国家自然科学基金(U1204301) 作品数:23 被引量:258 H指数:10 相关作者: 赵龙飞 徐亚军 常佳丽 彭顶华 赖心河 更多>> 相关机构: 商丘师范学院 清华大学 温州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目 河南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
两株内生芽孢杆菌对盐胁迫下大豆幼苗超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性影响 被引量:14 2022年 【背景】盐胁迫环境严重影响大豆幼苗生长,内生菌可提高作物的抗逆性。【目的】探究接种内生枯草芽孢杆菌127和解蛋白芽孢杆菌133对盐胁迫下大豆幼苗体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化物酶(peroxidase,POD)活性的影响。【方法】以“徐豆20”为实验材料,采用盆栽实验法,设置对照组、盐胁迫组和盐胁迫接菌组,在人工气候培养条件下,用不同NaCl浓度(50、100、150、200、250和300 mmol/L)处理大豆幼苗,并接种不同OD600值(OD 0.33、OD0.50和OD0.75)的菌悬液。【结果】培养14 d,接种枯草芽孢杆菌127的菌悬液OD0.33和OD0.75分别在盐浓度300 mmol/L和100 mmol/L时,SOD活性均为1.04 U/g-FW;接种解蛋白芽孢杆菌133的菌悬液OD0.50在盐浓度300 mmol/L胁迫下POD活性最高为7820 U/(g·min),对大豆幼苗修复效果较显著。培养28 d,接种枯草芽孢杆菌127的菌悬液OD0.50,在150 mmol/L时SOD活性最高(0.88 U/g-FW);接种解蛋白芽孢杆菌133的菌悬液OD0.50在100 mmol/L盐胁迫下,POD活性最高[8300 U/(g·min)],对大豆幼苗修复效果最显著。【结论】内生枯草芽孢杆菌127和解蛋白芽孢杆菌133发挥作用的最适盐浓度不同,盐胁迫下接种内生菌可使大豆幼苗体内SOD和POD活性不同程度变化,表明接种内生枯草芽孢杆菌127和解蛋白芽孢杆菌133均可提高大豆幼苗的耐盐性,对盐胁迫环境的大豆幼苗具有修复作用。 赵龙飞 徐亚军 邵璇 杨静雅关键词:大豆幼苗 盐胁迫 超氧化物歧化酶 过氧化物酶 烟草赤星病菌拮抗性大豆根瘤内生菌的筛选及抑制作用 被引量:10 2016年 以烟草赤星病菌为供试病原菌,采用对峙法、代谢液培养法对分离自大豆根瘤的内生细菌进行抑菌筛选,对筛选菌株作用的病原菌菌丝进行显微观察,研究筛选菌株细胞培养特征及生理生化特性、16S r DNA测序序列、系统发育,以及进行温室接种防病试验.结果表明:大豆根瘤内生菌经初筛、复筛,对烟草赤星病菌抑菌率42%以上的有7株菌,分别属于芽孢杆菌属、假单胞菌属、中华根瘤菌属和寡养单胞菌属.显微观察表明,在拮抗性内生菌作用下病原菌菌丝末端出现明显畸形,呈珊瑚状分枝、球状膨大等;代谢液试验表明,内生菌对病原菌的抑制作用主要是内生菌代谢产生的胞外物质在发挥作用;对峙试验表明,芽孢杆菌可迅速形成生物薄膜,有效阻碍病原菌丝生长和延伸.盆栽防病试验表明,拮抗性内生菌处理下烟草病情指数显著低于对照,表明筛选菌株可作为烟草赤星病的生防菌株资源. 赵龙飞 徐亚军 侯怡婷 邹艳慧 李亚楠 杨志华 李小雨 张梦瑶关键词:烟草赤星病菌 根瘤内生菌 系统发育 枸骨益生菌的筛选及其抑菌作用 被引量:10 2015年 采用涂布平板法分离药用植物枸骨可培养内生细菌,采用对峙法和发酵滤液培养法筛选对植物病原菌具高抑制作用的菌株,通过镜检和显微摄影观察处理组菌丝的变化,对16S r DNA PCR产物进行测序和同源性分析菌株的系统发育关系,通过形态、生理生化特征和16S r DNA序列比对确定菌株的分类地位.从枸骨健康植株的根、茎、叶及果实中分离得到85株内生细菌,筛选出对烟草赤星病菌、稻瘟病菌、棉花枯萎病菌等有较强抑菌作用的10株菌,初步鉴定为4属7种.