国家高技术研究发展计划(2007AA09Z412)
- 作品数:7 被引量:27H指数:3
- 相关作者:严小军陈海敏郑燕玲秦松李富超更多>>
- 相关机构:宁波大学中国科学院中国药科大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 海绵放线菌Z0604的最优发酵条件选择及初步鉴定被引量:4
- 2008年
- 从东海的一种海绵Hymeniacidon corticata分离出的1株放线菌Z0604,利用7种发酵培养基2种pH条件下培养后提取粗提物,检测其对人类病原菌及植物病原真菌的抑菌拮抗作用以及对卤虫的毒性作用,结合TLC化学初筛及发酵过程生物量的变化,从中筛选出最佳发酵培养条件为pH8.0下的M2+培养基发酵4~5d。并对该菌的生理生化特征及在各种培养基上的生长特性进行了研究。
- 韦荣编闫斌伦李富超秦松
- 关键词:海绵发酵培养基优化
- 海洋活性物质Fascaplysin及衍生物的化学合成与构效关系研究进展被引量:2
- 2008年
- 海洋活性物质Fascaplysin是从海绵中发现的一种具有抑制肿瘤细胞增殖的吲哚生物碱类化合物。对细胞周期蛋白依赖性激酶CDKs尤其是CDK4/D1具有特异性抑制,同时Fascaplysin因其平面芳香稠环结构对DNA有嵌入作用,能够改变DNA的构象从而阻止DNA的复制。本文主要阐述Fascaplysin与CDKs作用的机制,以及Fascaplysin的毒副作用,进而探讨副作用小的Fascaplysin衍生物的合成方向。
- 何云松严小军梁洪泽
- 关键词:细胞周期蛋白依赖性激酶衍生物
- Fascaplysin通过诱导细胞凋亡抑制HeLa细胞体外增殖被引量:9
- 2009年
- 观察fascaplysin对人宫颈癌HeLa细胞体外增殖的抑制作用及其分子机制。MTT法显示fascaplysin对HeLa细胞体外增殖有显著的抑制作用,其IC50为1.79μmol·L-1;流式细胞周期检测显示,fascaplysin未能诱导HeLa细胞发生G1期阻滞,但出现浓度依赖性的sub-G1期峰;Annexin V/PI染色证实fascaplysin能诱导HeLa细胞发生凋亡,且以早期凋亡为主;Western blotting分析显示,fascaplysin能下调CDK4和cyclin D1的蛋白表达,并引起CDK4/cyclinD1特异性pRb位点Ser795的蛋白磷酸化水平下降;caspase-3、-9活性检测以及Western blotting结果证明,fascaplysin能显著增加活性caspase-3、-9的水平,下调pro-caspase-8的蛋白表达,使Bid表达减少,促进胞浆中细胞色素c释放增多,同时还能下调Bcl-2的蛋白表达。研究结果表明,fascaplysin虽然抑制了CDK4/cyclin D1复合物的活性,但并未能使HeLa细胞阻滞于G1期。该化合物对HeLa细胞体外增殖的抑制作用是通过剂量依赖性地诱导细胞凋亡实现的,其机制可能与激活caspase-8前体的活性,Bid切割为tBid数量的增加,抑凋亡因子Bcl-2表达的下调,胞浆中细胞色素c含量的增多,以及活性caspase-3、-9水平的增加有关。
- 卢晓玲郑燕玲陈海敏严小军王峰徐炜烽
- 关键词:CDK4线粒体
- 微小卡罗藻(Karlodinium micrum)共附生微生物抗菌与细胞毒活性被引量:3
- 2010年
- 【目的】本文对微小卡罗藻共附生微生物进行分离并对其抗菌和细胞毒活性进行初步研究,以期望获得既具有抗菌又具有细胞毒的高活性菌株,为从共附生微生物的角度去研究微小卡罗藻毒素的合成途径以及真正来源提供研究材料。【方法】利用琼脂扩散法和MTT法对细菌培养液的乙酸乙酯提取物进行抗菌和细胞毒活性筛选,并对具有细胞毒活性的细菌菌株进行了16S rRNA系统发生学分析。【结果】在分离到的38株海洋细菌中,25株细菌具有抗菌活性,5株细菌(W-14-2、W-2-2、W-12、E-8-2和W-4)具有细胞毒活性。对这5株具有细胞毒活性的细菌菌株进行16S rRNA系统发生学分析显示它们分别与Alteromonas alvinellae、Stappia aggregata、Pelagibaca bermudensis、Marinobacter kribbensis和Maribacter dokdonensis的16S rRNA基因序列具有较高的相似性。【结论】在分离到的微小卡罗藻共附生微生物中含有较为丰富的活性菌株,且获得5株具有抗菌活性又具有细胞毒的高活性菌株。
