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“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09503-005)

作品数:2 被引量:0H指数:0
相关作者:尚广东任杰杨圣勇马超朱宇鹏更多>>
相关机构:南京师范大学更多>>
发文基金:“重大新药创制”科技重大专项更多>>
相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇化学工程
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 1篇单胞菌
  • 1篇异源
  • 1篇异源表达
  • 1篇同源
  • 1篇同源重组
  • 1篇链霉菌
  • 1篇链霉素
  • 1篇基因
  • 1篇基因工程
  • 1篇假单胞菌
  • 1篇RPSL基因

机构

  • 2篇南京师范大学

作者

  • 2篇尚广东
  • 1篇朱宇鹏
  • 1篇马超
  • 1篇杨圣勇
  • 1篇任杰

传媒

  • 2篇中国抗生素杂...

年份

  • 1篇2011
  • 1篇2010
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
产2S-甲基丙二酰辅酶A的基因工程假单胞菌的构建
2011年
目的假单胞菌是次级代谢产物生物异源表达的优良宿主菌,然而它缺少许多次级代谢产物生物合成所需的小分子前体2S-甲基丙二酸辅酶A(2S-mm-CoA),因此构建产生2S-mm-CoA的宿主菌将有利于次级代谢产物的异源表达。方法本研究将来源于大肠埃希菌的编码甲基丙二酰辅酶A变位酶的sbm基因和编码甲基丙二酰辅酶A变位酶复合物保护蛋白的argK基因以及来源于天蓝色链霉菌的编码甲基丙二酰辅酶A异构酶的epi基因通过同源重组整合到恶臭假单胞菌KT2440(Pseudomonas putida KT2440)基因组,得到基因工程菌株P.putida LS-MCM。结果气质联用(GC/MS)分析表明P.putida LS-MCM能产生达2.22nmol/mL的2S-mm-CoA。结论 P.putida LS-MCM可作为异源表达需要2S-mm-CoA作为前体单元的次级代谢产物的宿主菌。
杨圣勇任杰尚广东
关键词:假单胞菌同源重组异源表达
构建链霉菌小型基因文库的新型正选择克隆载体
2010年
目的构建链霉菌小型基因文库是获得链霉菌基因的一个重要手段,常规使用的克隆载体常有着一定程度的假阳性,因此构建的高效率的克隆载体有着实际的意义。方法本研究通过重叠延伸PCR手段将一个96bp的多克隆位点序列插入至rpsL基因的启动子和开放阅读框之间,将此DNA片段克隆至pBluescript KS(-)而获得了新型的正选择克隆载体pLS975。结果 pLS975有18个酶切位点可用于外源DNA片段的克隆,重组克隆以氨苄青霉素抗性和链霉素抗性进行筛选,宿主菌为链霉素抗性菌株如Escherichia coli DH10B。两个小型基因文库的制备显示pLS975具有很高的克隆效率(96%~100%)。结论 pLS975可成为构建链霉菌小型基因文库的良好载体。
马超朱宇鹏尚广东
关键词:链霉菌RPSL基因链霉素
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