国家自然科学基金(30801420)
- 作品数:6 被引量:8H指数:2
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- 硫酸雌酮对染料木素及其Ⅱ相结合物在乳腺细胞中代谢的影响
- 2013年
- 目的研究硫酸雌酮对染料木素及其Ⅱ相结合物在乳腺细胞中代谢的影响。方法以人乳腺癌细胞系T47D和非癌乳腺细胞系MCF-10A为研究对象,采用体外孵化模型,将硫酸雌酮(estrone-3-sulfate,E1S)分别与染料木素(genistein,GEN)及染料木素-4'-硫酸结合物(genistein-4'-sulfate,G-4'-S)、染料木素-7-硫酸结合物(genistein-7-sulfate,G-7-S)、染料木素-4'-葡萄糖醛酸结合物(genistein-4'-glucuronide,G-4'-G)和染料木素-7-葡萄糖醛酸结合物(genistein-7-glucuronide,G-7-G)4个染料木素Ⅱ相结合物共同孵化24 h后,收集孵化液,采用LC-MS/MS法定量测定孵化液中相应代谢产物的浓度。结果在T47D和MCF-10A细胞中,E1S可明显抑制GEN转化为G-7-S和G-4'-S;E1S还可明显抑制G-7-G的生物转化。此外,E1S可促进MCF-10A细胞中G-4'-S转化为G-7-S。E1S对T47D和MCF-10A细胞中G-4'-G和G-7-S的代谢无显著性影响。结论 E1S影响GEN、G-7-G和G-4'-S在乳腺细胞中的代谢,对G-4'-G和G-7-S的代谢无明显作用。
- 刘延凤许丽金艺索昊李佳阳徐海燕
- 关键词:染料木素药物代谢
- LC-MS/MS法同时测定细胞孵化液中硫酸雌酮、染料木素及其主要代谢物的含量被引量:1
- 2012年
- 目的建立同时测定硫酸雌酮与染料木素的细胞孵化液中硫酸雌酮、染料木素及它们主要代谢物含量的LC-MS/MS法,并用该法研究硫酸雌酮与染料木素在人乳腺细胞中的代谢相互作用。方法细胞孵化样品经处理后,采用Diamonsil C18柱分离,流动相为乙腈和5 mmol.L-1醋酸铵(pH7.8),梯度洗脱,以大豆苷元为内标。采用电喷雾电离(ESI)源,以多反应监测(MRM)方式进行检测,用于定量分析雌酮(estrone,E1)、雌二醇(estradiol,E2),硫酸雌酮(estrone-3-sulfate,E1S)、硫酸雌二醇(estradiol-3-sulfate,E2S)、β-D-葡萄糖醛酸雌酮(estrone-3-glucuronide,E1G)、β-D-葡萄糖醛酸雌二醇(estradiol-3-glucuronide,E2G)、染料木素(genistein,GEN)、染料木素-4'-硫酸结合物(genistein-4'-sulfate,G-4'-S)、染料木素-7-硫酸结合物(genistein-7-sulfate,G-7-S)、染料木素-4'-葡萄糖醛酸结合物(genistein-4'-glucuronide,G-4'-G)和染料木素-7-葡萄糖醛酸结合物(genistein-7-glucu-ronide,G-7-G)。结果该方法中E1、E1S、E2S、G-4'-S、G-7-G的线性为2.45~5 000.00 nmol.L-1,E2的线性为9.80~5 000.00 nmol.L-1,E1G的线性为0.25~500.00 nmol.L-1,E2G的线性为0.98~500.00 nmol.L-1,GEN的线性为19.50~10 000.00 nmol.L-1,G-7-S的线性为2.45~1250.00 nmol.L-1;日内和日间精密度均不大于6.7%,相对误差在±12.5%以内。在人乳腺细胞模型中,GEN促进E1S的代谢,而E1S抑制GEN代谢。结论该法适用于细胞孵化液中硫酸雌酮、染料木素及它们主要代谢物的同时测定,并成功应用于人乳腺细胞中硫酸雌酮与染料木素代谢相互作用的研究。
- 许丽袁波金艺甄慧娟赵怀清徐海燕
- 关键词:雌激素染料木素LC-MS/MS药物相互作用
- UPLC法测定大豆制品及相关制剂中大豆异黄酮含量被引量:5
- 2013年
