国家自然科学基金(30770950)
- 作品数：12 被引量：31H指数：3
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- 高迁移率族蛋白B1在高氧致支气管肺发育不良的表达被引量：1
- 2010年
- 目的检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在高浓度氧(60%O2)暴露新生小鼠肺组织损伤模型中的表达水平,探讨HMGB1在支气管肺发育不良(BPD)发病机制中的作用。方法新生足月C57BL/6小鼠随机分为BPD组和对照组,制备高氧浓度致新生鼠BPD模型,应用苏木精-伊红染色、Masson染色、放射性肺泡计数(RAC)、免疫荧光和实时荧光定量PCR技术,观察氧暴露后3d、7d、14d肺组织病理改变及HMGB1的蛋白和mRNA表达水平。结果BPD组在氧暴露后随时间推移,出现肺泡上皮肿胀,肺泡壁增厚,间质水肿,炎症细胞浸润,胶原样物质产生,肺泡结构紊乱,数量减少,较空白对照组明显发育迟滞。在氧暴露后7d、14d,HMGB1及其mRNA表达均强于对照组(P<0.05)。结论高氧暴露所致BPD中,HMGB1表达增加。BPD的病理过程可能与HMGB1表达增加有关。
- 冯洁邓春余加林郭春宝赵倩倩
- 关键词：高氧支气管肺发育不良高迁移率族蛋白B1新生小鼠
- 罗伊氏乳杆菌对坏死性小肠结肠炎氧化应激的保护机制被引量：6
- 2019年
- 目的探讨罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)DSM17938菌株对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生小鼠模型氧化应激的保护作用及可能机制。方法将96只10日龄C57BL/6J新生小鼠随机分为3组(n=32):对照组、NEC组、NEC+L.reuteri组。通过HE染色观察回盲部肠组织病理变化并行双盲病理评分。采用实时荧光定量PCR检测肠组织中TNF-α、IL-1β的基因表达水平。通过ELISA检测肠组织TNF-α、IL-1β的蛋白表达水平。采用比色法检测SOD活力及抑制率、MDA、GSH、GSSG、GSSG/GSH比值。结果与对照组相比,NEC组小鼠体质量下降(P<0.05),肠道损伤加重,病理评分增加(P<0.05),TNF-α、IL-1β在基因及蛋白水平均表达升高(P<0.05),SOD活力及抑制率、GSH降低,MDA、GSSG、GSSG/GSH比值显著升高(P<0.05)。与NEC组相比,NEC+L.reuteri组病理评分降低,TNF-α、IL-1β在基因及蛋白水平均表达降低(P<0.05),SOD活力及抑制率、GSH增加,MDA、GSSG、GSSG/GSH比值明显降低(P<0.05),两组生存率差异无统计学意义(P>0.05)。结论L.reuteri DSM17938可能通过减少肠道氧化应激、增加其抗氧化能力,从而减轻肠道炎症反应,发挥对NEC新生小鼠肠道保护作用。
- 唐佳郭春宝龚放
- 关键词：坏死性小肠结肠炎炎症因子氧化应激
- 突变Myc基因骨髓特异性转基因小鼠肿瘤模型的建立及鉴定
- 2010年
- 目的 研究通过外源Myc基因转染造血细胞,实现骨髓特异性转基因并形成淋巴瘤的潜能.方法 造血细胞转染野生型与突变型Myc基因.移植入经（60）Coγ射线照射的C57BL/6小鼠,观察小鼠形成肿瘤时间以及小鼠自然死亡时间,免疫组织化学染色法检测肿瘤类型;流式细胞术检测外源Myc基因在小鼠骨髓MNC中的表达;骨髓造血细胞、肝、脾、肿瘤组织行Myc免疫印迹法检测Myc在体内的表达情况.结果 Mye基因转基因后形成B细胞淋巴瘤,流式细胞术检测发现外源Myc基因可在造血细胞表达,突变型Myc基因阳性率高于野生型Myc基因,Myc基因转染骨髓造血细胞后,骨髓、肿瘤组织有较高表达,肝、肾组织则无表达.结论 外源Myc基因特异转染造血细胞可形成组织特异性转基因;突变型Myc基冈致瘤性高于野生型Myc基因.
