浙江省自然科学基金(N29801)
- 作品数:5 被引量:33H指数:2
- 相关作者:严杰戴宁李爱清朱永良竺可青更多>>
- 相关机构:浙江大学浙江大学医学院附属邵逸夫医院浙江大学医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 抑制差减杂交技术筛选幽门螺杆菌对甲硝唑耐药相关DNA片段被引量:2
- 2004年
- 目的筛选幽门螺杆菌(Hp)临床分离菌株对甲硝唑耐药的相关DNA片段。方法从浙江大学医学院附属邵逸夫医院消化内科就诊患者胃粘膜活检标本中分离培养Hp。采用二倍平皿稀释法确定Hp菌株对甲硝唑的耐药性。分别选取敏感菌和耐药菌各1株,提取其基因组DNA,采用抑制差减杂交技术分别以其中1株作为被检菌,另1株作为参考菌进行基因组差异研究。结果73.8%(31/42)临床分离的Hp菌株对甲硝唑耐药。耐药株共检出10余个大小约在200~1000bp的特异性DNA片段。结论通过抑制差减杂交技术可筛选出耐药株和敏感株各自特异的DNA片段。
- 李爱清戴宁朱永良严杰
- 关键词:幽门螺杆菌甲硝唑DNA片段HP
- 人细胞色素P450 2B6的GST融合蛋白及其抗体的制备被引量:2
- 2000年
- 目的 :获得纯化抗原用于制备CYP2B6多克隆抗体。方法 :PCR扩增目的基因片段 ,亚克隆入融合蛋白表达载体pGEX - 3b ,构建了重组质粒pGEX/ 2B6。然后将该重组质粒转化大肠杆菌DH5α ,IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE分离 ,获纯化融合蛋白GST - 2B6。用GST - 2B6免疫BALB/C小鼠 ,自腹水中获取CYP2B6多克隆抗体 (2B6pAb)。结果 :融合蛋白GST - 2B6 (CYP2B6 2 0 2~ 35 2aa) ,并获其特异的多克隆抗体。结论 :通过构建融合蛋白重组表达质粒pGEX/ 2B6 ,用获得的初步纯化融合蛋白GST -
- 林筱洁罗建红余应年
- 关键词:细胞色素P450抗体
- 幽门螺杆菌rdxA基因突变与耐药性关系的研究被引量:5
- 2003年
- 目的 :探讨幽门螺杆菌 (Hp)临床菌株 rdx A基因变异与甲硝唑耐药性的关系。方法 :从患者胃粘膜活检标本中分离培养 Hp。采用纸片扩散法初筛和二倍平皿稀释法确定 Hp菌株对甲硝唑的耐药性。提取 2 1株 Hp基因组 DNA进行 PCR扩增 ,T- A克隆后测序 ,与文献报道的 Hp 2 6695株及 134株临床分离株 rdx A基因序列进行比较。结果 :76.1% (15 / 2 1)的 Hp菌株对甲硝唑耐药。 PCR可扩增出 886bp的 rdx A基因目的片段。与 Hp 2 6695株rdx A基因序列比较 ,扩增产物核苷酸序列的同源性为 90 .1%~ 95 .1%。甲硝唑耐药菌株 rdx A基因出现碱基插入/缺失及碱基替换而引起的突变。结论 :rdx A基因突变是 Hp对甲硝唑耐药的重要因素。
- 戴宁周刚严杰
- 关键词:幽门螺杆菌基因突变甲硝唑微生物抗药性
- 幽门螺杆菌对甲硝唑耐药相关基因片段的筛选及克隆分析
- 2007年
- 目的:筛选幽门螺杆菌(Hp)对甲硝唑耐药相关基因片段。方法:以5株临床分离的耐药株作为被检菌,1株敏感株作为参考菌,采用抑制差减杂交技术进行基因组差异研究,获取Hp对甲硝唑耐药相关的基因片段,并以斑点杂交方法对所获的基因片段进行了杂交鉴定。结果:在获得的差减阳性克隆中,经斑点杂交筛选后共有37个基因片段的拷贝数在耐药和敏感菌株中存在差异(2倍以上),而其中17个片段其拷贝数存在明显差异(3倍以上)。对以上17个差异片段进行单向测序,根据最高同源性比对结果,分别代表二肽ABC载体渗透酶(dppB)、二肽ABC载体结合蛋白(dppA)等10个基因的同源基因片段在耐药株中存在高拷贝数。结论:所获得的10个差异基因片段可能与幽门螺杆菌对甲硝唑耐药相关。
- 李爱清戴宁严杰朱永良
- 关键词:螺杆菌螺杆菌
- 50年尸体解剖资料分析被引量:24
- 2004年
- 目的 探讨尸检率变迁及其原因 ,分析不同时期疾病分布及尸检与临床诊断的符合率。方法 回顾分析 5 0年来尸体解剖 316 2例 ,比较病理诊断与临床诊断是否相符。结果 (1)各年代尸检数最多在 196 0~ 196 9年为 10 37例 ,最少在 1990~ 1999年为 10 2例 ;(2 ) 316 2例总误诊率为36 2 4 % ,误诊率最高在 1970~ 1979年为 4 3 19% ,1990~ 1999年为 4 1 80 % ;其中肿瘤误诊率最高 ,为6 2 4 2 % ,其次循环系统疾病误诊率为 6 1 81% ,寄生虫病误诊率为 4 9 18% ;深部真菌感染率为2 2 8% ,误诊率为 86 10 % ;(3)疾病分布以呼吸系统占首位 ,为 32 2 9% ,其次为传染病 11 6 1% ,消化系统疾病 11 0 7%。结论 5 0年来尸检率逐年下降 ,而误诊率居高不下 ,积极开展尸检十分必要。
- 竺可青章锁江
- 关键词:尸体解剖病理诊断误诊率