国家自然科学基金(U1204319)
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
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- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
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- 瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：5
- 2013年
- 以被瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)侵染的甜瓜叶片为供试材料,采用RT-PCR方法克隆其P22蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3上,PCR验证及克隆测序确定开放阅读框的正确性。将重组载体pGexp22转化大肠杆菌BL21菌株,诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,p22基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白作为抗原,免疫家兔,制备了CCYV P22的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,血清效价高达1.28×105。Western blot检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22蛋白。
- 施艳王振跃袁媛刘珊珊孙虎古勤生
- 关键词：甜瓜P22原核表达抗血清