- 郭春宝金先庆张明满蒲从伦李英存康权
- 关键词：基因MYC淋巴瘤小鼠转基因骨髓移植
- 肝母细胞瘤患儿及其母亲孕期特点回顾性分析被引量：1
- 2009年
- 目的探讨肝母细胞瘤发生的危险因素，包括婴儿出生以及孕产妇分娩相关的特征。方法采用病例对照研究设计，收集肝母细胞瘤患儿及其母亲的病历资料，用Logistic回归模型对婴儿出生特征指标、母亲怀孕与分娩有关指标进行多因素统计检验。结果发生肝母细胞瘤风险中低出生体质量儿的比值比为26．0（95％可信区问为14．0～65．7）。母亲≤20岁和≥30岁的比值比分别为1．5（95％可信区间为0．6～4．6）和2．6（95％可信区间为1．0～6．7）。超重和肥胖母亲的比值比为3．2（95％可信区间为1．0～6．7）。孕妇吸烟的比值比为2．9（95%可信区间为1．1～4．2），对〉2岁及出生体质量正常儿童影响较大。结论肝母细胞瘤的发生与患儿出生体质量及孕妇超重、吸烟等因素有关，应重视围产期卫生保健。
- 蒲从伦郭春宝金先庆邓春张明满李英存康权
- 关键词：肝肿瘤孕妇肝母细胞瘤
- 不同浓度TGF-β1对肺泡II型细胞系MLE-12表型及功能的影响
- 2014年
- 探讨不同浓度及不同时间点TGF-β1对肺泡II型上皮细胞(AECII)表型及功能的影响。小鼠肺泡II型细胞系MLE-12,随机分为:对照组(0 ng/mL)、低浓度组(0.1 ng/mL)、中浓度组(1 ng/mL)和高浓度组(10 ng/mL)。应用细胞免疫荧光双标法及荧光定量PCR法观察各组12,24,48,72 h细胞形态变化、AECII标记(肺表面活性物质蛋白B,SP-B)及成纤维细胞标记(成纤维细胞特异性蛋白1,FSP-1)蛋白及mRNA的表达情况。结果表明,随着TGF-β1干预时间的延长及浓度的升高,AECII逐渐由鹅卵石样变成纺锤体形状,获得成纤维细胞样外观。蛋白水平,AECII标记SP-B表达逐渐减弱,成纤维细胞标记FSP-1表达逐渐增强,48 h中浓度组及24 h高浓度组两者可见明显的共表达,同时,其SP-B mRNA表达较同时间对照组下调,而FSP1 mRNA表达较同时间对照组上调。低浓度组各时间点上述表现不明显。TGF-β1促使AECII向成纤维细胞转化(EMT),且具有时间及浓度依赖性。
- 刘芳君宋思思邓春郭春宝符州刘恩梅刘莎谭利龚财惠
- 关键词：TGF-Β1肺泡II型细胞间质细胞表型
- 肺内上皮-间质转化机制在小鼠支气管肺发育不良中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的观察肺表面活性物质蛋白B(Surfactant protein B,SP-B)及成纤维细胞特异性蛋白1(Fibroblast-specificprotein 1,FSP1)在支气管肺发育不良(Bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型小鼠中的表达情况,探讨肺内上皮-间质转化(Ep-ithelial-mesenchymal transformation,EMT)在BPD中的作用及机制。方法建立BPD小鼠模型;免疫组化法观察各组小鼠肺组织病理学改变;Masson染色法观察各组小鼠肺组织胶原含量;免疫荧光双标法对EMT进行动态监测;荧光定量PCR法检测SP-B和FSP1基因mRNA的表达水平;体积描述法检测小鼠肺功能改变。结果与对照组比较,BPD组中浓度氧暴露后,小鼠肺组织逐渐出现肺泡化发育障碍、间隔增厚、胶原沉积明显;给氧14、21 d时,BPD组小鼠肺组织出现SP-B和FSP1共表达,而对照组未见共表达;与对照组比较,给氧21 d时SP-B基因mRNA表达水平明显下降,FSP1明显升高(P均<0.05);与对照组比较,BPD组呼吸频率(F)及潮气量(TV)均明显降低(P<0.05)。结论通过EMT机制生成的成纤维细胞是BPD中肺纤维化的重要来源。
