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广西巴马小型猪白细胞抗原经典Ⅱ类基因克隆及生物信息学分析被引量：5: 2012年; 为探讨广西巴马小型猪SLA经典Ⅱ类基因分子结构特征及其在猪-人异种器官移植研究中的应用前景,本研究采集4头广西巴马小型猪的耳组织,经抽提RNA和反转录得到cDNA,通过PCR扩增,对SLA经典Ⅱ类基因(SLA-DRA、SLA-DRB1、SLA-DQA、SLA-DQB1)纯化和克隆,进行双向测序。结果,在4个SLA经典Ⅱ类座位中得到基因序列共8条,利用NCBI服务器中BLAST分析发现,8条基因序列中5条为已知的等位基因,另3条为新的等位基因。通过核苷酸和氨基酸水平的同源性比对,构建亲缘进化树,分析发现,广西巴马小型猪具有与人同源性较高的MHC遗传结构,显示该猪种在人-猪异种移植领域中有着潜在的利用价值。; 刘子展王在贵李奎郭亚芬王爱德张玉琼杨述林; 关键词：主要组织相容性复合体异种移植小型猪

猪胰岛素启动子序列分析及调控基因在胰腺组织特异性表达验证: 2013年; 通过对不同中国地方猪品种胰岛素基因启动子序列差异分析,可为转基因调控我国小型猪胰腺β细胞功能研究和糖尿病模型制备提供依据。本研究利用PCR从通城猪、广西巴马小型猪和五指山小型猪3个品种猪基因组DNA中扩增猪胰岛素启动子全长,经比对分析获得具有地方猪品种特征的序列,在小鼠胰腺瘤细胞和转基因鼠中验证该序列调控目的基因表达的有效性和特异性。3个地方猪品种间1.5kb长的胰岛素启动子序列无碱基差异,与国外猪品种仅有3个碱基差异;双荧光素酶报告基因检测系统证明该启动子能在胰腺瘤细胞高效启动下游基因表达;转CHOP和UCP2基因小鼠中,2个目的基因在胰腺组织中表达量显著高于肝脏、背肌和肾脏,且胰腺组织中蛋白丰度显著增加。本研究结果表明,从中国地方猪品种中分离的胰岛素启动子能够特异性调控目的基因在胰腺组织中表达,为转基因调控猪β细胞功能的动物模型建立奠定了基础。; 胡炳俊王超群阮进学辛磊磊牟玉莲杨述林李奎; 关键词：地方猪品种转基因鼠胰腺

猪11β-HSD1真核过表达载体的构建及其在Hepa1-6细胞中的表达被引量：1: 2012年; 11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)可使无生物活性的皮质酮催化为有活性的皮质醇,本试验利用长白猪肝脏组织提取的RNA反转录出11β-HSD1基因的cDNA,通过反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和DNA重组技术,将11β-HSD1基因构建到pcDNA3.1真核表达载体上,构建了11β-HSD1-pcDNA重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳和测序分析的方法对重组的质粒进行了鉴定,并将其转染了Hepa1-6细胞,通过RT-PCR检测了其过表达强度。试验结果表明,成功构建了猪11β-HSD1-pcDNA真核过表达载体,为转基因动物的研究奠定了基础。; 夏吉瀚王超群阮进学杨述林李奎; 关键词：真核表达基因克隆转基因

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国家重点基础研究发展计划(2011CBA01005)