国家自然科学基金(30671244) 作品数:15 被引量:64 H指数:6 相关作者: 王冬梅 陈琰 刘刚 侯春燕 张洁 更多>> 相关机构: 河北农业大学 浙江大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省自然科学基金 河北省应用基础研究计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
植物抗病防卫反应中的特异性钙信号 被引量:4 2008年 在植物细胞中,钙离子是普遍存在的第二信使,参与多种信号途径。大量研究表明,钙信使系统参与植物与病原菌互作的信号转导过程。近些年来,特异性钙信号在抗病中的作用越来越受到关注。文章综述了近年来在植物表达防卫反应过程中特异性钙信号的形式及其形成的生理机制的研究进展。 张蓓 刘刚 王冬梅关键词:钙信号 防卫反应 钙通道 小麦洛夫林10悬浮细胞系培养条件的优化与筛选 2011年 [目的]优化和筛选小麦洛夫林10悬浮细胞系培养的条件。[方法]以成熟胚为外植体,探讨了附加不同浓度KT对愈伤组织诱导和继代培养的影响,并通过调整2,4-D、KT和蔗糖的浓度及初始接种量对悬浮细胞系的培养条件进行了优化筛选。[结果]小麦洛夫林10愈伤组织的诱导培养基中不宜加入KT;初始接种量为1.5 g,液体培养基中添加1.00~2.00 mg/L 2,4-D、0.05~0.10 mg/L KT和30.00g/L蔗糖,最有利于小麦洛夫林10悬浮细胞系的稳定。[结论]为以悬浮细胞系为材料深入开展小麦抗病机制的研究奠定了基础。 陈琰 张洁 王冬梅关键词:小麦 成熟胚 愈伤组织 钙调素参与小麦抵抗叶锈菌侵染的信号转导过程的研究 <正>钙调素(calmodulin,CaM)是一种重要的Ca2﹢结合蛋白,参与介导了众多生理过程的调控。近年来利用分子生物学手段对CaM基因及其表达进行研究发现,在植物体中存在着多种CaM基因,它们编码相同或相似的 侯春燕 王冬梅关键词:钙调素 实时定量PCR 文献传递 抑制性差减杂交技术(SSH)在植物学研究中的应用 被引量:6 2008年 抑制性差减杂交是一种基于转录水平的杂交技术,能将差异表达基因扩增千倍后富集,具有高效、灵敏、操作简单,假阳性率低等特点,已经越来越多的被应用在植物学研究领域。就该技术的原理、特点及其在植物学方面的应用研究进展作一简要介绍。 阎爱华 王冬梅关键词:抑制性差减杂交 植物学 Gene expression profiles during the initial phase of infection process of Puccinia recondita f.sp.tritici to Triticum aestivum The transcript regulation of resistance-related gene response to early infection stage of Puccinia recondita f... Ai-Hua Yan,Li-Feng Zhang,Yun-Wei Zhang,Dong-Mei Wang~(**) Collge of Life Science,Agricultural University of Hebei,Lekainanda Street 2596#,Baoding 071001, Hebei Province,P.R.China关键词:WHEAT 文献传递 小麦自噬标志分子ATG6的原核表达及其抗血清制备 2011年 克隆小麦(Triticum aestivum L.)品种‘洛夫林10’(L10)中的ATG6(动物同源物为Beclin1)基因,并构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,经纯化后制备其兔抗血清。结果表明:从小麦品种L10中克隆获得1个ATG6的片段,长为1326 bp,利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,实现了对ATG6片段在原核系统的特异性表达。