- 刘芳君邓春郭春宝符州
- 关键词：上皮-间质转化支气管肺发育不良
- 基因芯片筛选Sirt1在小鼠急性呼吸窘迫综合征炎症损伤中相互作用的基因被引量：1
- 2017年
- 目的筛选小鼠急性呼吸窘迫综合征炎症损伤中与Sirt1相互作用的基因,探讨Sirt1在急性呼吸窘迫综合征炎症反应中的作用机制。方法购买Sirt1过表达(Tg)小鼠和野生型(WT)小鼠,饲养、繁殖、鉴定新生小鼠基因型;Western Blot鉴定小鼠肺组织Sirt1表达差异;建立ARDS小鼠模型,观察ARDS小鼠肺组织HE染色病理变化,并采用ELISA检测两种ARDS小鼠肺组织IL-6表达差异;采用基因芯片筛选Sirt1在小鼠ARDS炎症损伤中相互作用的基因。结果通过聚合酶链反应鉴定出Tg和WT两种不同基因型的小鼠;免疫印迹法检测小鼠肺组织Sirt1的表达差异结果提示Tg小鼠肺组织Sirt1含量显著高于WT小鼠(P=0.001);不同浓度LPS腹腔注射12 h后小鼠肺组织HE染色病理变化提示随着LPS用量增加,两种小鼠肺组织损伤程度明显增加,且WT-ARDS小鼠的肺组织损伤程度比Tg-ARDS小鼠更为严重;当LPS用量达到20 mg/kg时两组小鼠存活率<50%;两种小鼠腹腔注射LPS(15 mg/kg)后,肺组织IL-6的表达随时间推移逐渐呈现逐渐增高的趋势,在3,6,12,24 h WT-ARDS组肺组织IL-6表达浓度显著高于Tg-ARDS组(P<0.05),尤其在12 h差异最为显著(P=0.007)。基因芯片筛选出在小鼠ARDS炎症损伤中与Sirt1相互作用的基因有Ubd,Ube2d2b,Olfm4,Il1rl1,Hivep3和Lpar1。结论 Sirt1可能通过调控Ubd,Ube2d2b,Olfm4,Il1rl1,Hivep3和Lpar1的表达减轻ARDS小鼠的炎症损伤。
- 刘俊彦吕学军赵维胡明冬李玉英王关嵩徐剑诚钱桂生
- 关键词：急性呼吸窘迫综合征核转录因子ΚB
- 缺氧诱导因子在新生儿坏死性小肠结肠炎中的作用机制研究
- 2021年
- 该文探讨了缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在新生儿坏死性小肠结肠炎(neonatal necrotizing enterocolitis,NEC)中的作用机制。收集8例NEC患儿小肠组织作为疾病组和6例胃肠道畸形患儿小肠组织作为对照组。将40只7日龄的C57BL/6新生鼠(WT)分为NEC组(WT/NEC,n=20)和对照组(WT/DF,n=20),40只7日龄C57BL/6背景的谷氧还原蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)基因敲除鼠(Grx1^(–/–))分为NEC组(Grx1^(–/–)/NEC,n=20)和对照组(Grx1^(–/–)/DF,n=20)。Western blot检测人和小鼠肠组织HIF-1α、小鼠肠组织血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA);qRT-PCR检测小鼠肠道血管内皮生长因子VEGFA mRNA,免疫荧光染色检测人和小鼠肠组织HIF-1α。