中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2009C039)
- 作品数:6 被引量:60H指数:4
- 相关作者:杨吉霞陈芝兰陈宗道赵国华蒋厚阳更多>>
- 相关机构:西南大学重庆市农产品加工技术重点实验室西藏大学更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 随机扩增多态性法分析西藏牦牛奶酪中乳酸菌的遗传多样性被引量:2
- 2014年
- 目的:利用随机扩增多态性(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)法对西藏地区牦牛奶酪中27株乳酸菌基因型进行同源性分析。方法:利用5个随机引物对Mg2+浓度、d NTP用量、退火温度、模版用量/引物用量(ng/pmol)4个条件做单因素梯度试验,建立最佳反应条件,筛选最佳引物,然后对27株乳酸菌和4株乳酸菌标准菌株进行随机扩增,用NTsys 2.10e软件对扩增条带进行聚类和遗传相似性系数分析,分析结果与16S r RNA测序得到的菌种鉴定结果进行对比。结果:31株菌遗传相似系数在0.72~1.00之间,当相似性系数在0.82时,菌株被分成了8组,菌株按照不同种属聚类,聚类结果同16S r RNA测序结果基本一致,同时成功将Lactobacillus casei和Lactobacillus paracasei两个亚种区分开。结论:RAPD技术可以较好地应用于西藏地区牦牛奶酪中乳酸菌亲缘性关系分析。
- 蒋厚阳赵国华杨吉霞
- 关键词:乳酸菌随机扩增多态性聚类分析
- 牦牛奶酪中产细菌素乳酸菌菌株的筛选被引量:6
- 2015年
- 本研究用分离自西藏、新疆、云南地区牦牛奶酪的39株乳酸菌作为供试菌株,制备细菌素粗提液,用琼脂井法分析粗提液对9株致病菌(蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、费氏柠檬酸杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、阴沟肠杆菌、产气荚膜梭菌、宋内志贺菌)和2株非致病菌(无害李斯特菌、嗜热链球菌)指示菌株的抑菌作用。测定结果表明有30株菌的细菌素粗提液对指示菌株有抑菌作用,筛选出Y13、X29和X30这3株抑菌谱较宽的细菌素产生菌。
- 杨吉霞贺稚非陈宗道
- 关键词:乳酸菌细菌素致病菌
- 牦牛奶酪中乳酸菌的随机扩增多态性研究被引量:1
- 2013年
- 目的:探讨随机扩增多态性(RAPD)技术在牦牛奶酪中乳酸菌基因型研究方面的应用价值。方法:采用M13引物,对退火温度、Mg2+浓度、引物用量、Taq酶用量、模板量进行单因素梯度试验,建立最佳反应条件,然后对分离自牦牛奶酪的39株乳酸菌进行扩增,用NTsys 2.10e软件分析扩增图谱,计算遗传相似系数,进行聚类分析,并与16S rRNA测序得到的菌种鉴定结果进行对比。结果:39株乳酸菌相互间的遗传相似系数在0.47~0.98之间,当相似系数为0.78时,菌株被分成10个组,除X23、Y36和Y37之外,其余菌株均按照不同的菌种聚类,与16S rRNA测序结果基本一致,聚类有较强的地域相关性。结论:RAPD技术可用于牦牛奶酪中乳酸菌的基因型研究,可用于菌种鉴定和遗传亲缘关系分析。
- 杨吉霞陈芝兰杨海燕黄艾祥陈宗道
- 关键词:乳酸菌随机扩增多态性聚类分析基因型鉴定遗传相似系数
- PCR-DGGE法分析西藏传统发酵乳制品中乳酸菌的多样性被引量:20
- 2014年
- 目的:运用聚合酶链式反应和变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denatured gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术分析西藏传统发酵乳制品中乳酸菌的生物多样性。方法:从西藏8个牧区采集19份样品,提取样品总DNA,用巢式和降落PCR扩增16S rRNA的V3区段,对扩增产物做变性梯度凝胶电泳,用NTsys 2.10e软件分析条带的相似性,切胶回收条带并测序,鉴定菌种并构建系统进化树、分析优势菌种。结果:19份样品中的乳酸菌菌群组成包括Lactobacillus paracasei、Lactobacillus helveticus、Lactobacillus fermentum、Lactobacillus crispatus、Lactobacillus delbrueckii、Lactobacillus buchneri、Lactococcus raffinolactis、Leuconostoc mesenteroide、Lactobacillus plantarum、Pediococcus pentosaceus、Lactococcus lactis、Streptococcus thermophilus。综合样品和牧区的乳酸菌分布情况,确定Lactobacillus delbrueckii为优势菌种。结论:PCR-DGGE技术能够有效分析西藏地区发酵乳制品中乳酸菌的多样性。
- 蒋厚阳陈芝兰赵国华杨吉霞
- 关键词:乳酸菌系统进化树优势菌种
- 16S rDNA序列分析法快速鉴定西藏地区传统乳制品中的乳酸菌被引量:20
- 2013年
- 对14株乳酸菌进行菌种鉴定。提取基因组DNA,采用属特异性聚合酶链式反应(PCR)、16S rDNA序列同源性分析、种特异性PCR与NEBcutter分析相结合的方法对乳酸菌进行鉴定。结果表明,14株菌中,除123-2和23-3外,其余12株菌均属于乳杆菌属;11-2、13-3、14-3、16-4、23-3、24-3、26-1、122-1、123-4为干酪乳杆菌或副干酪乳杆菌,17-5、20-2、28-1属于植物乳杆菌,123-2为肠膜状明串株菌,125-2为类布氏乳杆菌,除23-3外均与属特异性PCR结果相匹配;11-2、13-3、14-3、16-4、23-3、24-3、26-1、122-1、123-4均为副干酪乳杆菌。NEBcutter分析结果进一步验证了菌株划分的准确性。该方法快速可靠,且误差较小。
- 夏雪娟陈芝兰陈宗道阚建全杨吉霞
- 关键词:乳酸菌
- 牦牛奶酪中乳酸菌的分离鉴定及发酵性能分析被引量:14
- 2013年
- 为了探讨牦牛奶酪中乳酸菌菌种的多样性和发酵性能,从西藏、云南、新疆采集了17个样品,用MRS培养基菌落计数平均值为(4.08±0.60)(lg(CFU/g)),pH值平均值为4.52±0.29,采用表型和基因型相结合的方法鉴定出39株乳酸菌,其中乳杆菌35株为L.buchneri 2株、L.casei 16株、L.diolivorans 3株、L.fermentum 3株、L.helveticus 3株、L.kefiri 3株和L.plantarum 5株,片球菌4株为P.acidilactici 1株、P.pentosaceus 3株。通过对39株菌产酸活性、利用柠檬酸盐、产蛋白酶和胞外多糖活性等发酵性能分析,筛选出产酸活性强的菌株X24、X38、X29、X25、X21、X22、X30、X35,而菌株T7同时能利用柠檬酸盐、产蛋白酶和胞外多糖,都具有优良的发酵性能。说明牦牛奶酪中乳酸菌菌种具有多样性,有发酵性能优良的菌株。
- 杨吉霞陈芝兰杨海燕黄艾祥陈宗道贺稚非
- 关键词:乳酸菌菌种鉴定发酵性能