浙江省教育厅科研计划(20010036)
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 相关作者:林圣云陈均法郑智茵沈建平胡致平更多>>
- 相关机构:浙江省中医院杭州市第二人民医院更多>>
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- 青蒿琥酯诱导凋亡的U937细胞负载树突状细胞后的免疫应答被引量:3
- 2007年
- 本研究探讨凋亡白血病细胞负载的树突状细胞(dendritic cells,DC)能否诱导特异性细胞毒T淋巴细胞反应。用青蒿琥酯诱导U937细胞凋亡,从正常人外周血单个核细胞诱生DC,将凋亡U937细胞负载DC,并添加TNF-α诱导DC成熟,然后与自体T淋巴细胞共育,并联合IL-2以诱生细胞毒性T淋巴细胞(CTL);应用流式细胞术分析DC和T细胞免疫表型,采用Dextran-FITC内吞试验检测DC的抗原摄取能力;用ELISA法检测IL-12p70的产生;采用MTT法检测凋亡U937细胞负载及未负载DC诱导的自体T淋巴细胞对不同的靶细胞(U937细胞和NB4细胞)的杀伤效应。结果表明:青蒿琥酯1μg/ml作用于U937细胞48小时后,U937细胞的凋亡率达51.52%,DC在未成熟阶段时吞噬Dextran-FITC的能力最强,负载凋亡U937细胞之后并不能促使未成熟DC(iDC)分化为成熟DC(mDC)。凋亡U937细胞负载后的iDC在TNF-α的作用下能够成为mDC。与未负载的mDC相比,凋亡U937细胞负载后的mDC(mDC-ApoU937)分泌IL-12p70水平明显增高,而且由其所激发和扩增的T细胞以CD8+的T细胞为主。细胞毒性实验显示:mDC-ApoU937诱导的T细胞的对U937细胞的杀伤显著超过对NB4细胞的杀伤。结论:mDC-ApoU937能有效地诱导特异性抗白血病效应。
- 郑智茵王建峰胡致平沈建平高瑞兰叶宝东林圣云沈一平陈均法罗秀素周郁鸿虞荣喜
- 关键词:树突状细胞青蒿琥酯CTL
- 凋亡U937细胞负载的树突细胞介导的免疫应答
- 2007年
- 目的:探讨凋亡U937细胞负载的树突细胞(DC)能否介导抗白血病免疫应答。方法:用紫外线辐照诱导U937细胞凋亡。从正常人外周血单个核细胞诱生DC,用凋亡的U937细胞负载DC并添加肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导DC成熟,然后与自体T淋巴细胞共育,并联合白细胞介素(IL)-2以诱生肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)。采用免疫荧光标记和流式细胞术测定DC膜分子的表达;Dextran-FITC内吞试验检测DC的抗原摄取能力;用ELISA法检测IL-12p70的产生;采用MTT法分别检测CTL的增殖和细胞毒效应。结果:U937细胞经紫外线辐照后培养2h,凋亡指数明显增高,并于照射后4~8h时达高峰(56.61%~66.96%)。DC在未成熟阶段时吞噬Dextran-FITC的能力最强,负载凋亡U937细胞之后并不能促使未成熟DC(i DC)分化为成熟DC(mDC)。凋亡U937细胞负载后的i DC在TNF-α的作用下成为mDC后其分泌IL-12p70显著增加的同时可显著诱导T细胞增殖生成对U937细胞具有特异杀伤作用的CTL。结论:凋亡细胞负载的DC能有效地诱导抗白血病效应。
- 郑智茵沈建平陈均法胡致平林圣云
- 关键词:白血病树突细胞中波紫外线CTL