云南省教育厅科学研究基金研究生项目(2012J052)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：田斌许玉兰张瑞丽段安安蔡年辉更多>>
- 相关机构：西南林业大学北京林业大学更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金研究生项目云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 云南松基因组微卫星富集文库的构建被引量：2
- 2014年
- 采用磁珠富集法构建云南松微卫星富集文库。云南松基因组DNA经RsaⅠ酶切,与特定接头连接,再用接头特异引物进行PCR扩增。连接扩增产物与用生物素标记的(AG)12、(AT)12、(CG)12、(GT)12、(ACG)12、(ACT)12和(CCA)8探针杂交,通过链霉亲和素偶联的磁珠捕捉含接头和微卫星序列的片段并扩增,将获得的片段连接到pMD-19T载体上,转化至大肠杆菌JM109感受态细胞中,成功构建了云南松微卫星富集文库。通过PCR检测从文库中筛选阳性克隆,在383富集阳性菌落中获得阳性克隆257个,经测序分析,在获得的159条序列中,有143条含有SSR,其中完美型占65.73%,非完美型占23.78%,混合型占10.49%。结果表明,磁珠富集法构建云南松基因组微卫星文库高效、可行的,文库的构建为微卫星位点的分离、遗传多样性的分析等奠定基础。
- 许玉兰张瑞丽田斌蔡年辉康向阳段安安
- 关键词：云南松富集文库微卫星