其中,抑菌效果最强的GG78(60.3%)、GG31(48.1%)、GG3(61.0%)分别属于阴沟肠杆菌、路德维希肠杆菌和蜡样芽孢杆菌.受抑制病原菌菌丝均发生畸形、扭曲,局部膨大形成原生质浓缩球、菌丝基部出现毛发状细分支等现象,可能与内生菌分泌到胞外具有一定抑菌或杀菌作用的代谢物质如抗生素、水解酶类、生物碱等有关. 赵龙飞 徐亚军 赖心河 寇田超 闫俊利 周佩佩 范闪闪 闫永峰关键词:内生细菌 抑菌作用 代谢产物 内生细菌252和254对盐胁迫下小麦幼苗过氧化物酶和过氧化氢酶活性的影响 被引量:16 2017年 以‘周麦18’为试验材料,采用盆栽法设置盐胁迫、盐胁迫下接菌和对照3组处理,研究不同盐浓度胁迫下接种内生菌对小麦幼苗生长的影响.结果表明:内生菌252、254分别与死亡谷芽孢杆菌和根癌土壤杆菌具有最高相似率.盐胁迫下接种内生细菌252,在14 d时小麦幼苗随盐浓度升高过氧化物酶(POD)活性先升高后下降,其中盐浓度为100 mmol·L^(-1)时POD活性最高(13370 U·g^(-1)·min^(-1));21 d时小麦幼苗POD和过氧化氢酶(CAT)活性较对照明显升高;28 d时盐浓度为150、250 mmol·L^(-1)的POD和CAT活性最高.盐胁迫下接种内生细菌254,在14 d时盐浓度为250 mmol·L^(-1)的小麦幼苗CAT活性最高;21 d时盐浓度在100~250 mmol·L^(-1)的POD和CAT活性较高,其中150 mmol·L^(-1)时CAT活性最高;28 d时盐浓度为200 mmol·L^(-1)的CAT活性最高.在盐胁迫下,接种内生菌对小麦幼苗不同培养时期发挥最佳作用的盐浓度不同.内生菌252和254可提高盐胁迫下小麦植株POD、CAT活性,对小麦幼苗生长有一定修复作用. 赵龙飞 徐亚军 赖心河 常佳丽 欧启凡 孟嘉琦 彭顶华关键词:RDNA序列 小麦幼苗 盐胁迫 过氧化物酶 过氧化氢酶 大豆根瘤内生菌全细胞可溶性蛋白SDS-PAGE电泳图谱分析 被引量:8 2019年 以大豆根瘤内生细菌为试验材料,分别采用单次点样、重复点样、不同上样量对其进行全细胞可溶性蛋白质十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)图谱分析,根据标准蛋白质各条带相对迁移率估算待测蛋白质亚基的分子量范围,结合16S rDNA测序结果区分大豆根瘤内生菌间亲缘关系,便于后续研究。结果表明:单次点样,不同菌株间蛋白质条带有差异,说明彼此间亲缘关系不同。经16S rDNA序列分析,菌株44最相似属种为Bacillus horikoshii、菌株52最相似属种为Sinorhizobium fredii、菌株70最相似属种为Ochrobactrum intermed;重复点样,菌株7与53的蛋白质图谱相同,经16S rDNA测序分析,两者最相似属种均为Bacillus subtilis,且最相似菌株均为HRA69,说明两者属于同一种内生菌。菌株123与125蛋白质图谱相近,经16S rDNA测序比对,两者最相似属种均为Bacillus cereus;电泳结果显示,对同一菌株不同上样量不影响蛋白质图谱,16S rDNA测序结果表明同一菌株最相似属种始终不变,即不影响亲缘关系。 徐亚军 李珂 刘珂珂 袁圆圆 孙笑颜 赵龙飞关键词:RDNA序列 生物学教学信息化及课程整合下创新能力培养的实践探讨 被引量:2 2016年 为了培养综合素质高的生物学创新人才,以适应社会需求、服务地方区域经济,笔者结合本科高校在转型发展过程中的教学改革实践,着重从师资队伍及业务素质、课程整合、学生协调发展培养模式、教学信息多元化的分析和利用、产学研合作教育新途径等方面进行实践探索。结果表明:实践探索培养模式改善了教学效果,逐步提升了学生创新能力。 赵龙飞 徐亚军关键词:信息多元化 课程整合 师资队伍 产学研合作 重金属抗性大豆根瘤内生菌的筛选及生物学特性 2015年 对努鲁尔虎山脉北麓内蒙古敖汉旗段和河南商丘地区采集大豆[Glycine max(L.)Merr]根瘤进行内生菌的分离纯化,对获得的74株菌株分别进行重金属(Pb2+、Cu2+、Cr6+、Hg2+)抗性测定,对筛选菌株进行生物学特征研究。