经蛋白纯化后,制备了其兔抗血清并通过Western blot鉴定了其特异性。ATG6抗体制备的成功,为小麦中ATG6基因和自噬功能的研究提供了研究基础。 刘刚 吴洪波 王冬梅关键词:免疫印迹 抗血清 融合蛋白 原核表达 受叶锈菌侵染的小麦细胞间隙液中抗病相关蛋白的研究 小麦叶锈菌(Puccinia triticina)属活体营养型寄生菌,具有高度的寄生专化性,它所引起的小麦叶锈病是一种世界性病害。分析鉴定感染叶锈菌的小麦叶片细胞间隙液(Intercellular washing flu... 吕术超 侯春燕 刘刚 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 细胞间隙液 防卫反应 双向电泳 Β-1,3-葡聚糖酶 文献传递 小麦与叶锈菌互作过程中的H_2O_2与HR 被引量:19 2008年 以小麦品种洛夫林10为材料,与叶锈菌生理小种165和260分别组成亲和组合和不亲和组合,以荧光探针DCFHDA标记H2O2的变化,并借助荧光显微镜原位地直观显现了叶锈菌侵染过程中小麦叶片中H2O2的动态变化。结果表明,亲和组合中H2O2爆发表现为单峰曲线,峰值出现在接种后12h;不亲和组合中表现为双峰曲线,峰值分别出现在接种后12h和20h,第二个峰比第一个高约一倍,且不亲和组合中H2O2爆发的强度远远大于亲和组合。另外,通过药理学试验,采用活体注射法对小麦叶片在接种叶锈菌小种260之前分别预注射抗氧化药物AsA、DTT以及NADPH氧化酶抑制剂DPI和咪唑,观察这些药物对不亲和组合中寄主叶片产生的H2O2和HR的影响。结果表明,抗氧化药物和NADPH氧化酶抑制剂均使寄主叶片中H2O2爆发的强度降低,表现在两个H2O2峰均受到抑制,其中第二个峰受抑制的程度更明显,同时寄主细胞发生HR的面积减小。 祁艳 刘刚 侯春燕 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 H2O2 IWF诱导小麦悬浮细胞产生NO及其与Ca^(2+)的关系 被引量:5 2011年 【目的】以感染叶锈菌的小麦叶片细胞间隙液IWF-260作为激发子,刺激小麦洛夫林10悬浮细胞,探讨悬浮细胞受激发子刺激引发的NO变化情况及其产生的可能分子机制。【方法】采用Greiss试剂法及荧光分子探针DAF-2DA标记法检测胞内NO的动态变化,同时借助药物学试验探讨Ca2+和NO的关系。【结果】IWF-260能诱导小麦悬浮细胞产生NO,NO在IWF-260刺激诱发的细胞死亡过程中发挥重要作用。药物学抑制剂试验证明NOS和NR及胞外钙离子内流均与IWF-260刺激小麦悬浮细胞产生的NO有密切关系,且在NO的产生途径中,NR途径为主要途径。【结论】IWF-260能够诱导小麦悬浮细胞产生NO,NOS、NR及胞外Ca2+内流参与了此过程。 陈阳辉 刘静 陈琰 侯春燕 王冬梅关键词:NO 细胞间隙液 一氧化氮合酶 硝酸还原酶 钙 胞内钙库对小麦叶锈菌侵染之过敏反应的影响 被引量:15 2010年 使用影响胞内Ca2+库和钙通道的药物预注射小麦叶片,观察其对小麦受叶锈菌侵染诱发的过敏反应(HR)的影响。结果表明,对小麦叶片预注射不同浓度的胞内Ca2+螯合剂(BAPTA-AM)后接种叶锈菌小种260,随着注射药物浓度的增高,寄主细胞发生HR的面积逐渐减小。而注射胞内Ca2+激活剂(caffiene)后接种,HR的面积有所增加。进一步用胞内Ca2+通道抑制剂(herapin、RR和8-Br-cADPR)预处理,结果herapin对HR的影响呈浓度依赖型,而RR和8-Br-cADPR对HR没有明显作用。据此提出,胞内Ca2+可能参与小麦抵抗叶锈菌侵染过程中钙信号的形成,且这一过程主要通过IP3途径完成。 张蓓 阎爱华 刘刚 刘猛 侯春燕 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 CA2+ 过敏性反应