结果显示,NEC患儿小肠组织中HIF-1α表达量较对照组显著降低(P<0.05);WT/NEC小鼠小肠组织HIF-1α和VEGFA蛋白表达量较WT/DF显著降低(P<0.05);WT/NEC组小肠组织中VEGFA表达量较WT/DF组显著降低(P<0.05),Grx1^(–/–)/NEC组VEGFA表达量较WT/NEC组显著升高(P<0.05);HIF-1α主要表达于小肠上皮细胞,NEC患儿肠组织和NEC小鼠肠组织中HIF-1α免疫荧光染色强度均较各自对照组显著降低,而Grx1基因敲除显著提高了NEC小鼠肠组织HIF-1α免疫荧光染色强度。该研究结果表明,HIF-1α在NEC患儿和NEC小鼠中有重要作用,其机制可能与肠道微血管的发育相关。
- 张云飞张霄郭春宝
- 关键词：坏死性小肠结肠炎缺氧诱导因子血管内皮生长因子
- 支气管肺发育不良新生鼠肺组织甲状腺转录因子及波形蛋白的表达意义被引量：3
- 2012年
- 目的观察高氧暴露新生鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)标记[甲状腺转录因子,(TTF-1)]及成纤维细胞标记[波形蛋白,(Vimentin)]的表达规律,探讨支气管肺发育不良(BPD)发病机制。方法新生小鼠随机分为:对照组及BPD组,高浓度氧暴露制作BPD小鼠模型,观察肺组织病理变化,于实验后3、7、14、21 d应用免疫荧光双标及荧光定量PCR技术检测TTF-1及Vimentin蛋白、mRNA的表达情况。结果与对照组比较,BPD组高氧暴露后小鼠肺组织逐渐出现肺泡发育障碍、胶原沉积明显;AECⅡ标记TTF-1表达逐渐减弱,成纤维细胞标记Vimentin表达逐渐增强,14、21 d时两者可见明显的共表达;BPD组21 d TTF-1mRNA表达较同时间对照组下调(P<0.05),而Vimentin mRNA表达较同时间对照组上调(P<0.05)。结论高氧致AECⅡ向成纤维细胞转化可能是BPD纤维化的重要机制。
- 陈坤蒋朴邓世雄王念
- 关键词：支气管肺发育不良高氧症
- 高氧及TGF-β1对肺泡Ⅱ型细胞上皮间质转化的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨高氧及TGF-β1干预小鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)后,是否发生上皮间质转化(EMT)及其影响。方法:小鼠肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12,随机分为空气暴露组、高氧暴露组、TGF-β1干预空气暴露组、TGF-β1干预高氧暴露组。观察各组6、12、24、48 h细胞形态变化。应用细胞免疫荧光双标法及荧光定量PCR法检测各组各时间点肺表面活性物质B(SP-B)及成纤维细胞特异性蛋白1(FSP1)蛋白和mRNA的表达情况。结果:随着高氧及TGF-β1干预时间的延长,AECⅡ逐渐由鹅卵石样变成纺锤体形状,获得成纤维细胞样外观。同时,AECⅡ特异性标记SP-B表达逐渐减弱,成纤维细胞特异性标记FSP1表达逐渐增强,24 h时两者时可见明显的共表达。高氧暴露组、TGF-β1干预空气暴露组及TGF-β1干预高氧暴露组24、48 h SP-B mRNA表达较同时间空气暴露组下调,而FSP1 mRNA表达较同时间空气暴露组上调。结论:高氧及TGF-β1均能诱导AECⅡ发生上皮间质转化,且两者对EMT的作用具有时间依赖性。
- 刘芳君邓春郭春宝符州
- 关键词：上皮-间质转化高氧TGF-Β1