- 朱鹏游玉容褚椒江金海晓严小军
- 关键词:抗菌活性细胞毒活性RRNA
- 海洋活性生物碱fascaplysin对肝癌细胞BeL-7402代谢物的影响被引量:1
- 2010年
- 目的考察海洋生物活性碱fascaplysin对肝癌细胞Bel-7402代谢物的影响。方法利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱,采用电喷雾电离源分别在正负离子模式下,对通过fascaplysin处理4、12和24 h的Bel-7402的乙腈提取物进行分析,并通过SIMCA-P软件进行主成分分析和正交偏最小二乘法辨别分析。结果12 h后fascaplysin处理组能够与对照组在PCA得分图上完全区分开,24 h后两组处理则显著分开。分析fascaplysin作用Bel-7402细胞后的潜在代谢标志物,发现主要为磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、鞘磷脂、脂肪酰胺、植物鞘氨醇、二氢神经鞘氨醇、二甲基鞘氨醇、N-Palmitoyl Taurine和N-oleoylTaurine。结论鞘磷脂的下调以及磷脂酰胆碱、植物鞘氨醇、二氢神经鞘氨醇、二甲基鞘氨醇的上调表明胞内鞘磷脂途径被激活可能是fascaplysin引起细胞凋亡的一种作用机制。
- 郑燕玲严小军徐继林金海晓陈娟娟
- 关键词:BEL-7402
- 不同聚合度的卡拉胶降解物对人结肠上皮细胞的影响被引量:5
- 2009年
- 目的:探讨结构因素对卡拉胶降解物安全性的影响。方法:以结肠上皮细胞(Caco-2)为研究对象,通过MTT法检测3种类型的卡拉胶(κ,ι和λ型)在3种聚合度范围内的细胞毒,并通过测定活性氧、NO、TNF-α、IL-8的变化来观察样品对细胞的致炎能力。结果:硫酸基团含量最低的κ-卡拉胶降解物具有最强的细胞毒,而硫酸基团含量最高的λ-卡拉胶细胞毒性最弱。其中κ-卡拉胶低聚物在质量浓度高于200μg/mL时的存活率低于30%,并且这种细胞毒与活性氧的爆发呈明显相关性。同时,κ-卡拉胶低聚物具有最强的促进炎症因子分泌的能力,NO、TNF-α、IL-8都出现了明显的增高。另外,聚合度也是影响卡拉胶细胞毒性和促炎性因子分泌的关键,聚合度越低,毒性越高,炎症因子的分泌量越大。结论:低聚卡拉胶,特别是κ-型卡拉胶能够通过活性氧的爆发造成结肠上皮细胞损伤,并引起大量炎症因子产生。该机制可能会导致卡拉胶低聚物损伤结肠组织,引发结肠溃疡。
- 陈海敏严小军王峰宓婷艳徐炜烽
- 关键词:结肠上皮细胞细胞毒炎症
- 海洋真菌Aspergillus sp.中的抗肿瘤成分被引量:3
- 2008年
- 目的:研究一株分离自条斑紫菜丝状体上的真菌代谢产物的活性成分。方法:利用电镜观察真菌形态特征,利用MEA培养基进行大规模发酵,经硅胶层析、葡聚糖凝胶层析等各种层析手段分离化合物,通过波谱技术鉴定化合物结构,并利用MTT法测定化合物抗肿瘤活性。结果:该菌属于曲霉属,分离得到了两个化合物1和2,分别为cyclo(L-Trp-L-Phe)(1)和WIN64821(2)。MTT法测试结果表明,cyclo(L-Trp-L-Phe)和WIN64821对37株人体肿瘤细胞株具有中等细胞毒活性,其平均IC50分别为3.3和5.8μg·mL-1。结论:第一次报道这两种化合物的抗肿瘤活性。
- 丁玲李富超秦梅秦松KELTER GerhardFIEBIG Heinz HLAATSCH Hartmut