV-B胁迫后小麦幼苗的株高,并使其小麦幼苗可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸含量分别提高19.69%、15.25%、41.36%,同时使其小麦叶正面气孔密度增大10.34%。SNP单独处理使得光合色素(叶绿素和类胡萝卜素)的含量较CK分别提高12.43%和5.99%,叶绿素荧光参数Fv/Fm和Fv/F0较CK显著提高0.5%和5.16%。此外,SNP能使小麦幼苗丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)的含量较CK显著降低27.30%和74.92%,超氧阴离子(O2-)的产生速率较CK显著降低24.47%。通过体内相关生理指标物质含量的变化来响应UV-B胁迫对小麦幼苗造成的伤害,而适宜浓度的外源NO(0.1mmol/L)可以缓解UV-B胁迫下对小麦幼苗的伤害作用,从而增强小麦幼苗对UV-B胁迫的适应能力。 刘福霞 帖海龙 高丽丽 韩榕关键词:一氧化氮 UV-B胁迫 小麦 活性氧组分 光合特性 增强UV-B辐射对小麦叶肉细胞原生质体微丝骨架的影响 被引量:2 2010年 以增强UV-B(10.08 kJ/m2.d)辐射后的小麦幼苗叶肉细胞原生质体为材料,异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-Ph)为探针,利用激光共聚焦扫描显微镜,观察分析小麦叶肉细胞原生质体中微丝骨架的分布及形态变化。结果表明对照组中,叶肉细胞原生质体微丝呈现网状或平行状随机排列,形态上表现为纤维状结构。增强UV-B辐射处理后,原生质体中微丝的密集分布遭到破坏,纤丝状微丝消失,聚集成束,或呈点状、碎片状分布。 翟菁如 陈慧泽 高丽美 李永峰 韩榕关键词:增强UV-B 小麦 微丝 激光共聚焦扫描显微镜 增强UV-B辐照对小麦幼苗叶肉细胞内Ca^(2+)水平的研究 2011年 以小麦(Triticum aestivum)幼苗叶片为材料,利用提取原生质体方法在小麦幼苗叶肉细胞中成功地装载了钙离子荧光指示剂fluo-3/AM,采用激光共聚焦显微技术检测了增强UV-B辐射后小麦幼苗叶肉细胞内游离钙离子荧光强度的分布,并对[Ca2+]i进行了测定。结果显示,对照组细胞内钙离子荧光分布较均匀,主要分布于紧贴质膜处和核周围,UV-B辐射组钙离子荧光与对照组分布相似,但其原生质体表面不如对照组平滑;同时发现增强UV-B辐射组细胞内钙离子荧光强度值较对照组高,说明增强UV-B辐射组小麦幼苗叶肉细胞维持较高浓度的钙离子水平。这些变化表明Ca2+信号有可能以一定的方式参与了小麦响应UV-B辐射胁迫的过程。 王亚妮 高丽美 李永锋 韩榕关键词:小麦 UV-B辐射 CA2+ He-Ne激光和增强UV-B辐射对小麦幼叶叶绿素荧光和Rubisco活化酶的影响 被引量:6 2013年 选用小麦‘ML7113’品种为材料,人工模拟He-Ne激光(5mJ·s-1·mm-2)、增强UV-B(10.8kJ·m-2·d-1)辐射及两者复合辐照进行处理,利用叶绿素荧光仪、考马斯亮蓝G-250染色法和PCR技术研究7d龄小麦幼苗叶绿素荧光特性、Rubisco活化酶含量、基因表达量及其基因序列的变化。结果表明:(1)与对照组相比,增强UV-B辐射后,小麦幼苗叶绿素荧光特性减弱,Rubisco活化酶含量及其基因表达量均下降;而低剂量的He-Ne激光辐照后能够在一定程度上修复经UV-B辐射后对小麦幼苗叶绿素荧光特性所造成的损伤,且使Rubisco活化酶含量及其基因表达量上升。(2)与对照组相比,经He-Ne激光和增强UV-B辐射以及两者复合辐照处理后基因序列均出现两个相同的点突变,但并未造成氨基酸序列的变化。研究认为,低剂量He-Ne激光辐照能够在一定程度上修复受UV-B辐射小麦幼苗叶绿素荧光活性、Rubisco活化酶含量及其基因表达量的降低;He-Ne激光和增强UV-B辐射对小麦幼苗Rubisco活化酶活性的影响可能发生在其转录水平,从而使小麦光合能力发生相应的变化。 常阿丽 毛晓芳 韩榕关键词:小麦 HE-NE激光 叶绿素荧光 RUBISCO活化酶