- 目的:建立同时测定大豆制品及相关制剂中4种大豆异黄酮类化合物大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素含量的超高效液相色谱法。方法:色谱柱:Acquity UPLC BEH C18柱(50mm×2.1mm,1.7 m),流动相:A为体积分数0.2%甲酸溶液,B为乙腈,梯度洗脱;流速:0.4mL/min;检测波长:254nm,柱温:30℃。结果:线性范围:大豆苷0.625~40.0mg/L(r=1.000),染料木苷0.625~40.0mg/L(r=0.9999),大豆苷元0.04~2.56mg/L(r=0.9997),染料木素0.04~2.56mg/L(r=0.9996)。大豆和Natrol soy isoflavones中大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素平均回收率为98.5%~99.8%。结论:本方法简便、快速、灵敏、准确,适用于大豆制品及相关制剂中大豆异黄酮含量测定。
- 袁波甄慧娟姜璇孙帅婷许丽徐海燕
- 关键词:超高效液相色谱法大豆制品大豆异黄酮
- 染料木素单硫酸酯的合成及其对乳腺癌细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的合成染料木素单硫酸酯,并且考察其对乳腺癌MCF-7细胞增生的影响。方法以染料木素为原料,与苯甲酰氯生成染料木素-7-苯甲酸酯,再与氯磺酸反应生成染料木素-4′-硫酸酯;以染料木素与己酰氯反应生成染料木素-4′-己酸酯,再与氯磺酸反应生成染料木素-7-硫酸酯。结果与结论采用基团保护策略合成染料木素单硫酸酯,其结构经1H-NMR和MS确证,MTT检测表明染料木素单硫酸酯对MCF-7细胞的增殖有抑制作用。
- 万英凤许佑君袁波王玲兰林禄清徐海燕
- 关键词:大豆异黄酮MCF-7细胞
- 染料木素在乳腺癌MCF-7细胞内的代谢研究被引量:2
- 2010年
- 目的研究染料木素在乳腺癌细胞中的代谢行为。方法将10μmol.L-1染料木素与乳腺癌MCF-7细胞在37℃下孵化一定时间后终止反应。采用UPLC-MS-MS法测定孵化液中染料木素及II相代谢产物的浓度。结果染料木素在乳腺癌MCF-7细胞中可迅速代谢为7或4′-葡萄糖醛酸结合物以及7或4′-硫酸结合物。孵化24、48和72 h后,每100μg孵化样品蛋白中,7-葡萄糖醛酸结合物的生成率分别为2.9、5.2和8.9μg.h-1,4′-葡萄糖醛酸结合物的生成率分别为1.1、1.9和3.0μg.h-1,7-硫酸结合物的生成率分别为20.3、32.9和47.3μg.h-1,4′-硫酸结合物的生成率分别为1.7、3.1和4.5μg.h-1。结论染料木素在乳腺癌MCF-7细胞中的主要代谢产物是7-硫酸结合物。
- 万英凤王玲兰许佑君林禄清袁波徐海燕
- 关键词:染料木素药物代谢乳腺肿瘤细胞
- LC/MS/MS法同时测定细胞孵化液中6种雌激素类化合物的含量被引量:1
- 2011年
- 目的建立同时测定细胞孵化液中6种雌激素类化合物含量的LC/MS/MS法,并用该法研究E1S在乳腺癌细胞中的代谢行为。方法细胞孵化样品经处理后,采用Diamonsil C18柱分离,流动相为乙腈和5 mmol.L-1醋酸铵(pH 7.8),梯度洗脱,采用电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)源,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 269.3→m/z 145.2(雌酮,estrone,E1),m/z 271.1→m/z 145.2(雌二醇,estradiol,E2),m/z349.2→m/z 269.2(硫酸雌酮e,strone-3-sulfate,E1S),m/z 351.1→m/z 271.3(硫酸雌二醇,estradiol-3sulfate,E2S),m/z 445.5→m/z 269.3(β-D-葡萄糖醛酸雌酮,estrone-3-glucuronide,E1G),m/z 447.4→m/z 271.0(葡萄糖醛酸雌二醇,estradiol-3-glucuronide,E2G)和m/z 253.4→m/z 223.0(大豆苷元,内标)。结果该方法中E1、E2、E1S、E2S的线性分别为9.8~5 000.0 nmol.L-1,E1G、E2G的线性为0.98~500.00 nmol.L-1;日内和日间精密度均小于10.8%,相对误差在±11.7%以内。结论该法适用于细胞孵化液中6种雌激素类化合物的同时测定。
- 王玲兰
- 关键词:LC/MS/MS药物代谢乳腺肿瘤细胞