结果筛选出4株抗性较强的优良菌株,即SQLD42、SQLD47、SQLD67和SQLD71。对重金属的抗性大小表现为:Pb2+(5 mmol/L)>Cu2+(1.6 mmol/L)>Cr6+(1.2 mmol/L)>Hg2+(0.075 mmol/L)。筛选的4株菌均来源于努鲁尔山北麓的内蒙古敖汉旗段,其抗逆性与宿主植物大豆的生长环境密切相关。 赵龙飞关键词:根瘤内生菌 重金属抗性 生物学特性 大豆根瘤内抗棉花枯萎病菌株的筛选及其防病试验 被引量:9 2017年 【目的】采用优良抗病性内生菌资源来控制棉花枯萎病是一种有效的措施。本研究从大豆根瘤中筛选棉花枯萎病拮抗性内生细菌,探索其对棉花枯萎病菌丝的抑制作用和代表菌株特性,为发掘和应用防病、抗逆优良菌株提供理论基础。【方法】采用对峙法和代谢液培养法对大豆根瘤内生细菌进行棉花枯萎病菌抑菌性筛选,显微观察法研究筛选菌株引起病原菌菌丝变化,通过菌株培养特征、理化特性和16S r DNA序列同源性分析确定菌株系统发育地位,比色法测定DD174耐盐碱性,盆栽试验验证防病效果。【结果】经复筛和代谢液试验有5株拮抗性较强菌株,被作用病原菌菌丝畸形、细胞壁消失、自溶,菌丝基部加粗、分支增多,呈树根状;菌丝被菌苔包埋而溶解、断裂,菌丝末端球形膨大。对棉花枯萎病菌的抑制作用主要通过菌体产生胞外代谢物发挥作用。菌株DD174、DD176和DD179最相似菌株分别为Bacillus oceanisediminis H2T(GQ292772)和B.thuringiensis ATCC 10792T(AF290545),菌株DD165和DD166最相似菌株均为Stenotrophomonas maltophilia LMG 958T(X95923)。DD174能耐受6%盐浓度,p H 10生长良好,具有一定耐盐碱能力。DD174处理组防治效果达76.32%,其他防效均在62%以上,可作为棉花枯萎病的生防菌株资源。【结论】大豆根瘤内存在棉花枯萎病内生拮抗细菌,其中有些菌株具有一定耐盐碱能力,对棉花枯萎病病原菌及病害有一定抑菌和防病作用。 赵龙飞 徐亚军 常佳丽 李全芬 杨静雅 欧启凡 杨梦冉关键词:棉花枯萎病菌 根瘤内生菌 拮抗性 系统发育分析 溶磷性大豆根瘤内生菌的筛选、抗性及系统发育和促生 被引量:51 2015年 对采自河南省不同地区的大豆根瘤进行内生菌分离纯化、溶磷性筛选试验。根据能否产生溶磷圈及溶磷圈直径(D)、菌落直径(d)和D/d值大小确定菌株溶磷能力,采用钼锑抗比色法测定培养液中有效磷含量;平板筛选法对筛选菌株进行耐盐性、耐酸碱、重金属等抗性测定,并对筛选菌株进行理化特性、16S r DNA、rec A序列和系统发育分析。结果表明,从分离纯化的324株内生菌中筛选出36株具有溶磷特性,其中20株有较强溶磷性。菌株DD291发酵液中可溶性磷含量最高(452 mg/L),发酵液p H与对照相比均有不同程度下降,最大降幅达2.92。大部分溶磷性内生菌具有较强耐盐碱性,对Pb2+、Cr6+和Cu2+有较高耐受性,对Ni2+和Hg2+抗性较弱。结合细胞形态、生理生化、16S r DNA、rec A序列和系统发育分析结果,菌株确定为Bacillus cereus,Enterobacter cancerogenus,E.cloacae和Pseudomonas putida。部分溶磷菌株对大豆的生长有促进作用,显示出潜在的应用前景。 赵龙飞 徐亚军 曹冬建 李源 厉静杰 吕佳萌 朱自亿 秦珊珊 贺学礼关键词:大豆 根瘤内生菌 抗性 系统发育分析 我国大豆根瘤内生菌资源多样性研究 被引量:8 2014年 植物内生菌已成为植物微生态系统中的重要组成部分,根瘤内生菌和根瘤菌普遍共存于特殊的根瘤生境。比较了根瘤内生菌和根瘤菌与宿主间关系存在的区别,对大豆根瘤内生菌的种类、宿主和适应性、生物固氮、促进植物生长、增强宿主抗逆、抗病能力以及联合修复环境污染等功能多样性进行论述,指出大豆根瘤内生菌研究的发展方向,对进一步促进植物生长、发展可持续农业具有重要意义。 赵龙飞关键词:大豆 根瘤 内生菌 根瘤菌 多样性